近年来利用合成生物学手段生产萜类化合物逐渐成为一种趋势.诱导型和组成型启动子调控萜类的生产各有利弊,而肩动子类型的选择需要根据特定体系和产物来进行具体分析.本工作针对紫杉醇关键前体紫杉二烯的合成,分别研究了酵母细胞中诱导型启动子和组成型启动子的调控.首先通过过表达酵母内源截短的羟甲戊二酰辅酶A基因(thmgr)和法尼基焦磷酸合酶基因(erg20),实现了对酵母内源模块的调控.随后向改造后的底盘细胞中整合入诱导性启动子调控的外源紫杉二烯合成模块,得到了紫杉二烯产量为5.2 mg·L-1的人工酵母.而换用组成型启动子tdh3p调控时,产量达到11.5 mg· L-1,说明对于这个体系组成型启动子更为适合.通过简单的发酵条件优化,该菌株产量提升了70％,达到19.5 mg· L-1.组成型启动子调控的菌株可以利用葡萄糖作为碳源,因而更利于后续大规模发酵.
杨梅果酒采用游离酵母发酵时,由于微生物所产生的β-D-葡萄糖苷酶对果汁中的呈色花色苷有脱糖作用,导致其失色或降解,从而使杨梅果酒失去鲜艳的红色.为了解决这一问题,本研究采用海藻酸铝固定化酿酒酵母(商品名分别为安琪,Lalvin D254,Lalvin BM45,and Lalvin L2323)代替游离酵母发酵杨梅果酒,对四种固定化酿酒酵母的花色苷稳定作用进行了试验.结果表明四种酵母的海藻酸铝固定化发酵均表现出明显的护色效果,经过20d发酵后,呈色花色苷保存率分别为50%(D254)、46.4%(安琪)、45.5%(L2323)、42.7%(BM45),而在相应品种的酿酒酵母的游离细胞发酵时,保存率仅分别为22.7%、20.9%、24.5%、26.3%.这种保护作用主要来自于海藻酸铝固定化细胞珠致密外层的物质低扩散性、后期酒精对的抑制作用以及形成铝离子对花色苷的稳定作用.另外,在发酵前期,海藻酸铝固定化酵母的平稳发酵速度和慢速消耗酒醪中的二氧化硫对最后的呈色花色苷保存率也有重要意义.
以速生杨二步超低酸水解方法获得的水解液为原料,在 28 ℃、100 r/min 等发酵条件下,选择热带假丝酵母(C.2.637)和酿酒酵母(S.2.699)分别对第一步和第二步水解液进行了发酵制取燃料乙醇的研究,并考查了Ca(OH)2中和、过中和、活性炭吸附等预处理方法及菌种预适应驯化对乙醇转化率的影响.结果表明:热带假丝酵母能够更好地利用第一步水解液生成菌体,适合生产单细胞蛋白;菌种驯化后发酵速度和乙醇转化率均有提高,尤其是以酿酒酵母发酵第二步水解液,乙醇转化率由 14.45 % 增至 39.37 %;Ca(OH)2过中和的方法处理后的水解液,乙醇转化率有所增加;以五碳糖为主同时含有六碳糖的速生杨第一步水解液,假丝酵母发酵产乙醇的效果好于酿酒酵母.
盐城是全国的重要啤大麦生产基地,应倡导实行区域化种植布局,建立商品啤麦生产基地;坚持由龙头企业牵头,提高啤麦生产组织化程度;政府主导,对啤麦行业给予必要的支持和扶持.其核心问题,是要建立"统筹兼形,利益均等,共同尽责,风险共担"的贸、工、农一体化的生产经营体制和运行机制.规范各方的职能,相互配合共同努力,提高盐城地产啤大麦的商品率.
[目的]研究离子液体1-乙基-3-甲基咪唑磷酸二乙酯磷酸盐([Emim] DEP)对酿酒酵母SY101生长的影响.[方法]用显微镜观察了不同[Emim]DEP浓度下液体培养基中对数生长期酵母细胞的形态及出芽情况,用分光光度法测得的数值绘制出酵母菌24 h生长曲线.[结果]试验发现,[Emim]DEP对酿酒酵母SY101生长有抑制性,随着[Emim]DEP浓度的增加,抑制作用越明显.当[Emim]DEP浓度高于3 g/L时,酵母菌的形态发生明显改变;浓度高于10 g/L时,酵母菌的出芽率明显下降.通过平板培养测得[Emim]DEP对酵母菌的半有效浓度EC50值为6.67 g/L.[结论]研究可为由离子液体从农林废弃物中制备纳米纤维素后的残渣发酵燃料酒精的研究提供基础数据.
目的构建以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的酿酒酵母表达载体.方法利用通用载体质粒融合系统(UPS),首先将GFP片断连入donor载体,随后在Cre酶作用下与acceptor载体融合,获得了带有GFP片断的酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)表达载体.结果成功构建了以GFP为报告基因的酿酒酵母载体,并在酵母中得到表达.结论GFP是一种理想的报告基因.同时,利用UPS能够高效、简便地进行酵母表达载体的构建.
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