木糖还原酶基因的克隆及其在酿酒酵母中的定向整合

酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)是重要的乙醇生产菌株，但因缺少戊糖代谢途径而不能利用木糖，为了改良工业酿酒酵母利用半纤维素发酵生产乙醇的性能，利用分子生物学技术构建能够利用木糖的基因工程酵母。选取酿酒酵母染色体的rDNA重复序列作为外源基因整合位点，依此构建多拷贝染色体整合型载体pUG-LR。采用融合表达策略扩增得到含有酿酒酵母乙醇脱氢酶启动子PADH和树干毕赤酵母木糖还原酶基因xyl1的融合序列，并将其插入pUG-LR载体中，构建成含遗传霉素G418抗性标记的同源重组质粒pUG-LR-XYL1。以工业酿酒酵母ZU-01为宿主，通过优化后的电穿孔法将重组质粒导入经缓冲液处理的酵母细胞，30℃培养。通过提高YEPX复筛培养基G418浓度，得到10株生长较快的优良性状转化子。在不含G418的YEPX培养基上传代8次以上，以转化子基因组DNA为模板，进行PCR检测，均可获得目的基因片段。研究结果表明：木糖还原酶基因xyl1已定向整合于ZU-01染色体DNA上并稳定遗传，为后续构建工业酿酒酵母的木糖代谢通路、利用木糖产酒精的重组菌株奠定了基础。
以乳蛋白肽饮料为原料,通过苦味值、短肽得率(TCA-SNI)、总蛋白酶活三个指标筛选得到苦味值小、总蛋白酶活力高、TCA-SNI值高的复合菌种.结果表明,脱苦效果方面,复合菌种＞酿酒酵母＞乳酸菌,复合菌种接种量为1％、发酵培养7h,总蛋白酶活最高,达到32U/mL,TCA-SNI达到峰值34.5％,溶液苦味值为0.5.
选择Pearson相关系数筛选出与红葡萄酒各理化指标相关性较强的酿酒红葡萄理化指标,用逐步回归法建立回归方程确定了它们之间的数量关系.同时,采用多元核支持向量机对红葡萄酒样品进行分类,所分类别与人工口感评分所分类别基本相符,正确率达到91.89％,结论表明酿酒红葡萄和红葡萄酒的理化指标能很好地确定葡萄酒的口感评价.
真菌毒素是由真菌产生的一类次级代谢产物,而啤酒及其生产原料的真菌毒素感染则对人们饮用啤酒的安全性造成了威胁.本文综述了赭曲毒素A(Ochratoxin,OTA)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxymvalenol,DON)、玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)、伏马毒素(Fumonisin,FB)和黄曲霉毒素(Aflatoxin,AFB)对啤酒及其生产原料的感染情况、分析方法和限量标准,并简要介绍了谷物中真菌毒素感染的预防措施和脱毒技术.
啤酒用糖浆是作为一种啤酒辅料,虽然在国外早已普遍使用,但在国内是近几年才渐受到重视的.本文主要介绍了啤酒用糖浆的分类、组分、特性和作用、生产概况以及最新的研究进展、实际应用情况和发展趋势.啤酒用糖浆具有可大大提高糖化和发酵设备利用率、降低成本、迅速扩大产能等优点,具有广阔的开发应用前景.
以5年生酿酒葡萄品种赤霞珠为试材,利用温泉水在转色期到成熟期进行6次灌溉处理,测定处理后的果实百粒重、可溶性固形物、可滴定酸、总酚和香气成分的变化,探究温泉水对香气等品质指标的影响.试验结果显示,葡萄的百粒重、可溶性固形物分别比对照增加10.4%、13.6%,可滴定酸降低1.2%,总酚增加10.3%;各处理中共检测出23种香气成分,其中,2-己烯醛含量最高,己醛次之;赤霞珠葡萄香气总量以及各香气成分含量均比对照有所增加,主要香气成分为正己醇、乙酸乙酯、2-己烯醛、己醛等,分别高于对照42.1%、29.6%、3.2%、13.1%;另外,增加了具有青草香味的(Z)-3-己烯-1-醇.温泉水提高了葡萄果实质量及糖含量,降低了酸度,增加了香气的积累,果实品质得到改善.