酿酒酵母抗镉基因CAD1的克隆和分析

目的:克隆CAD1基因,对其结构和功能进行预测,为后期研究利用该基因用于重金属镉的解毒作用及其他有毒物质的抗性研究打下基础.方法:使用PCR技术对酿酒酵母BZL06的CAD1基因序列进行全长克隆,再对其进行染色体定位和亲缘关系分析,使用在线分析工具ExPASy、ProtParam等对其编码蛋白质的一级结构、二级结构、三级结构、结构域和蛋白互作进行预测分析.结果:该CAD1基因位于Ⅳ染色体1318046～1319275;全长1230 bp,可编码409个氨基酸,亲缘关系分析表明该基因与酿酒酵母CEN.PK113-7D菌株CAD1基因(GenBank序列号为EIW11633.1)最为接近,同源性达到99％;编码的蛋白质为在细胞核中进行代谢调控的不稳定的亲水蛋白;存在明显的卷曲螺旋区域,不存在跨膜结构,二级结构预测中发现该蛋白主要存在α-螺旋和随机卷曲,β-转角与延伸链分散分布;预测存在bZIP和PAP1结构域;蛋白互作分析中相关系数0.7以上的蛋白有9个,其中相关系数为0.937的SKN7蛋白是CAD1蛋白.结论:分析结果得出克隆CAD1基因正确,其编码的蛋白结构不稳定,在细胞核中代谢,含有与重金属镉与其他有毒物的过表达中存在抗性的表达紧密相关的结构域bZIP和PAP1,在表达抗性时并与SKN7蛋白功能联系密切.
对筛选自我国广西毛葡萄产区的汉逊酵母属的Hanseniaspora thailandica(MSF1-4、MG4、MG6、MSF6-2)、伊萨酵母属的Issatchenkia terricola(MG3-1)、酿酒酵母属的Saccharomyas cerevisiae(MSF8-1)和毕赤酵母属的Pichia pastoris (MG1)共7株酵母酿造‘桂葡3号’干白葡萄酒,分析探讨其理化指标及挥发性香气物质,并以商业酵母K1发酵酒样为对照.结果 表明:7株菌发酵酒各理化指标均符合GB 15037-2006《葡萄酒》要求;共检测到68种香气物质,实验组香气总量均大于对照组K1;其中辛酸乙酯在乙酯类总含量中高达46.05％,而对照组K1中辛酸乙酯占乙酯总含量的7.12％;MG3-1、MG1、MSF6-2特征香气物质为乙酸苯乙酯、壬醛、4-萜烯醇、芳樟醇、1-辛醇、1-癸醇,MG6的特征香气物质为乙酸异戊酯、香茅醇,MSF8-1、K1、MG4特征香气物质为乙酸乙酯,MSF1-4的香气特征物质为玫瑰醚、月桂酸乙酯、辛酸、癸酸、癸酸乙酯、辛酸乙酯、丁酸乙酯、乙酸己酯、己酸乙酯、辛酸甲酯;其中K1、MG4发酵实验组香气特征最为接近,MG6、MSF1-4发酵实验组香气特征差异最大.上述结果分析得出7株野生酵母菌具有较强的产辛酸乙酯的能力,MG1、MSF1-4产香能力最好,适合进一步研究开发.
本发明公开了一种清香型白酒的酿造方法，包括原料粉碎、蒸料装甑、初步摊凉、初步加曲入缸、初步蒸馏取酒、二次摊凉、二次加曲入缸、二次蒸馏取酒。原料冷却后，将其放入到发酵缸中，并且向发酵缸中加入酒曲，发酵前加入酒曲含量为13％，发酵缸内的温度控制在18?32℃，发酵缸所在的屋子中铺设有暖气管道。本发明涉及白酒酿造技术领域，该清香型白酒的酿造方法，通过提高了清香大茬酒发酵缸的发酵初始温度，增强了发酵动力，满足了清香酒“前缓升、中挺、后缓落”的发酵原则，使总酸提高了0.23g/L，总酯提高了1.05g/L，乙醛、异戊醇、异丁醇均略有下降，大茬原酒清香更突出，入口醇厚绵软回甜、爽口、回味长，并具有一定的粮香味。xa0xa0
目的 构建人乳头状瘤病毒16型(HPV16)E7重组全酿酒酵母疫苗.初步评价疫苗的免疫应答效应.方法 将HPV16 E7 cDNA亚克隆入酵母表达载体pYES2/NT,重组质粒转化酿酒酵母,经诱导表达、热灭活制备全酵母HPV16-E7疫苗.疫苗免疫C57BL/6小鼠,ELISA检测其诱导的抗体和细胞因子表达水平.结果 重组全酵母疫苗能够有效地表达HPV16-E7蛋白;疫苗小鼠免疫,能够诱导出特异性抗HPV16-E7抗体,并促进Th1型细胞因子的表达.结论 研究结果 为进一步进行疫苗抗肿瘤免疫研究,提供了实验基础.
为了更好地了解高校教师对葡萄酒的认知和消费状况,对秦皇岛驻地的5所高校教师进行了问卷调查.结果表明,葡萄酒是最受秦皇岛高校教师欢迎的酒种;高校教师对葡萄酒俱乐部、葡萄酒品尝和知识讲座很感兴趣;长城、张裕、王朝品牌知名度高;电视是获取葡萄酒知识的主要渠道;高校教师对利乐包和易拉罐装葡萄酒难以接受;近七成的高校教师不知道葡萄酒与菜肴搭配的说法;近九成没参加过葡萄酒的文化旅游;高校教师的口味倾向于干红酒;超市是高校教师主要的购酒场所;品质、品牌和价格是主要购买因素;高校教师购买葡萄酒多用于自己喝,且收入越高的越喜欢消费葡萄酒;随着年龄的增长,高校教师饮用葡萄酒的目的由追求氛围转向追求保健;喝过国外葡萄酒的高校教师达2/3以上.建议葡萄酒企业和行业以葡萄酒文化为桥梁,积极关注和开发潜力巨大的高校教师市场.
白酒冷冻过滤系统，涉及制酒工艺的冷冻过滤系统，包括初始过滤器、第一热交换器、粗滤机，第一热交换器的第一出液端连接第二热交换器的第一进液端，第二热交换器的第一出液端与粗滤机的进液端连接；第二热交换器的第二出液端连接酒精储液罐，酒精储液罐的出液端连接第三热交换器的第一进液端，第三热交换器的第一出液端与第二热交换器的第二进液端连接；第三热交换器的第二出液端连接速冷机组，速冷机组的出液端连接第四热交换器的第一进液端，第四热交换器的第一出液端与第三热交换器的第二进液端连接，第四热交换器的第二出液端连接冷却塔，冷却塔的出液端与第四热交换器的第二进液端连接。本实用新型可避免制冷剂渗漏到白酒里去。