丙酮酸羧化酶对酿酒酵母积累琥珀酸的作用探究

为探究丙酮酸羧化酶及微量元素Ca2和生物素对酿酒酵母积累琥珀酸的作用,敲除了琥珀酸脱氢酶编码基因(SDH2)并过量表达来自米根霉的丙酮酸羧化酶基因(RoPYC).琥珀酸产量由(0.011±0.002) g/L提高至(0.841±0.020) g/L,较表达前提高了75.45％.随后,外源添加不同浓度Ca2+和生物素考察其对琥珀酸发酵的影响,结果发现,Ca2+的添加促进了菌体的生长但不利于琥珀酸的积累,而外源添加浓度为16、32、64、96μg/L生物素时,琥珀酸产量分别提高75.04％、84.26％、69.28％、66.79％.其中生物素质量浓度为32 μg/L时,琥珀酸产量达到最大为(0.964±0.02)g/L,且丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase,PC)酶活提高14.42％,说明PC酶活的提高促进了酿酒酵母中琥珀酸的积累.该研究为解决酿酒酵母琥珀酸合成过程中前体碳代谢流不足问题提供了新的解决思路.
本发明公开了一种鲜酿白酒及其制造方法，它是在黄酒和清酒的生产工艺和技术基础上，调整和改变在发酵酒酿造生产过程中的原料、糖化剂、发酵剂的使用方式和方法，产成品率高。是一种工艺简单、成本低廉的白酒生产工艺，生产的白酒营养丰富，口感醇和干爽，在口感上具有白酒风格特点，内在品质及营养含量上又与黄酒和清酒相同。
本研究以纯合二倍体工业酿酒酵母SC iso Kan作为出发菌株进行连续发酵,通过逐步降低发酵体系pH值,对酵母的耐酸性进行长期驯化.从pH2.7发酵体系分离获得耐酸性突变菌株SCiK12,通过孢子形成、分离和培养,获得两株优秀的耐酸性单倍体菌株SCiK12B3 (MATa)和SCiK12 C(MATα),通过交配获得耐酸性二倍体菌株SCiK12 BC4.在35℃,pH2.5条件下,利用15％YPD发酵48 h,和原始出发菌株SC iso Kan相比,菌株SCiK12BC4 (MATa/α)和单倍体菌株SCiK12 B3 (MATa)及SCiK12 C3 (MATα)基于糖消耗的乙醇收率分别提高了12.5％,17.5％和17.2％.本研究结果表明,连续发酵驯化结合单倍体分离和交配是获得耐无机酸突变菌株的有效手段.
利用反相离子对色谱法(RP-IPC)对啤酒中的腺嘌呤(Ade)、鸟嘌呤(Gua)、黄嘌呤(Xan)和次黄嘌呤(Hyp)等4种嘌呤类物质的测定方法进行了研究.结果表明,当检测波长254nm,流动相为水:甲醇:冰乙酸:四丁基氢氧化铵为883.5:100:15:1.5(V/V/V/V),流速为1ml/min时,方法精密度为1.41%～2.42%,测得四种嘌呤物质的回收率在91.2%～100.3%之间.啤酒中的含嘌呤类物质需要经高氯酸水解成嘌呤,经优化的水解条件为啤酒:高氯酸为1:2、100℃水解30min.
本实用新型公开了一种用于米香型白酒制作的洗米装置，包括盛装筒、连接件和底座，所述盛装筒包括无孔筒体、有孔筒体和有孔底板，所述无孔筒体设置在所述盛装筒的上部，所述有孔筒体设置在所述盛装筒的下部，所述有孔底板设置在所述盛装筒的底部，所述底座设置在所述有孔底板的底部，所述底座包括多段弯曲圆柱，每段所述弯曲圆柱均通过所述连接件与所述有孔筒体的侧壁连接。本实用新型用于米香型白酒制作的洗米装置，通过在盛装筒的底部设置底座，使得在洗好米过后能直接放置即可滴水，不用再增加额外的工具进行辅助，降低了生产成本，提高了生产效率，更加具有推广使用的价值。
以苹果汁(pH3.64)为培养基,在苹果汁中分别加柠檬酸(CA)2.6、5 4 、9.9、19.0、32.8、47.1、61.5/L,对应苹果汁的pH分别为3.20、2.97、2.74、2.51、2.31、2.17、2.03,研究了CA时酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae sp.)生长、酒精发酵的影响.结果表明:CA浓度为2.6～61.5s/L时,酿酒酵母能发酵,发酵周期随CA浓度增大而延长.CA浓度2.6、5.4、9.9、19.0g/L时,对酿酒酵母的细胞总数、死亡率、残糖量、酒精与挥发酸含量没有显著影响(P＞0.05);CA浓度为32.8、47.1g/L时,酿酒酵母细胞总数显著减少(P＜0.05),死亡率极显著提高、残糖量极显著增多、挥发酸生成极显著升高(P＞0.01),对酒精生成没有显著影响(P＞0.05).CA浓度2.6、5.4S/L时,对酵母细胞体积无显著影响(P＞0.05);当CA浓度≥9.9'g/L时,体积极显著减小(P＜0.01).比较47.1和61.5g/L两个CA浓度,发酵苹果汁中酿酒酵母细胞总数、死亡率没有显著差异(P＞0.05),后者细胞体积显著减小(P＜0.05)且发酵不彻底.CA浓度为0、2.6、5.4、9.9、19.0、32.8g/L时,发酵后滴定酸升高;CA浓度为47.1、61.5g/L时,发酵后滴定酸降低.