启动子的选择及优化在酿酒酵母代谢工程中的应用

酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)作为最简单的真核模式生物被广泛应用于生命科学的各项研究中.目前,大多数天然产物的主要生产途径是从原材料中直接提取,该方法效率较低,同时消耗了大量的生物资源,已逐渐被新兴的合成生物学方法所取代.其中通过改造酿酒酵母自身的代谢途径并加入异源代谢途径生产目标天然产物已成为一种高效的资源获取途径.通过对外源基因启动子的优化及改造,调控外源基因在宿主中的表达水平,从而协调宿主自身代谢途径,定向合成目的代谢产物是酵母合成生物学和代谢工程的研究热点.从构建酿酒酵母合成天然产物过程中启动子结构、类型及优化表达的方法进行了综述,为相关研究者利用酿酒酵母作为底盘细胞进行合成生物学的研究提供参考.
人工合成酿酒酵母染色体中引入大量loxPsym位点构成的SCRaMbLE系统,在Cre重组酶的诱导下可以发生删除、反转、移位、复制等基因组重排,实现基因组的快速进化,为染色体结构变异和功能分析提供全新的研究平台.对合成型酵母染色体重排技术的最新研究和应用进行综述,该技术有望促进酿酒酵母在化学品和医药领域的产业化应用.
本发明公开了一种白酒的催陈方法，包括以下步骤：a、使新酒散发出的乙醇催熟水果；b、水果吸收乙醇后产生的酸性物质随空气进入新酒中，该酸性物质与酒中的醇类反应，使新酒产生乙酸乙酯。白酒的陈化过程中，一部分酒精被氧化而成为乙醛，乙醛进一步氧化生成乙酸，乙酸进一步与酒精作用生成乙酸乙酯和高级酯。一部分醛与酒精作用生成缩醛类，从而使酒体减少辛辣味。增加香味，赋予酒体芳香，柔和，软绵和协调之感。将白酒和水果放置在一起一段时间后，水果经乙醇催熟后产生乙酸等物质，加快了白酒的陈化，在短时间内即可产生效果，增加酒的醇厚感，去除新酒中的刺激、燥辣等口味，口感良好，酒香浓郁。
借助质粒pBluescriptM13-,以淀粉酶基因(AMY)为筛选标记构建乙酰乳酸合成酶基因(ILV2)的重组整合质粒pMGI.用重组质粒pMGI所含ilv2∷AMY嵌合基因片段转化工业酿酒酵母菌Sc11,获得转化子(Sc11-ilv).Sc-11-ilv不含细菌载体序列和酵母抗药性标记,所表达的乙酰乳酸合成酶活性降低30%;模拟发酵实验表明Sc11-ilv发酵液的双乙酰含量降低70%,Sc11-ilv发酵性能保持不变,遗传稳定性为100%,可以比较安全地用于啤酒生产.
一种莲子白酒生产方法。本发明提供了一种特定风味的莲子白酒，同时保持酒糟品质以备进一步利用的生产方法。本方法按如下七项步骤进行：一是原料的选用与预处理，二是蒸煮摊晾和集堆，三是混合酒曲的制备和添加，四是糖化与发酵，五是蒸馏，六是酒糟的干燥、杀菌与保存，七是白酒的陈酿、过滤和包装。本方法原料选择和配比适当，配以特殊的制酒工艺，省去了破碎工序，减少成份流失，达到的糖化和发酵效果好、出酒率高，生产的莲子酒具有风味独特、绵香爽口、强身、滋补之功效。酒糟中剩余发酵产物稳定，无有害物质产生，微波干燥灭菌使酒糟性质稳定，可进一步加工利用。
研究了在MRS培养基中添加不同营养物质对嗜热链球菌生长的影响,进一步采用正交试验优化筛选了嗜热链球菌的增殖培养基.结果表明:在MRS培养基中添加玉米浆、番茄汁、啤酒液、乳糖可显著促进试验菌株的细胞生长(P＜0.01),而添加蛋白胨、酵母浸膏、CaCl2对细胞生长无显著影响(P＞0.01);利用L934正交试验筛选出增殖培养基的最佳配比为:在MRS培养基中添加0.3%玉米浆、7.5%番茄汁、5.0%啤酒液、1.0%乳糖;试验菌株在增殖培养基中经37℃培养24h,活菌数可达4.69×109cfu/ml,较对照MRS培养基的活菌数提高40.78倍.