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酿酒酵母ATP合酶δ亚基融合蛋白的构建、表达及生物学功能分析

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-02 阅读:456
利用分子克隆手段构建了酿酒酵母ATP合酶δ亚基和流感病毒血凝素(haemagglutinin, HA)标签融合蛋白的表达质粒.该融合蛋白在酿酒酵母细胞中能够正常表达,而且能够互补编码δ亚基的ATP16基因缺失株在利用非发酵性碳源方面的表型缺陷,表明该融合蛋白具有野生型δ亚基的功能.同时,构建了在大肠杆菌细胞中表达该δ亚基的ScAtp16p-His6融合蛋白,并用纯化的融合蛋白在家兔中制备了其多抗血清.结果表明此多抗可以很好地与ScAtp16p-His6和HA-ScAtp16p两种融合蛋白特异性结合.这些研究材料的获得为深入研究ATP合酶的解偶联机制和磷酸化调控机理奠定了基础.
通过以实验室培养的啤酒酵母作生物吸附剂对Cu(Ⅱ)进行了研究.结果表明:啤酒酵母对Cu2+的吸附是一个快速的过程,最佳pH为4,其等温吸附过程以Langmuir等温吸附模型拟合效果最好.此外,菌体用量也会影响啤酒酵母对的吸附效果,其经济的菌体用量浓度与Cu2+浓度比约为100:1.
一种用米酿造白酒的方法,是用米和无机物质矿砂作原料酿造白酒:首先,用米代替粮食,其次用各种型号无机物矿砂,均可代替粮食上的糠皮和稻壳、谷壳、麦壳等有机物作松散剂,根除有机物质作松散剂在白酒发酵中生成的甲醇、杂醇油、乙醛、异戊醇和乙酯等杂质对人身健康的伤害,该方法是:把含二氧化硅、三氧化二铝、氧化锰、三氧化二铁、氧化铁、氧化镁、一氧化二钾、一氧化二钠、二氧化钛和水的无机物矿砂(含其他型号矿砂)进行高温膨化,制成保温性能好,生化性质稳定、不腐、不燃、无毒、无味、轻质、含水的无机物松散剂。最后把碎米和无机物松散剂按比例与水调和搅拌成湿料,并顺序蒸料、凉料拌菌、下窖发酵,出窖蒸馏和勾兑成用米酿造的白酒。
以啤酒酵母菌体为原料,利用超声波法提取酵母细胞内蛋白质,选择干热法、热碱法和酶法对酵母蛋白进行改性处理,通过比较改性前后酵母蛋白的泡沫性能可知:3种方法均对酵母蛋白泡沫性能有一定的改善作用,其中浓度为1.5%Ca(OH)2水解后得到发泡母液的泡沫性能最佳,泡沫体积达到1109.1 mL,稳泡时间达10.1h.采用响应面实验法中的Box-Behnken设计对影响热碱法改性蛋白发泡体积的3个主要因素[反应温度、反应时间、Ca(OH)2浓度]进行优化,结果表明:当水解温度77.88℃,水解时间2.39 h、Ca(OH)2浓度1.34%时泡沫体积达最大,最大预测值1135.1 mL,实际测得平均发泡体积为1127.2 mL,与模型理论预测值相比相对误差在0.72%,所以采用响应面实验法优化得到的参数准确可靠,具有实用价值.
我国啤酒生产每年会产生大量的副产物麦糟和废酵母,而屠宰行业也会产生大量的禽畜血液副产物,两者具有很高的营养价值,适合作为发酵饲料的原料加以利用.以麦糟为主料,加入血粉辅料,混合接种不同益生菌,通过测定发酵产物蛋白质含量、糖含量及总酸含量等指标,分别评价不同主辅料配料比、发酵时间、酵母菌及乳酸菌接种方式及接种量等因素对混合发酵饲料品质的影响,筛选生产发酵蛋白质饲料的最佳条件.结果表明:在血粉辅料添加量为15.00%、发酵温度为30℃、接种酵母菌单一菌种且接种量为2.00%、发酵时间为5 d的条件下,获得的发酵产物品质较好,蛋白质含量达到50.36%,与初始样品的蛋白质含量相比,提升幅度达到75.53%;利用酵母菌及乳酸菌混合发酵时,先接入1.00%乳酸菌发酵2 d后,再接入1.00%酵母菌继续发酵至7 d时,产物的蛋白质含量达到59.27%,与初始样品的蛋白质含量相比,提高幅度达到106.59%.利用上述2种发酵方式得到的产品可作为良好的蛋白质饲料.
在临夏州高寒阴湿区田间比较了露地条播、露地穴播、全膜穴播、全膜覆土穴播啤酒大麦性状及产量.结果表明,苗期长势以全膜穴播最好,全膜覆土穴播次之,露地穴播好于露地条播.出苗至成熟期5、10 cm平均地温以全覆膜穴播最高,比露地条播分别高3.1、2.6℃;全膜覆土穴播次之,比露地条播分别高1.1、0.6℃;露地穴播较露地条播分别高0.5、0.4℃.啤酒大麦折合产量全膜覆土穴播、全膜穴播分别较常规种植增产9.9%、6.5%.

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