[目的]使酿酒酵母高效表达糖化酵母糖化酶基因.[方法]利用PCR技术从糖化酵母中扩增出大小为2700 bp左右的带有启动子的糖化酶基因STA1.通过限制性内切酶BspDI与Acc65I双酶切,将目的基因STA1连接到穿梭质粒pRS416中构建重组质粒pRS416-sta1,转化酿酒酵母通过筛选.[结果]糖化酶活性最高为120 U/ml,酶的最适温度为60℃,最适pH为5.0,在酶催化反应2h后,酶剩余活力能达到约90％.[结论]通过基因工程手段得到高效表达糖化酶基因的酿酒酵母工程菌株.
为探索提高木薯渣营养价值适宜的生物处理方式,以黑曲霉、啤酒酵母、产脘假丝酵母的不同组合对木薯渣进行发酵,测定发酵品质及其蛋白质含量变化.结果表明,在木薯渣的青贮过程中,以单独使用黑曲霉发酵48h后接人植物乳酸菌进行贮存的效果最好,其发酵品质达优等,粗蛋白、真蛋白增加最高,分别增加了76.27%和36.11%.
因玉米秸秆水解液抑制物中的糠醛和乙酸通常会抑制酿酒酵母的活力,造成乙醇产量下降.该实验为了获得抗水解抑制物并且提高乙醇产量的优良菌株,以酿酒酵母xp为出发菌株,通过常温常压等离子诱变(at-mospheric and room-temperature plasma mutagenesis,ARTP)技术,得到突变体库,并以玉米秸秆水解液为筛选压力,经过25代驯化培养,筛选出优良菌株xp2.该菌体的生物量DCW最高为3.71 g/L,较原菌的3.10 g/L上升了19.68％.生长对数期为6～22 h,稳定期为22～42 h,比原菌的对数期明显提前.稳定期持续时间延长4 h,生长性能优势明显.发酵上清液中的糠醛1.43 g/L,乙酸1.21 g/L,较出发菌株发酵上清液的糠醛3.78 g/L,乙酸1.65 g/L,分别降低了62.17％和26.67％,乙醇产量和平均得率分别为38.7 g/L和0.806 g/(L·h),较出发菌株的30.3 g/L和0.631 g/(L·h),提高了17.12％和27.73％.该实验表明改造菌性状优良,转化糠醛和乙酸的能力明显提高,为今后筛选优良表型的酿酒酵母提供参考价值.
分别测定干红树葡萄酒与2种干红葡萄酒(法国干红葡萄酒、国产干红葡萄酒)中的总多酚、总黄酮、白藜芦醇、单宁、酚酸、维生素、花青素及矿物质等功能性成分,采用DPPH法、ABTS法、邻二氮菲法和FRAP法分析3种酒的抗氧化能力,并对其差异进行分析比较.结果表明:干红树葡萄酒与2种干红葡萄酒功能成分种类及含量各有特点和优势.干红树葡萄酒中没食子酸、VA、VC、Mn与Zn含量均极显著高于国产干红葡萄酒和法国干红葡萄酒;法国干红葡萄酒中总多酚、总黄酮、白藜芦醇、儿茶素、咖啡酸、香豆酸、阿魏酸、矢车菊色素及Fe含量均极显著高于国产干红葡萄酒和干红树葡萄酒;国产干红葡萄酒中单宁、VD、飞燕草色素、矮牵牛色素、天竺葵色素、芍药色素、锦葵色素、Ca和Mg含量均极显著高于法国干红葡萄酒和干红树葡萄酒.3种酒抗氧化活性亦各具特色,树葡萄红酒对DPPH·的清除能力最强,法国干红葡萄酒对·OH的清除能力最强,国产干红葡萄酒对ABTS+的清除能力及对铁离子的还原能力最强.
旨在通过优化还原型谷胱甘肽的发酵及分离纯化条件,为GSH大规模的工厂化生产提供理论基础.首先通过筛选获得一株GSH高产菌酿酒酵母Y18,其胞内GSH含量为9.05 mg/g干菌体.进一步研究表明,在培养基中添加L-半胱氨酸和缬氨酸,以及发酵过程中补加葡萄糖可使GSH的总产量分别提高62.0％和146.1％.此外,对GSH在水溶液中稳定性的研究发现偏酸性环境(pH4.5)和氮气保护可显著降低GSH的损失率.最终通过对大孔树脂D001×7和Sephadex G-10的分离纯化条件的优化,获得纯度为98.1％的GSH,收率为73.2％.
啤酒花称为蛇麻花,是一种多年生草本蔓性植物,古人取为药材.用于啤酒酿造已有上千年的历史,赋予啤酒特有的香味、爽快的苦味并能增加啤酒的防腐能力和非生物稳定性.啤酒花浸膏是一种抗氧化成分十分丰富的天然原料,具有重要的开发价值.本文选用DPPH·清除能力来确定抗氧化效果,先进行抗氧化能力的测定.然后对微波提取法先进行单因素实验再通过正交试验,以抗氧化效果为指标,确定了啤酒花干花抗氧化成分提取的最佳工艺条件是乙醇浓度为45%,料液比为1:20,微波火力为80%,提取时间30s.啤酒花浸膏抗氧化成分的抗氧化效果为630.36.并与同样提取条件的啤酒花浸膏、桑葚干、山楂干、石榴皮干提取物的抗氧化效果进行比较,发现啤酒花浸膏的抗氧化效果最好.
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