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短小芽孢杆菌C-9葡聚糖内切酶基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-02 阅读:487
从短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)C-9中克隆得到葡聚糖内切酶基因,该基因包含1980 bp核苷酸,编码559个氨基酸,其N端有一个预测的29个氨基酸的信号肽序列;以YIp5质粒为骨架,构建rDNA介导的多拷贝整合载体,实现葡聚糖内切酶在酿酒酵母中的高效、稳定表达.与对照菌株相比,含有葡聚糖内切酶基因的重组酿酒酵母可以在以羧甲基纤维索为唯一碳源的培养基上生长.
[目的]研究酵母菌与乳酸菌混合培养的条件.[方法]对产朊假丝酵母(Candida tails)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)等4种菌的混合培养条件进行了优化,分析了溶解氧、温度、pH值、接种比例及接种量对其菌体生长的影响.[结果]在培养基的起始pH值6.5、酵母菌与乳酸菌混合种子(活菌数约2×10<'9>CFU/ml)中酿酒酵母菌数:产朊假丝酵母菌数:植物乳杆菌数:嗜酸乳杆菌数约为1:2:3:3、酵母菌与乳酸菌混合种子的接种量为0.2%、前期120r/min震荡培养24 h,后期静置培养24 h,培养温度为28℃恒温24 h,32℃恒温24 h条件下,培养液中的总活菌数可达到6.50×10<'8>CFU/ml.[结论]该培养基增殖效果好,适合应用于大规模生产混合发酵酵母菌与乳酸菌的发酵剂.
本发明提供一种基于白酒液液萃取的浓缩方法,包括如下步骤:1)萃取:采用萃取溶剂CH2Cl2对白酒样品进行萃取,所得有机相即为白酒萃取液,进入后续分馏浓缩步骤;2)分馏浓缩:采用韦氏分馏柱对白酒萃取液进行分馏浓缩,得到浓缩液。本发明采用韦氏分馏柱对白酒样品进行分馏,有效减少白酒样品浓缩过程中香气活性化合物的损失,不存在倒吸风险,设备成本低。
功能微生物的挖掘与应用是近年来酿酒工程领域科学研究与工业生产共同关注的焦点,然而,检索CNKI中国知网和Web of Science数据库发现,近10年关于酒曲中功能微生物的研究有超过400篇文献针对大曲,针对小曲的相关研究报道却不足50篇.本文首先介绍了小曲的定义、发展历史和应用现状,然后综述了酿酒小曲中功能微生物在种类、筛选方法、功能成分、应用价值等方面的研究现状,重点阐述了酿酒小曲中功能酵母主要功能产物的代谢机理,为酿酒小曲中功能微生物的进一步研究和工业生产应用提供参考.
以啤酒酵母、大肠杆菌和青霉为研究对象,在一级动力学模型的基础上,研究处理时间对这3种微生物的致死动力学方程,并获得它们的临界处理时间tc和回归系数k2,从而证明三种菌对高压脉冲电场的耐受能力为:青霉>大肠杆菌>啤酒酵母.
采用高效液相色谱法(HPLC)分析异构化α-酸,给出同一色谱条件下异α-酸、二氢、四氢和六氢异α-酸的HPLC谱图和各组分的紫外光谱.用该方法分析未知啤酒样品,将其与标准品进行对照,从而鉴别出样品中异构化α-酸的种类.

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