酿酒酵母产D 乳酸重组菌的构建与发酵

采用基因工程方法对酿酒酵母进行代谢改造，使酵母产生乳酸代谢途径。将来源于 L． mesenteroides和E?coli的D 乳酸脱氢酶基因，分别插入带有G418抗性的酵母穿梭质粒pYX212 kanMX上，电转化酵母，得到2株生产D 乳酸的酿酒酵母重组菌S? cerevisiae WE1510和S? cerevisiae WB1186。进一步摇瓶发酵试验表明：重组菌S? cerevisiae WB1186在YEPD培养基、20 g／L糖、pH 5的条件下生长条件最好，并具有更好的产乳酸能力。经3 L发酵罐条件下验证，S． cerevisiae WB1186分批发酵96 h，最终乳酸积累量达到18?0 g／L；发酵条件为培养基YEPD，接种量10％，溶解氧（DO）30％，转速150 r／min，初始葡萄糖质量浓度10 g／L，控制pH 5?0，通气量3 L／min，OD600最大值转为厌氧发酵。
本发明是酿酒工业中用于固态法工艺的一种新型糖化发酵剂——白酒高产剂。它由麸皮酒用活性干酵母与糖化酶按其一定单位一定比例配制，在无菌条件下均匀混合即得固态形粗粉状制剂。它主要用于固态法小曲白酒高产技术工艺，也兼用于浓香型大曲白酒工艺及固态法小曲白酒传统技术工艺。本白酒高产剂具有发酵力强、发酵速度快、耐温、适应性强、出酒率高及贮存使用简便等特点。使用该高产剂再配合一整套固态法小曲白酒高产技术工艺，完全解决了传统酒曲和传统技术中存在的缺点，结束了我国固态法小曲白酒长期低产的历史。
选取8种不同种类新鲜啤酒通过实验手段模拟其老化过程,对老化后的啤酒进行感官品评并分析了新鲜啤酒的老化相关指标.使用灰色关联分析法分析了啤酒的感官评价得分和啤酒老化相关指标之间的关联度,并根据其影响程度的大小进行了排序.把新鲜啤酒的感官得分和啤酒老化相关指标作为输入数据,不同老化时间的感官得分作为输出数据,使用BP神经网络建立了模型啤酒老化过程中感官得分模型并进行预测.感官得分最小相对误差为1.51%.神经网络方法能够有效地预测啤酒老化过程中的感官变化.
本发明提供了一种酿造白酒高浓度废水处理方法，该方法为由集水池收集的高浓度废水，由提升泵提升，经由汽提塔、热交换器、生物流化床、人工湿地和过滤系统处理，处理废水送回热交换器中循环使用；所述的汽提塔与生活锅炉的蒸汽管相连，由生活锅炉提供的蒸汽兑汽提塔的处理废水进行升温，升温至70?80℃，保温时间为20?40分钟；所述的生物流化床与氧气瓶的出气管相连，由氧气瓶为生物流化床中的生化反应提供氧气。本发明提供一种投资小，占地少，有效除去酿造白酒高浓度废水中的乙醇、戊醇、丁醇、CODcr和BOD₅等杂质。
酿酒酵母是工业上乙醇发酵的首选目标微生物,但是不能代谢木糖等五碳糖.通过导入外源木糖异构酶基因,可以赋予酵母利用木糖的能力.但是长期的研究发现很难将细菌木糖异构酶转入酿酒酵母得到活性表达.研究成功的在酿酒酵母里表达了拟南芥木糖异构酶,其活性可达到0.51 U/(mg·protein).拟南芥木糖异构酶与成功在酵母里表达的真菌木糖异构酶相比更加耐受木糖醇抑制(Ki=13.21 mM).本研究为改善酵母利用木糖提供了新的可用的木糖异构酶.
金属耐受蛋白MTP(metal tolerance protein)是阳离子转运蛋白(CDF)家族的重要成员，在植物重金属转运过程中发挥重要调控作用。本研究以中茶108茶树为试验材料，通过RT-PCR和RACE方法克隆到茶树重金属耐受蛋白基因CsMTP11(GenBank登录号为KX450265)，其全长cDNA为1197bp，编码398个氨基酸残基，其编码蛋白分子量为44.85kD，等电点为5.34。在线软件分析表明，CsMTP11蛋白具有5个跨膜结构域，且含有CDF家族的其他保守结构域。系统进化树分析结果表明，茶树CsMTP11与葡萄VvMTP11进化同源性最近，其氨基酸序列相似度高达90%。基因表达模式分析表明，CsMTP11基因在茶树老叶中的表达量最高，根中的表达量最低，另外，CsMTP11基因受重金属Mn和Co离子胁迫诱导表达。CsMTP11-YFP融合蛋白在拟南芥原生质体共定位试验表明，CsMTP11-YFP融合蛋白定位于质膜。CsMTP11在酿酒酵母及其突变株中的异源表达可以提高其对重金属Mn和Co离子的耐受性。综上所述，茶树CsMTP11属于Mn-CDF亚家族，可能参与茶树对重金属锰和钴的转运过程。