酿酒酵母YBR019C 基因缺失突变的分析

【目的】研究目的基因YBR 019C 缺失对酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae ）菌株糖代谢和乙醇发酵的影响。【方法】以酿酒酵母野生菌 NF1002为出发菌株，选择2号染色体上的基因 YBR 019C 为目的基因，以质粒pUG6和 pUG66为模板进行 PCR，构建带有 Cre/loxP 系统的酿酒酵母YBR 019C 基因敲除组件，并转化酿酒酵母 NF1002，利用筛选标记 Kan r和 Ble r与YBR 019C 基因进行同源重组，筛选YBR 019C 双倍体缺陷型菌株。利用蔗糖和甘蔗糖蜜为碳源，对突变菌进行发酵特性的研究。【结果】成功获得YBR 019C 双倍体缺陷型菌株 NF-ybr。碳源同化实验表明，突变株和野生菌均能利用葡萄糖和蔗糖，不能利用乳糖和木糖；但相比野生菌，突变株利用棉子糖和麦芽糖的能力有所下降，而且完全不能利用半乳糖。蔗糖发酵实验表明：突变株 NF-ybr 与野生菌株相比，在发酵终点乙醇浓度提高10．7％，发酵周期有所延长。按目前甘蔗糖蜜乙醇生产的发酵工艺，突变株在30℃发酵72h 的醪液乙醇含量为12．52％，低于野生菌的13．89％。【结论】YBR 019C 基因的缺失影响了菌株对糖份的利用，导致乙醇发酵能力不及野生菌。本研究为菌株高效快捷的基因改造提供了参考。
马铃薯渣是马铃薯淀粉生产加工过程中产生的副产物.通过微生物发酵可有效改善马铃薯渣的营养价值,从而提高其饲用价值.该文通过研究菌种对发酵马铃薯渣饲料中粗蛋白、粗纤维含量及蛋白酶活、纤维素酶活的影响,为发酵马铃薯渣生产蛋白饲料提供科学依据.采用8株菌种对废马铃薯渣进行固态发酵,以未接菌种的培养基为对照,通过单一菌种、双菌组合、菌种比例的发酵试验,对发酵产物中粗蛋白、粗纤维含量及蛋白酶活、纤维素酶活进行分析.结果表明,黑曲霉Z9和啤酒酵母PJ组合为最佳菌种配伍,且当菌种比例为1∶1时,粗蛋白含量为41.72％,蛋白酶活为1 344.93 U/g,纤维素酶活为120.87 U/g,分别比对照组含量提高了78.69％、296.74％和1 473.77％;粗纤维含量为8.47％,比对照组降低了31.96％.
本发明涉及一种多粮浓酱兼香型白酒生产方法，其特征是：取粮食，粉碎后加入母糟，均匀拌合；将粮食和母糟的混合物进行混蒸续糟，蒸馏出原酒；将蒸馏后的粮食和母糟的混合物中加入曲药，均匀拌合，再进行堆积、入窖、泥窖发酵，制得母糟。母糟加入到下道工序的粮食，进行混蒸续糟，蒸馏出原酒。本发明的积极效果在于：产品具有多粮浓香型的多粮浓香突出，酒体丰满，醇厚谐调，后味干净的优点，又具有酱香型工艺生产的酒体细腻，优雅，后味绵长，酱香明显。本工艺填补了我国多粮浓酱兼香型白酒的单型发酵工艺的空白。对我国公认的通过浓香型和酱香型分型发酵，原酒各定标准单独储存后勾调而成的浓酱兼香型白酒工艺有很大的创新。
本发明公开了一种白酒勾兑方法，属于白酒加工技术领域，包括以下步骤：将调味料用糯米纸包裹形成的调味包置于放置槽内；将浓香型、酱香型、清香型三种香型白酒混合形成基酒；将基酒浸过所有放置槽内的调味包；将搅拌棍穿过环形通道并伸入到勾兑罐内，外部动力通过握持部带动搅拌棍沿环形通道运动；当步骤（4）中搅拌棍沿环形通道运动5?10min后，膨胀块吸收热量后发生体积的膨胀，膨胀块体积膨胀使钢球掉落在勾兑罐中完成基酒和调味料的充分混合。本方案的白酒勾兑方法简单，同时调味料是均匀的分布在勾兑罐各处的，因此本方案勾兑十分的快速和均匀。
本发明有色白酒属于有色的营养性白酒及其制备方法，本酒中含有普通白酒没有的营养物质氨基酸和糖等，酒的颜色为用红高粱为原料制备而得的金黄色，晶莹剔透，无沉淀，该酒的制备方法是将红高粱只发酵不蒸馏，用白酒萃取发酵红高粱，使白酒获得发酵红高粱的营养物质氨基酸、糖等，并获得红高粱色素，具体制备步骤：泡粮、初蒸、闷水、复蒸、摊粮加曲、收垛发酵、萃取、勾兑等，本酒营养丰富、利于健康、呈金黄色、晶莹剔透、无沉淀、口感酸甜适度、舒适柔和，利于销售，是一种营养性的有色白酒。
为了回收高浓度发酵废水中的有用资源,以近平滑假丝酵母(C.parapsilosis)、热带假丝酵母(C.tropicalis)、产朊假丝酵母(C.utilis)、汉逊德巴利酵母(D.hansenli)、酿酒酵母(S.cerevisiae)、皮状丝孢酵母(T.cutaneum)、白地霉(G.candidum)和黑曲霉(A.niger)8种常见工业菌种为研究对象,通过摇瓶发酵,考察了不同菌种利用高浓度发酵废水生产单细胞蛋白(SCP)的能力,同时比较废水灭菌和不灭菌两种条件对SCP产量的影响.结果表明,在废水COD浓度69 600 mg·L-1、TN浓度4048 mg· L-1、初始pH6.5、28℃、150 r·min-1、灭菌条件下发酵40 h,C.parapsilosis的菌体生物量和粗蛋白含量最高,可达7.04 g·L-1和1.87 g· L-1,对废水中COD和TN的去除率分别为33.5％和20.1％;C.parapsilosis和G.candidum可作为废水生产SCP并高效回收氮素和有机质的优势菌种.在不灭菌条件下,各菌种生产SCP的能力明显高于灭菌条件,且不同菌种产量差异不大,生物量和粗蛋白含量平均高达8.0g·L-1和4.0g·L-1,废水COD和TN的去除率分别为47％和33％.