酿酒葡萄原生质体再生植株

将酿酒葡萄品种白诗南、梅郁的花丝接种在含6BA 2.0 mg .l-1、2,4-D 0.5 mg.ll-1的B5诱导培养基上,诱导产生胚性愈伤组织.胚性愈伤组织经液体悬浮培养形成含大量胚性细胞团的悬浮培养物.用Cellulase Rs2 %、Pectolyase Y23 0.3 %,5 mmol.ll-1 CaCl2.l2H2O、0.6 mol.ll-1甘露醇、0.3 %葡聚糖硫酸钾、pH5.6～5.8的酶混合液从胚性细胞团分离得到原生质体.原生质体培养到第5天出现第一次分裂,40 d形成上百个细胞的大细胞团,50 d形成0.5～1.0 mm大小的小愈伤组织.这些小愈伤组织在含6BA 0.5 mg.ll-1的B5分化培养基上分化出胚状体进而形成幼苗,在生根培养基上生根形成再生植株.
[目的] 从啤酒废酵母中分离纯化出多糖,并对其组成和性质进行初步鉴定.[方法]用常规方法分离纯化啤酒酵母多糖,并用HPLC、比旋度测定和醋酸纤维薄膜电泳等方法测定BPS2.[结果]粗多糖收率为9.7%,为浅色粉灰.BPS2为均一组分,苯酚-硫酸法测定其糖含量为95.2%,GC分析其单糖组成为Man和Glc,摩尔比为1.08∶ 1.00.[结论]试验提取的粗多糖为一种新多糖,其主要成分为BPS2,为啤酒酵母的利用提供了基础.
酵母菌具有吸附富集重金属离子的能力.利用海藻酸钠对酿酒酵母菌进行固定,对固定化后的酿酒酵母菌吸附锶的能力做了对比研究.结果表明,海藻酸钠颗粒对锶有一定吸附作用,吸附速度较快,但是结合不稳定,未固定的酵母菌吸附较稳定,但是在低浓度时,吸附率不高;固定化酵母菌对锶的吸附分两个阶段,低质量浓度(10 mg/L)时,吸附率可达80%.在不同质量浓度梯度下(10～100 mg/L)吸附研究中发现,三者的吸附率均随浓度增大而减小,但吸附总量均有所增加.随培养时间延长,未固定与固定化酵母菌对锶的吸附率和吸附量趋于一致.结果表明海藻酸钠可以作为酵母菌活细胞生长固定化载体并表现出对低浓度Sr2+的较好吸附效果.
[目的]为美洲葡萄品种Conquister的栽培推广提供科学依据.[方法]以适应杨凌种植的美洲制汁品种康可和欧亚酿酒品种梅鹿特为对照,对Conquister进行物候期、栽培性状、适应性等的研究.[结果]在杨凌气候条件下,Conquister从萌芽至采收需129 d,活动积温2 768.6 ℃,为中早熟品种.它生长势强,结果枝百分率高,较丰产,成熟时果香浓郁,有肉囊,果汁浅红,酸甜可口.在杨凌,它的抗性表现极强,生命力旺盛,适应性强,易栽培.[结论]该品种的丰产性、浆果品质优于对照品种,其抗病性、适应性与对照品种康可相近.果实香气浓郁,酸甜适口,有肉囊,可发展为优良的制汁品种.
[目的]使酿酒酵母高效表达糖化酵母糖化酶基因.[方法]利用PCR技术从糖化酵母中扩增出大小为2700 bp左右的带有启动子的糖化酶基因STA1.通过限制性内切酶BspDI与Acc65I双酶切,将目的基因STA1连接到穿梭质粒pRS416中构建重组质粒pRS416-sta1,转化酿酒酵母通过筛选.[结果]糖化酶活性最高为120 U/ml,酶的最适温度为60℃,最适pH为5.0,在酶催化反应2h后,酶剩余活力能达到约90％.[结论]通过基因工程手段得到高效表达糖化酶基因的酿酒酵母工程菌株.
以啤酒酵母粉为原料,综合考虑提取率、蛋白质含量和多糖含量3个指标,在单因素实验的基础上,采用正交实验,得出碱-酶法提取废啤酒酵母中β-(1,3)-D-葡聚糖的理想工艺条件:酵母粉经过水洗,脱色后,按照150 mL:10 g的比例加入3%的NaOH溶液,在80℃水浴条件下水解2 h,离心,洗涤,调整pH至8.5～9.0,再加入600 U/g碱性蛋白酶(以干酵母粉计),在55℃下水解24 h,离心,沉淀,干燥得到成品.β-(1,3)-D-葡聚糖的提取率为13.8%,产品多糖含量85.2%、蛋白质含量1.2%、水分9.2%,产品为乳白色粉状固体,色度为L值83.07、α值2.12、b值8.86.