分泌表达pEGF的重组酿酒酵母在断奶仔猪上的应用研究

本研究对分泌表达pEGF的重组酿酒酵母在断奶仔猪日粮中的应用效果进行验证.72头21～24日龄的断奶仔猪((6.10±0.15)kg),随机分为3组(每组4个重复,每个重复6头):对照组(基础日粮+228mL·kg-1空白培养液)、空载体组(基础日粮+228 mL·kg-1空载体)及重组酵母组(基础日粮+228 mL·kg-1 INVSc1 (pYES2-Mfα-spEGF)).21 d后,每组每栏选取1头仔猪屠宰,分别测定其小肠组织形态、小肠黏膜中IgA、IgG及IgM水平,碱性磷酸酶(ALP)、肌酸激酶(CK)及乳酸脱氢酶(LDH)的酶活力及mRNA转录水平,小肠黏膜中表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGF-R)的mRNA转录水平.结果表明,与对照组及空载体组相比,重组酵母组INVSc1(pYES2-Mfα-spEGF)能够显著提高断奶仔猪小肠各段(十二指肠、空肠及回肠)黏膜中EGF-R及消化酶(ALP、CK及LDH)的mRNA转录水平(P＜0.05),极显著提高CK和LDH的酶活力(P＜0.01),显著促进其空肠及回肠黏膜中IgA、IgG及IgM水平(P＜0.05),提高其平均日增重(ADG)及降低F/G(P＜0.05).综上,本研究获得的重组酿酒酵母INVSc1(pYES2-Mfα-spEGF)表达的EGF蛋白具有较高的生物学活性,能明显促进断奶仔猪小肠黏膜发育及其免疫功能,具有向养猪生产进一步转化的开发价值.
研究了小球藻细胞活性物质(CGF)的提取方法及其对微生物生长及其生理活动的影响,结果表明:5种不同提取方法的CGF产出率分别为10.6%、18.2%、21.5%、26.6%、28.4%,差异很大,并且其生理活性也不同.添加第4种提取方法的1.0%CGF,24h后计数,啤酒酵母菌数量是对照的14.98倍,乳酸菌数量是对照的2.2倍.CGF具有增加啤酒酵母菌和乳酸菌的细胞分裂速度和促进生长的作用,还可以增加啤酒产气量、调节乳酸杆菌与链球菌的数量比值、延长乳酸制品的保质期,改善品质、增加营养等功能.
研究发酵里脊火腿菌种的筛选及工艺优化.利用耐盐试验、耐亚硝酸盐试验、产酸率和拮抗性试验对植物乳杆菌(Lp)、啤酒片球菌(Pc)、乳酸链球茵(st)、嗜酸乳杆菌(La)进行菌种筛选试验,应用正交试验对滚揉工艺和发酵工艺进行优化研究.菌种筛选表明Lp、Pc在6%NaCl,150 mg/kgNaNO(2)下能够存活;Lp比Pc耐NaCl、NaNO(2)性强,产酸率Lp大于Pc,植物乳杆菌(Lp)和啤酒片球菌(Pc)可以作为发酵肉制品的发酵剂.发酵火腿最佳工艺条件为:菌种配比Lp:Pc=1:1、发酵温度30℃、菌种接种量10(7)CFU/g、相对湿度85%或90%、滚揉时间为40 min、注射率15%、发酵时间为30 h、滚揉速度8 r/min,滚揉温度设一定值为5℃.
采用基因重组技术将黑曲酶糖化酶GAI cDNA与MF-α1因子的启动子-信号序列及PGK基因的转录终止位点重组进大肠杆菌-酵母穿梭质粒构建酵母表达载体YepMGT20,用原生质体转化法引入酿酒酵母GRF18,在酵母MF-α1启动子-信号序列及PGK终止位点的调控下,实现糖化酶的高表达,99%的酶活力分泌至胞外,构建的酿酒酵母GRF18(YEpMGT20)在10%淀粉的培养基中培养48 h,淀粉水解率达96.1%;在10%淀粉的YPS培养基中发酵96 h可产生5.6%(v/v)的酒精(在20%淀粉培养基中酒精产量达8.4%),在无选择压力的SC培养基中培养5 d,重组质粒的丢失率只有1.9%.
本发明的一种果味白酒的快速制作方法，包括以下步骤：将水果经过清洗后沥水；将硅藻土加入酒精度为30%~75%的白酒中，硅藻土与白酒的配置比例是1:1000~3:1000，搅拌混匀后，放置30~60分钟，除渣、过滤，得到白酒原液；将清洗后的水果加入白酒原液中，水果与白酒原液的配置比例是1:3~1:10；将白酒原液与水果加入搅拌机中，通过搅拌机对水果进行压碎搅拌；将搅拌后的产物加入过滤机，进行除渣、过滤，得到果味白酒原液；将果味白酒原液通过高温瞬时杀菌机进行杀菌处理，得到果味白酒；采用上述方法后，本发明具有以下优点：通过水果与白酒搅拌混合，可以调节和改善白酒的味道、浓度和色泽，适合不同饮酒者的口味，而且不含任何添加剂，所得的白酒为纯天然食品，含水果果香，具有环保和无机产品的特征，这样的制作方法需要时间短，并且可以大批量的生产，满足市场的需求。
本实用新型提供了一种能够解决白酒或其它液体自动定量灌装的装置，适用于白酒、饮料等液体的自动计量装瓶装置。它是由稳压机构、分装器、微动开关、定时阀等组成，可实现灌装的连续流水作业，具有造价低、对瓶形适应性强、效率高、无机械破碎等优点。