高效表达淀粉酶的工业酿酒酵母菌株的构建

将PCR扩增的扣囊腹膜孢酵母菌淀粉酶基因, 与磷酸甘油酸激酶基因1启动子和α-分泌序列一起插入含2μm的酵母穿梭质粒YEp352,构建酵母菌重组表达质粒并命名为pLA8α. 用醋酸锂转化法转化工业酿酒酵母Sc-16, 转化子培养上清液的淀粉酶活性为6.8U/mL, 46%的淀粉被降解, SDS-PAGE检测到约55ku的蛋白条带.转化子在非选择条件下的遗传稳定性为82%.
本发明公开了一种白酒丢糟发酵制白酒的方法，其特点是利用低残留淀粉丢糟资源，通过发酵菌剂强化麸曲的制备以及发酵菌剂的复配酿酒工艺发酵制备白酒。即将上述发酵菌剂复配培养物∶丢糟∶自来水＝1∶1.8～2.5∶0.8～1.2的重量比例，搅拌混合均匀，用保鲜膜半密封封口，置于温度25～27℃恒温培养箱中培养10～45d。然后，常压蒸馏获得白酒原酒，计算丢糟总淀粉利用率为46.4～62.4％，淀粉产酒精转化率46.1～90.1％。
一种用挤压加工的不加酶或加酶的白酒原料固态发酵酿造白酒的方法，属于白酒酿造技术领域。本发明首先提供一种挤压不加酶或加酶白酒原料的加工方法，再提供用挤压不加酶或加酶的白酒原料固态发酵酿造白酒的方法。其主要技术特点是提供白酒原料的挤压系统的合理参数，和使用挤压白酒原料的固态法白酒生产的合理参数。与现有技术相比，挤压不加酶或加酶的白酒原料的酒醅在发酵过程中，淀粉降解较彻底，发酵时间较少，风味更加浓郁。与目前普遍采用的传统固态发酵酿造白酒工艺相比，本发明挤压不加酶或加酶的白酒原料的白酒酿造方法，省去加热蒸煮工序，可节省能耗，降低成本，增加原料利用率，增加白酒产量，缩短发酵周期，且风味独特。
用谷氨酸菌和啤酒酵母菌进行麦汁发酵培养,跟踪了累积热量值和菌量(OD值)等参数在发酵过程中的变化趋势,发现累积热量值和菌量的变化趋势相似;用一元线性回归模型和多项式回归模型对累积热量值和菌量进行曲线拟合,对模型作假设检验,结果表明累积热量值与菌量存在线性关系,累积热量值可以监控生物发酵过程.
以酿酒酵母31206为出发菌株,采用紫外、微波及NTG复合诱变,经过初筛、复筛、再复筛的方法筛选出金属硫蛋白产量较高的一株菌,总蛋白含量的测定用考马斯亮蓝G-250法,金属硫蛋白含量的检测用酶联免疫分析法(ELISA法),巯基活性的检测用简化巯基试剂(DTNB法).诱变后总蛋白含量由原来的44.6mg/g菌体提高到170.2mg/g菌体,金属硫蛋白含量由原来38.3ng/L提高到163.4ng/L,巯基活性由原来的0.029μmol提高到0.146μmol.
一种白酒酒糟的利用方法，包括以下步骤：将酒糟制成酒糟培养基；向酒糟培养基中加入菌种，发酵7-10天，得到发酵产物。本发明工艺简单，使用方便，效果显著。