酿酒酵母中基于CRISPR/dCas9的基因转录调控工具的开发与应用

酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)是重要的模式真核微生物,广泛用于基础研究和工业发酵.基于CRISPR/dCas9系统开发的转录调控方法具有可编程、多重性和正交性等优点,在酿酒酵母的基因调控、功能基因组学、代谢工程等研究领域具有巨大潜力.本文关注酿酒酵母中CRISPR/dCas9基因转录调控工具的研究进展,阐述了不同转录调节结构域对dCas9或gRNA活性的调节,设计与优化dCas9和gRNA表达的方法,影响CRISPR/dCas9系统转录调控效率、特异性和通量的靶向性因素,最后总结了该工具在酿酒酵母代谢工程中的应用,并对该技术的未来发展提出了展望.
本发明提供一种多曲酱香型白酒的酿造方法，该方法包括步骤有选择原料、辅料；酿造工艺；开窖；蒸馏；通风晾糟醅；堆积；入池；窖池管理；贮存与管理。本发明的效果是采用该方法生产的酱香型白含酯量以及其风味和口味有着显著的提高和改善，与大曲优质酱香型白酒基本一致。具有升温速度较快、高温持续时间长，酱香突出的特点。该方法生产工艺简单，周期短、耗粮少、成本低。该方法提高了产品质量，又节能降耗，并达到大曲酱香型白酒的质量、风格，生产出深受消费者喜爱的优质酱香酒。
防癌抗癌啤酒和同样作用的白酒，是经临床证实具有防癌抗癌延寿作用，并清除抵消了饮酒对人体的多种不利影响的啤酒和白酒。本发明通过在啤酒和白酒中添加入某些特殊成分，而起到使啤酒和白酒具有防癌抗癌延寿的作用，并抵消酒中有害成分对人的影响，保护人体健康。
环境因素直接影响着葡萄的生长和品质,利用自动气象观测仪监测气象数据来研究香格里拉地区这种低纬度、高海拔的特殊地理环境的气象因子,初步分析了位于金沙江沿岸与澜沧江沿岸不同海拔、不同经纬度的6个气象站主要气象因子的变化规律,分别分析葡萄开花期(5月上旬～6月上旬)、转色期(7月上旬～9月上旬)、采摘期(9月中旬～11月中旬)的各种气象因子的变化规律;此外还利用USB4000 Fiber Optic Spectrometer采集分析了香格里拉地区太阳光谱的分布规律.结果显示,香格里拉地区降雨量普遍较少,总辐射、紫外线辐射普遍较大,温差变化比较显著,相对湿度变化较小;太阳光中各种光谱分布规律基本一致,太阳光强度随海拔升高不断升高.
将湿啤酒糟烘干至含水量为10%左右,再进行机械粉碎,过20～40目筛子筛分后,采用0.80%硫酸,固液比1:11,浸泡原料10h后,于121℃下预水解90min.预水解物pH值用2.0%的氧氧化钠调至4.0左右后,添加0.20%(W/V)左右的纤维素酶,于50℃酶解5h,得到还原糖含量为8.82%的啤酒糟酶解液.将此酶解液pH调节到6.0左右,于55℃采用分批补料的发酵方式进行发酵控制,添加5.0%的碳酸钙,可得到乳酸产量为80.75g/L的发酵液.
垦啤麦13是2003年红兴隆农科所用垦啤麦5号作母本，B1602作父本，经有性杂交选育而成的春性多棱型啤酒大麦新品种，该品种于2016年5月通过黑龙江省农作物品种审定委员会登记。在黑龙江省2014—2015年生产试验中，平均产量达到4991．9 kg／hm2，其品质表现超过国家优质啤酒大麦标准。本文也概述了其主要特征特性及栽培技术要点，以供相应地区推广应用。