枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶基因在酿酒酵母中的表达和应用

将优化后的枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶(serine alkaline protease,SAP)基因克隆到酿酒酵母表达载体pYES2上,在酿酒酵母Whu2d中进行表达.发酵酿酒酵母工程菌,对重组碱性蛋白酶酶学性质和降解豆粕中蛋白类抗营养因子效果进行研究.结果显示:工程菌发酵液中碱性蛋白酶酶活比出发菌株高55.2％.其最适反应温度和pH分别为45℃和8.0,在pH值为7.0 ～10.5时具有较好的稳定性,相对酶活可以保持在80％以上.与出发菌株相比,工程菌发酵后豆粕培养基中酸溶蛋白含量提高42.1％,粗蛋白和β-伴大豆球蛋白含量无显著差异,大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子的含量分别降低41.9％和57.4％.以上结果表明:该碱性蛋白酶酿酒酵母工程菌可以用于饲料、食品等富含蛋白原料的加工.
酒糟是酿酒工业产生的一种副产品,普遍作为家畜的补充饲料使用,特别是常用于饲喂猪,但如果处理不合理或者存放时间过久,猪采食后就容易出现中毒.一般来说,猪发生酒糟中毒的原因分为三类:第一类是由于酒糟中含有酒油、酒精,采食大量新鲜酒糟则容易出现中毒;第二类是猪采食不新鲜、发酵酸败的酒糟而发生有机酸中毒;第三类是猪采食用霉败原料酿酒产生的酒糟而发生霉菌毒素、细菌毒素中毒.
采用三羟甲基丙烷（TMP）与邻苯二甲酸酐（PA）、顺丁烯二酸酐（MA）和丁二酸酐（SA）经酯化反应合成了新型亲水单体三羟甲基丙烷邻苯二甲酸单酯（TMPPs）、三羟甲基丙烷顺丁烯二酸单酯（TMPMs）和三羟甲基丙烷丁二酸单酯（TMPSs）；并与聚氧乙烯醚（YmerTM N120）复合作为亲水扩链剂，通过预聚体法合成了聚氨酯水分散体（PUD）。研究了新型羧酸单体及TMPPs/N120质量比对PUD涂膜耐化学品性、硬度、力学性能、热稳定性的影响。研究发现，采用TMPPs制备PUD的贮存稳定性、涂膜硬度、耐水和耐醇性等优于TMPMs和TMPSs制备的PUD。随TMPPs/N120质量比增大，PUD固体含量降低，PUD胶膜的拉伸强度增大，断裂伸长率降低，涂膜硬度增大，耐醇性变好，适宜的TMPPs与N120质量比为6：5～4：8；与DMPA相比，TMPPs的引入提高了PUD涂膜的硬度和热稳定性，能显著提高PUD胶膜的耐污性（包括耐墨水性、耐咖啡、耐绿茶性、耐红酒性等）。因此，TMPPs是较好的制备PUD的亲水化合物。
[目的]研制发酵型海带酒,提高海带的综合利用率.[方法]以海带提取液为研究对象,用3种发酵剂及其两两混合对海带提取液进行发酵制酒,采用定量描述分析(QDA)对海带酒进行感官评定,筛选出最优发酵剂,然后通过正交试验对海带提取液工艺进行优化,最后测定发酵酒的抗氧化性.[结果]试验表明,海带本身携带的自然菌群对发酵酒的品质没有显著的影响;最佳发酵剂为混合菌(安琪提供的酿酒曲和葡萄酒果酒专用酵母SY).海带提取液的最佳工艺参数为提取温度90℃、浸泡时间3h、料液比1∶20g/ml.6种不同的菌种后发酵25 d的发酵酒的抗氧化性都较高.[结论]研究可提高海带的附加值,为海带资源的开发利用开辟新的途径.
本发明公开了一种糟烧白酒的生产工艺，属于糟烧白酒酿造工艺技术领域。其步骤如下：将黄酒糟轧碎,在糟粒中加入质量为1%-2%的玉米芯为拌料，经拌后,然后堆积发酵、蒸馏；然后得到的糟烧白酒原浆液再经过勾兑、过滤、灌装、包装即可作为成品上市。通过本发明技术方案制备的糟烧白酒，具有以下有益效果：糟烧白酒品质提高，制备的糟烧白酒无色透明或微黄色、无悬浮物、无沉淀、无杂质；香气纯正，醇和爽口；52°糟烧的出酒率能达到15%以上，比传统工艺出酒率提高3-5%；玉米芯为玉米的一部分，常作为丢弃物，本发明用来参与发酵，增加了资源的再利用，变废为宝。
利用乙醇沉淀法提取蔓茎堇菜Viola diffusa和柔毛堇菜V.principis多糖并分别进行抑菌及抗氧化试验.结果表明,蔓茎堇菜和柔毛堇菜多糖提取率分别为7.0％和8.3％.不同倍数体积无水乙醇沉淀提取的多糖抑菌和抗氧化能力不同.抑菌效果显示,蔓茎堇菜多糖对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的抑菌圈分别可达8.46 mm和8.59 mm,柔毛堇菜对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的抑菌圈均可达9.13 mm,但两种堇菜多糖对黑曲霉和啤酒酵母未呈现抑制活性;抗氧化研究发现,蔓茎堇菜多糖抗氧化活性为243.64 U·mL-1,柔毛堇菜多糖抗氧化活性为411.78 U·mL-1.由此可见,无论是抑菌还是抗氧化活性方面,柔毛堇菜极显著优于蔓茎堇菜(P<0.01).蔓茎堇菜和柔毛堇菜多糖都具有一定的抑菌抗氧化活性,均可作为食药两用植物资源进行开发利用.