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响应面法优化微波提取酿酒酵母中谷胱甘肽条件的研究

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-05-30 阅读:123
利用响应分析法考察了微波处理时间、提取时间和水料比3个因素对微波提取酿酒酵母胞内谷胱甘肽提取率的影响.研究发现,谷胱甘肽的最佳提取条件为:微波处理20.96 s、提取时间为13.25 min,加水量与干细胞的比为22.20 mL/g,谷胱甘肽的提取率为13.06 mg/g,比单因素试验最高的提取率高8.3%.且与预期值相符.
为探索宁夏地区酿酒葡萄适宜的节水灌溉模式,以8年生'美乐'葡萄为试材,常规沟灌为对照,探究4种不同节水灌溉方式对土壤含水量、新梢生长、果实品质及产量的影响.结果表明:覆草微灌、覆膜微灌与常规沟灌相比,分别节水57.4%、57.7%;各处理都具有良好的保水效果,且覆膜和覆草的微灌处理能够减少深层次土壤的水分渗漏;4种灌溉方式都能有效地增加百粒重,覆膜微灌效果最显著;覆草微灌能够提高可溶性固形物含量,降低可滴定酸的分解速率,覆膜微灌可增加果实直径,增产效果最佳;覆草沟灌及覆草微灌均抑制新梢和果实直径增长.因此,微灌与地面覆盖相结合有很好的应用效果,覆草微灌效果最佳.
本实用新型公开了一种陶瓷滤芯白酒过滤机,其特征在于:包括过滤机筒体、陶瓷滤芯和端盖,在过滤机筒体的底部设有白酒进口,端盖上设有白酒出口和排渣口,白酒出口与陶瓷滤芯的内部空腔相连,排渣口与陶瓷滤芯的外部空腔相连,陶瓷滤芯与过滤机筒体及端盖之间有密封圈密封。本实用新型采用陶瓷滤芯,同时硅藻土是加入白酒中,具有滤精度高,可以达到0.1微米,生产效率高,可以正洗,反冲洗,更换硅藻土容易的优点。
利用不同强度的启动子调控木糖代谢关键酶活性,构建稳定代谢葡萄糖和木耱产乙醇的重组酿酒酵母.以本实验室专利菌株Saccharomyces cerevisiae Y5为宿主菌,将树干毕赤酵母Pichia stipitis CBS6054的木糖还原酶基因XYL1和木糖醇脱氢酶基因XYL2置于磷酸甘油酸激酶基因启动子(PGKp)控制下,酿酒酵母Y5内源的木酮糖激酶基因XKS1分别由己糖激酶基因启动子(HXK2p)及其内源启动子(XKS1p)控制.这3个基因连同各自表达元件导入宿主细胞中,打通其木糖上游代谢途径.酶活测定结果显示,HXK2p对木酮糖激酶表现出更强的启动效率.重组菌Y5-X3-1中木糖还原酶/木糖醇脱氢酶/木酮糖激酶(XR/XDH/XK)的酶活比值为1∶5∶4,其木糖消耗量是宿主菌的5倍,最高乙醇产量为24.35 g/L,达到理论值的73%.结果表明,通过调节XYL1、XYL2及XKS1启动子的强度,调控其表达水平,进而改变3种酶的活性水平,对于提高重组酿酒酵母利用木糖发酵产乙醇有明显效果.
筛选两株表型差异单倍体菌株作为亲本,二者杂交获得F2群体共200株,利用具有多态性的微卫星位点对表型分布在两极端的菌株(39株)进行PCR扩增,运用t检验分析不同位点的基因型在两基因池中的差异显著性,以此获得与糠醛耐受性相关的微卫星位点.结果发现两个与糠醛耐受性有关的微卫星位点,其中2P3位点在两基因池中达到显著差异(P=0.039< 0.05),而位点2P5达到极显著差异(P=0.000< 0.01);对于微卫星位点2P5,耐受亲本P1在该位点的基因型(333 bp)在子代耐受群体中出现率为72.2%,而敏感亲本P2的基因型(318 bp)在子代敏感群体中出现率达100%(333 bp出现率为零).上述结果表明微卫星位点2P5的基因型在群体分离中达到极显著差异可能与控制该性状的基因相连锁,在分子设计育种方面可用来选择有利等位基因,提高育种的准确性和预见性.
目的:探究酿酒副产物葡萄籽冷榨提油后饼粕超微粉的体内抗氧化功能.方法:60只小鼠随机被分为冷榨葡萄籽饼粕超微粉(Cold-pressed Grape Seeds Superfine Powder,CP-GSSP)低、中、高剂量组(323,646,1 938mg/(kg·d))、VE组(25mg/(kg·d))、模型组和空白组.除空白组腹腔注射等体积生理盐水外,其他各组腹腔注射D-半乳糖构建亚急性衰老模型,同时剂量组灌胃给予冷榨葡萄籽饼粕超微粉、VE组给予油溶性VE,模型组和空白组均给予同体积食用油.持续45 d后,测定血清和脑组织中丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力.结果:形态水平:冷榨葡萄籽饼粕超微粉可以抵抗由D-半乳糖所致的衰老表征的出现并且对脑组织无不良影响.生化水平:冷榨葡萄籽饼粕超微粉可以显著降低小鼠血清和脑组织中脂质过氧化物MDA的含量,提高抗氧化酶SOD和GSH-Px的活力.结论:冷榨葡萄籽饼粕超微粉具有显著抑制衰老小鼠体内脂质过氧化的作用,并能明显提高内源性抗氧化酶活性,表明其具有较好的抗衰老作用.

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