以GFP为报告基因的重组酿酒酵母消化道转基因研究

目的以GFP为报告基因,研究重组酿酒酵母消化道途径转基因的可能.方法以6～8周龄Balb/c小鼠为实验对象,根据管饲材料不同对动物进行分组:第1组为空白对照组;第2组管饲酿酒酵母INVScl;第3组管饲携带酿酒酵母-哺乳动物细胞穿梭载体pYES-CMV-GFP的重组酿酒酵母;每次每只Balb/c小鼠灌胃0.3lml(108个)重组酿酒酵母悬浮液,2 d 1次,持续4周后采用免疫组织化学染色法检测小鼠小肠、肝脏、脾脏组织中GFP基因的表达.结果在第3组小鼠小肠、肝和脾组织中,有免疫组化呈阳性的检测结果,其中6只小鼠中的4只小肠组织免疫组化结果呈阳性,肝脏、脾脏分别有1只免疫组化结果呈阳性,而阴性对照组中小鼠的各组织结果均呈阴性.结论以酿酒酵母作为基因载体实现消化道途径转基因存在可能,为进一步研究酿酒酵母在基因治疗药物载体上的应用提供了实验基础.
从啤酒酵母中提取出碱溶性粗多糖ASP,经乙醇分级、savag法脱蛋白以及分子筛层析进一步纯化得ASP2和ASP3,采用半微量凯氏定氮法,通过消化、蒸馏、滴定后计算其蛋白质质量分数,ASP,ASP2,ASP3分别为15.41%,3.17%和2.89%.
为研究饲料中不同蛋白源对军曹鱼幼鱼碳、氮稳定同位素分馏的影响，配制3种等氮等能饲料。D1以鱼粉为蛋白源， D2和D3饲料中分别以啤酒酵母和玉米蛋白替代10%的鱼粉蛋白，投喂幼鱼24d。结果表明，啤酒酵母和玉米蛋白替代10%的鱼粉蛋白后，幼鱼的体质量增加率显著下降。随养殖时间的延长，所有处理组幼鱼的碳稳定同位素比率δ13C逐渐上升而氮稳定同位素比率δ15N逐渐下降；虽然全鱼和肌肉δ15N的变化速度存在差异，但各饲料组全鱼和肌肉的δ13C和δ15N都在24d后与饲料达到平衡。当饲料中10%的鱼粉蛋白被啤酒酵母和玉米蛋白替代之后，幼鱼肌肉和全鱼样品与饲料相比的碳同位素富集Δ13C值下降，而氮同位素富集Δ15N值则上升。其中全鱼Δ13C从4.19‰分别下降到3.94‰和3.63‰，肌肉Δ13C从4.46‰分别下降到3.98‰和3.67‰；全鱼Δ15N从0.18‰分别增加到0.88‰和0.94‰，肌肉Δ15N从0.18‰分别增加到0.74‰和0.87‰。军曹鱼在摄食3种不同蛋白源饲料时，其全鱼和肌肉的Δ13C和Δ15N的变化趋势相似，但全鱼δ15N的变化速度慢于肌肉。据此可推断，肌肉可在生态学营养级研究(长时间尺度)中代表军曹鱼的碳、氮同位素特征；但在代谢生理学研究中(短时间尺度)，肌肉就无法准确反映军曹鱼全鱼的δ15N变化过程。
[目的]探讨红酒香菇多糖对肉鸡生长性能及抗病力的影响.[方法]选用1日龄AA肉鸡180只,I组从第7天开始在日粮中添加2%的红酒香菇多糖,Ⅱ组为对照组,2组鸡分别于14、28和49日龄采血测定血液中HI抗体水平并检测红酒香菇多糖对免疫器官和生长发育的影响.[结果]日粮中添加2%的红酒香菇多糖能显著提高肉鸡的生长性能和饲料转化效率.试验组在14、28和49日龄体重分别提高了10.49%、13.66%和8.35%,平均日增重提高了8.49%,料肉比下降了5.29%.日粮中添加2%的红酒香菇多糖能显著促进肉鸡的胸腺、法氏囊和脾脏等免疫器官的发育,增强免疫效果,使机体产生高而强的抗体.[结论]该研究为开发新的功能性饲料添加剂和促进肉鸡产业的发展奠定了基础.
本试验旨在比较饲粮添加不同生物制剂对杜寒杂交肉羊生产性能、屠宰性能、组织器官发育及肉品质的影响.采用单因素试验设计,选取平均体重约为32 kg的杜寒杂交F1代肉羊160只,随机分为5组,每组4个重复,每个重复8只.对照组采用基础饲粮,试验组分别添加21 mg/kg莫能菌素、4×109 CFU/kg地衣芽孢杆菌、3.2×109 CFU/kg酿酒酵母菌、1.1 g/kg复合生物制剂(地衣芽孢杆菌≥6×109 CFU/g、酿酒酵母菌≥4×109 CFU/g、碱性蛋白酶≥1000 U/g).预试期10 d,正试期56 d,每2 d记录1次采食量,每20 d进行1次称重,当复合生物制剂组羊只的平均体重达到约50 kg时,每组选取10只羊进行屠宰,测定其屠宰性能、组织器官重量和肉品质指标.结果表明:1)复合生物制剂组平均日增重、屠宰率显著高于对照组(P<0.05);地衣芽孢杆菌组和复合生物制剂组料重比显著低于对照组(P<0.05).2)地衣芽孢杆菌组、酿酒酵母菌组、复合生物制剂组复胃重量均显著高于对照组(P<0.05),复合生物制剂组复胃重量占宰前活重比例显著高于对照组和莫能菌素组(P<0.05);地衣芽孢杆菌组、酿酒酵母菌组、复合生物制剂组小肠重量及其占宰前活重比例均显著高于对照组、莫能菌素组(P<0.05).3)酿酒酵母菌组肾脏重量占宰前活重比例显著高于对照组(P<0.05),其他内脏器官重量占宰前活重比例在各组间无显著差异(P>0.05).4)各组肉品质指标差异不显著(P>0.05).综合得出,从作为饲料添加剂对肉羊生产性能作用效果来看,地衣芽孢杆菌、酿酒酵母菌、复合生物制剂可以替代莫能菌素,地衣芽孢杆菌好于酿酒酵母菌,复合生物制剂最佳.
本发明公开了一种糯高粱白酒的制备方法，包括以下步骤：A、取糯高粱洗净后在100℃下蒸煮160至200分钟，并搅拌均匀，将蒸煮后的糯高粱在密封条件下进行自然发酵，发酵温度控制为35℃?38℃，发酵时间控制为158?178小时，将发酵后的糯高粱在200℃下汽蒸160至200分钟，获得酒液；B、另取糯高粱洗净后在100℃下蒸煮160至200分钟，并搅拌均匀，将蒸煮后的糯高粱在密封条件下进行自然发酵，发酵温度控制为25℃?28℃，发酵时间控制为20?28小时，获得发酵糯高粱；C、将步骤A获得的酒液和步骤B获得的发酵糯高粱按重量1:4的配比混合，进行装坛密封存储，获得成品糯高粱白酒。制备出的糯高粱白酒质醇净，味绵醇，余香长，诸味协调好。