酒精耐受型酿酒酵母菌的诱变筛选

[目的]筛选酒精耐受型酿酒酵母菌最佳菌株.[方法]利用紫外线对酿酒酵母JL2008 进行诱变处理,并结合氯化三苯四氮唑(TTC)进行筛选,对5株对酒精具有较强耐受性的突变株SC1～SC5的酒精耐受性进行比较,选择出2株酒精耐受性较强的突变株(SC1和SC5)进行酒精发酵,测定其生长速率和发酵性能.[结果]2株菌的酒精耐受能力远远高于出发菌株,均能在酒精体积分数为9%的培养基上生长;在含糖15%的培养基中,SC1的酒精发酵终浓度和发酵效率与原始菌株大致相同;在含糖30%的培养基中,SC1的酒精发酵终浓度和发酵效率分别是16.54%和85.2%,均高于原始菌株.[结论]突变株SC1在含酒精培养基中的生长和在浓醪条件下的发酵效果优于JL2008,是一株极具潜力的应用于浓醪发酵的酵母菌株.
以酿酒酵母基因组DNA为模板,根据CenBank上公布的酿酒酵母Ravlp基因(rav1)序列和表达裁体特性设计 特异性引物,PCR扩增得到4 074 bp的DNA片段,将PCR产物和原核表达栽体pET28a(+)同时进行双酶切；双酶切后的PCR产物和表达栽体进行连接,构建成重组质粒pET28a-ravl.再将pET28a-ravl转化到BL21( DE3)感受态细胞中.经IPTG 16℃低温诱导40h表达His-tag融合的Ravlp.诱导后的菌体进行超声波破碎,然后用GE healthcare公司的AKTA蛋白纯化仪和His Trap HP I mL亲和层析柱纯化目的蛋白.SDS-PAGE电泳分析和Western blot分析显示在155 kD有明显的条带,成功实现了Ravlp在大肠杆菌中的表达纯化.
短梗五加用途广泛,可制药、酿酒、做保健品、野菜、茶叶及绿化用.野生产量供不应求,人工栽培前景看好.主要用播种法繁苗,通过移植、建园、修剪、肥水管理、虫害防治等,生产出不同用途的产品.
菌株JY2-2是啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)XB05经半导体激光诱变筛选得到的优良菌株.为了从分子水平考察菌株JY2-2与XB05的差异,为酵母菌株JY2-2的鉴定提供分子依据,我们运用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对啤酒酵母XB05和JY2-2进行全基因组分析.用27条随机引物对这两株酵母菌进行扩增,结果得到5条可产生较多扩增条带,并具有较丰富多态性的随机引物,每条引物可扩增8～20条DNA条带,分子量大小在100～3000bp之间.菌株XB05和JY2-2的DNA遗传相似系数为0.794,可以认为菌株JY2-2是啤酒酵母XB05的突变株.
以苹果鲜榨汁和浓缩汁为原料，分别通过添加蔗糖和稀释的方式使发酵起始糖度为200g／L进行酒精发酵。对发酵产品的常规理化指标和总酚，总类黄酮以及黄烷醇含量进行测定，并对发酵产品进行感官鉴评。实验结果表明：稀释浓缩汁和鲜榨果汁酒样总酸含量分别为2．6g／L和3．2g/L。鲜榨果汁酒样总酚含量、总类黄酮以及黄烷醇含量均高于稀释浓缩汁酒样。两种酒各具特色，鲜榨汁酒样果香浓郁，稀释浓缩汁酒样酒香醇厚。
本发明涉及白酒加工制作领域，具体的说是一种白酒出醅装置，包括机架、挖掘装置和清扫装置，所述的机架能够根据酒缸的深度进行工作高度的调节，方便使用；所述的挖掘装置安装在机架上，挖掘装置用于将酒醅从酒缸中挖出；所述的清扫装置与挖掘装置相连接，且清扫装置可相对挖掘装置进行周期性转动；从而可是粘附在酒缸中的酒醅从酒缸中落下，方便挖掘装置进行挖掘。本发明提供了一种白酒出醅装置，其能够实现酒醅的自动化出醅，且在出醅过程中能够针对不同口径的酒缸，实现最大限度的酒醅的出醅，极大地提高了物料利用效率。