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以绿色荧光蛋白为报告基因的酿酒酵母表达载体的构建

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-05-26 阅读:735
目的构建以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的酿酒酵母表达载体.方法利用通用载体质粒融合系统(UPS),首先将GFP片断连入donor载体,随后在Cre酶作用下与acceptor载体融合,获得了带有GFP片断的酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)表达载体.结果成功构建了以GFP为报告基因的酿酒酵母载体,并在酵母中得到表达.结论GFP是一种理想的报告基因.同时,利用UPS能够高效、简便地进行酵母表达载体的构建.
利用PCR技术扩增出啤酒工业酵母QY的羟酸还原异构酶基因ILV5,在酵母YS58中表达时,羟酸还原异构酶活力提高2~3倍.将ILV5基因与铜抗性基因插入到YEp352载体中得到重组质粒pLZ-5C,转化QY,通过铜抗性筛选转化子,所得转化子的羟酸还原异构酶的活力明显高于对照菌株QY,在发酵测试中,转化子产生双乙酰的量比原始菌株降低了60%.
本发明涉及浓香型白酒发酵的方法,采用用黄水微生物代替窖泥微生物进行发酵。
影响宁夏贺兰山东麓荒漠风沙土地段酿酒葡萄根系分布(垂直分布)的主导因素是土壤物理性状(土壤质地、土壤容重与土壤水分);在土壤化学性质中,土壤有机质和土壤CaCO,含量是重要限制因素;其它如土壤养分、pH、盐分组成、微量元素含量等因素影响很小.
以2011至2013年2年度大理州大麦品种区域试验中凤大麦7号产量为依据,以增产幅度、变异系数、方差、高稳系数等为参数,分析凤大麦7号的高产稳产性。
有针对性地提出了酿造过程中影响乙醛形成的生理内因和环境外因,并从主要的几个方面进行了研究.结果表明,酿造过程染菌、麦汁充氧控制不合理、二次发酵酒添加是造成成品啤酒中乙醛含量偏高的主要环境外因.在实际生产中,应加强CIP清洗,特别是种酵母罐的清洗及无菌空气过滤的控制工作,并合理控制麦汁的溶解氧含量,尽可能减少二次发酵酒的添加.

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