利用微卫星标记分析酿酒酵母的遗传多样性

为研究本土酿酒酵母的种内多态性,以及本土野生酵母与商业酵母之间的差异性,本实验采用4个微卫星标记(ScAAT1、YOR267C、C11、YPL009C)分析18株商业酵母和28株陕西泾阳分离的野生酿酒酵母的遗传多样性,利用PopGen32进行遗传参数的分析.结果表明:4个位点共检测出66个等位基因,每个位点等位基因数为16～18个;平均多态信息含量0.862 3,均为高多态位点;46株菌表现出39种基因型,分辨率为98.94％;观测杂合度0.478 3～0.658 5.野生酵母和商业酵母均具有丰富的遗传多样性,两个群体各具有自己独特的等位基因,且两者在聚类图中有较清晰的界线.
磷酸果糖激酶(PFK)是糖酵解途径的重要调控酶.以酿酒米曲霉CICC2012为材料,克隆获得PFK基因pfkA(GenBank登录号:KC113503.1).序列分析表明:pfkA序列长度为2 722 bp,含有2个内含子,开放阅读框长2 358 bp; PFK为785个氨基酸组成的亲水蛋白,分子量86.0 kDa,等电点6.38,含有2个PFK家族指纹结构；二级结构包含42.68％的α-螺旋,14.27％的β-折叠和43.06％的无规则卷曲；同源建模三级结构PFK含有N端和C端的2个结构域,底物果糖-6-磷酸结合于N端结构域.采用进化树分析,发现米曲霉PFK与丝状真菌PFK亲缘性较近.
本发明涉及浓香型白酒转排生产方法，属于酿酒技术领域。本发明浓香型白酒转排生产方法包括如下步骤：a、每2.4立方米出窖酒糟拌合糠壳20～30kg，蒸馏，冷却至环境温度，拌合中温曲药，入窖发酵25～35天；b、取出酒糟，拌合超高温曲药，再次入窖发酵25～35天；c、开窖，灌入酒尾、酒头中至少一种使窖内酒糟的乙醇质量含量为2～4％；d、封窖，继续发酵25～35天，开窖，取出酒糟蒸酒即可。
本文以18个大麦麦芽样品为研究对象,以pearson相关分析法研究了大麦麦芽中过氧化物酶(Peroxidase,POD)、麦汁中键合态阿魏酸以及多聚阿拉伯木聚糖(PAX)与麦芽过滤性能的相关性.研究结果表明:麦芽过滤速度与麦芽POD酶活、麦汁粘度、麦汁中键合态阿魏酸及PAX含量呈显著负相关,相关系数分别为0.632 (p ＜0.01)、0.521(p＜0.05)、0.555 (p ＜0.05)和0.664(p ＜0.01);PAX含量与键合态阿魏酸含量、麦汁粘度呈显著正相关,相关系数分别为0.590 (p ＜0.05)和0.595(p＜0.01).这一结果表明,阿魏酸介导的AX的氧化交联与大麦麦芽过滤性能紧密相关,很可能是AX导致麦芽过滤性能差的重要途径之一.本文为改善大麦麦芽过滤性能提供了一定的理论依据.
【目的】在生理状态下利用激光镊子拉曼光谱系统对单个酿酒酵母孢子萌发过程进行实时监测,探讨掩盖在群体平均信息下的个体生命信息。【方法】将葡萄糖溶液加入酿酒酵母孢子悬液中诱导孢子萌发,在孢子萌发过程中每隔30 min取样并利用激光镊子拉曼光谱系统测定单个酵母孢子的拉曼光谱。【结果】单细胞实时平均拉曼光谱可显示孢子萌发过程中细胞内生物分子的变化：萌发期内分别归属于 DNA、蛋白质的722 cm-1,1006 cm-1峰的峰高基本不变,随后在生长期上升明显,说明生长期胞内开始大量复制DNA,并合成蛋白质；归属脂类的1751 cm-1峰的减弱趋势明显,可能是胞内脂类物质消耗造成的。整个萌发生长过程中,源自葡糖糖和海藻糖的858 cm-1,908 cm-1,1084 cm-1,1118 cm-1等峰强度先下降后上升,表明在适宜的生长条件下,海藻糖可能转化为单糖被细胞吸收利用,当营养物质逐渐被消耗时,细胞会再次累积海藻糖以抵抗外界不利条件。【结论】激光镊子拉曼光谱技术可反映胞内生物大分子的活动规律,获知单个酵母孢子萌发过程中物质变化的丰富信息,是探索单个活细胞实时生化变化的有效工具。
采用双向电泳结合基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)技术分析确定引起啤酒混浊的蛋白组分.结果表明,仅有少量的蛋白组分参与啤酒混浊的形成.聚丙烯酰胺凝胶电泳分析发现Mw 40kD左右,25～29kD和6.5～17kD作为啤酒混浊蛋白组分,可能主要来自麦芽中的水溶蛋白,小部分来自麦芽醇溶蛋白.双向电泳分析证实了大部分的麦芽蛋白在酿造过程中发生降解和变性,并结合质谱技术鉴定得到BTI-CMe、germin E(Hordeum vulgare)和protein Z 3种组分可以抵抗酿造过程的热变性和水解作用,将成为啤酒混浊形成重要的促进因子.