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产纤溶酶菌株的分离和鉴定及纤溶酶基因在酿酒酵母中的表达

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-05-30 阅读:527
目的:从豆豉中分离具有强纤溶活性的菌株,实现纤溶酶基因在酿酒酵母中的表达.方法:通过纤维蛋白平板法从豆豉中分离具有强纤溶活性的菌株,结合形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列分析鉴定该菌株;通过PCR扩增豆豉纤溶酶基因,构建pYES2-DFE重组质粒,转化酿酒酵母H158感受态细胞,经β-半乳糖诱导表达后,用纤雏蛋白平板法分别检测发酵液上清和菌体破碎上清的纤溶酶活性.结果:鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);活性检测结果是酿酒酵母发酵液上清具有纤溶酶活性,而菌体破碎上清没有活性.结论:豆豉纤溶酶基因在酿酒酵母中实现了分泌表达.
通过对红色啤酒生产辅料配比及酿造工艺进行研究,经过规模试生产,确定了以红米、黑米组合为辅料配比及酿造生产红色啤酒的工艺参数.酒体色泽淡紫红、清澈透明、泡沫丰富、细腻;口感清爽纯正;酒体中的总黄酮、烟酰胺及钾离子含量比普通啤酒有极显著增加.
建立并利用固相萃取-高效液相-荧光法对国内市场上31种罐装啤酒中双酚物的含量进行了调查。方法的检测限为0.02~0.09μg/L,在0.02~50.00μg/L的检测范围内相关系数大于0.99,加标回收率和标准差分别为80.67%~101%和1.01%~4.84%。样品中除双酚E(BPE)没有检出外,双酚A(BPA)、双酚A二缩水甘油醚(BADGE)、双酚F二缩水甘油醚(BFDGE)、双酚B(BPB)和双酚F(BPF)的平均检出浓度分别为2.99、0.41、0.18、0.12、0.12μg/L,检出率分别为100%、83.9%、6.4%、12.9%和6.4%。BPA和BADGE是罐装啤酒中存在的最主要的双酚物,其平均每日摄入量分别估计为0.0160、0.0022μg/kg.bw.d,低于欧盟关于BPA50μg/kg.bw.d的规定。样品中BPA没有超过欧盟规定的0.6mg/L,BADGE的迁移也未高于9mg/L,但是BFDGE的检出是不允许的。目前尚无关于BPF、BPE和BPB的迁移限值。
以提高啤酒废水的可生化性为目的,利用生活污水和UV/TiO2-Fenton试剂对啤酒废水的可生化性进行研究.经检测,啤酒废水的BOD5/COD为0.343.实验结果表明:当生活污水与啤酒废水体积比为5:20、pH为7、啤酒废水的稀释倍数为2时,BOD5/COD为0.464;在UV/TiO2-Fenton试剂对啤酒废水的可生化性过程中,当紫外灯照射时间为90 min、pH为7、H2 O2投加量约为20 mg/L、TiO2投加量约为0.4 g、FeSO4的投加量约为16 mg/L时,BOD5/COD为0.622.
本发明涉及一种小曲糖化大曲发酵白酒工艺,它属于生物酿造技术领域。本发明包括的步骤是原料、泡粮、初蒸、喷烟水、复蒸、出甑摊凉、加小曲、培菌糖化、配槽加大曲、入窑发酵和蒸馏。本发明生产工艺简单,酒质优,香气口感好,产量稳定,提高了效率,降低了产酒成本。
酶解或发酵是食品加工常用的手段.在酶解或发酵过程中, 食物中的微量元素会发生变化.本文研究了 (1) α-淀粉酶和胰蛋白酶加酶量、反应pH值、酶解温度和酶解时间对富硒大米粉中硒含量及保留率的影响;(2) 采用植物乳杆菌和酿酒酵母发酵处理富硒大米粉, 分析发酵过程中硒含量的变化, 结果表明:α-淀粉酶酶解淀粉, 可使硒含量提高, 胰蛋白酶处理硒含量下降.α-淀粉酶和胰蛋白酶处理导致硒的保留率分别下降7%~17%和13%~29%, 说明蛋白酶造成的硒的损失大.采用植物乳杆菌和酿酒酵母发酵的大米粉中硒保留率分别下降14.65%和21.66%, 说明采用植物乳杆菌发酵对硒的保存率较好.

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