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重组GAL基因型酿酒酵母菌株的生长、发酵及遗传稳定性研究

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-02 阅读:192
半乳糖激酶基因(GAL1)启动子是酿酒酵母(Saccharumyces cerevisiae)表达外源蛋白的高效诱导性启动子,其表达效率受到GAL4的调控和半乳糖的诱导,改变酵母的GAL基因型有助于提高外源蛋白的表达水平,但重组GAL菌株的菌株特性仍需要进一步研究以确保蛋白表达的稳定性.本研究分别对敲除了不同GAL1和插入不同GAL4基因拷贝数的重组GAL基因型酵母进行了生长发酵性能和遗传稳定性研究.结果表明,重组菌株的GAL基因型在传代过程中较为稳定,没有发生回复突变和遗传霉素(G418)和博来霉素(Zeocin)抗性恢复的情况;与对照原始MS-1酵母相比,重组菌株(SG1、DG115、DPG65和GQ21)的生长性能在葡萄糖培养基中的生物量略有下降.与半乳糖诱导培养基(yeast peptone galactose,YPG)相比,GAL1基因的敲除在甘油培养基(yeast peptone galactose glycerin,YPGL)中对酿酒酵母半乳糖利用的影响更为显著.其中,在YPG和YPGL培养基内,对照MS-1、SG1、DG115和DPG65利用完所有半乳糖分别需要20、20、20、26、20、44、44和68 h,而GQ21均无法利用半乳糖.GAL基因的敲除和插入没有影响酿酒酵母的热致死温度,原始菌株和重组菌株皆为54℃.本研究将为工业利用酵母表达系统大规模、低成本生产重组蛋白提供研究基础.
以SO4、5BB两种砧木与宁夏主栽的赤霞珠、美乐、霞多丽进行绿枝嫁接,研究砧木对酿酒葡萄生长、果实品质的影响。结果表明,对于同一接穗品种,以5BB为砧木越冬保存率高,接穗与砧木增粗的速度接近,亲和性更好。SO4和5BB两种砧木显著增加赤霞珠葡萄的单粒质量,但对3个品种的穗质量没有明显影响。5BB做砧木提高霞多丽、赤霞珠可溶性固形物含量,降低霞多丽、美乐可滴定酸含量;以SO4为砧木显著降低3个品种可溶性固形物含量,提高赤霞珠酸含量。综合来看,以5BB为砧木可提高果实品质,而SO4为砧木降低果实品质或推迟成熟。
本发明公开了一种多粮食清香型白酒,按重量份计由如下原料组成:高粱5-20、玉米5-20、大麦5-10、小麦10-20、大米1-10、苦荞40-60、糯米1-15、水60-80。本发明还提供一种多粮食清香型白酒的制备方法,包括以下步骤:1)清洗、蒸煮;2)降温;3)发酵;4)蒸馏;本发明方法操作简单,经济环保,制备的白酒兼具多种粮食的营养价值及功效,清香风味浓郁,绵甜醇厚。
介绍了酸浸-焙烧法制取高档硅藻土助滤剂的工艺,运用该工艺所制取的硅藻土助滤剂的质量大大超过啤酒厂用助滤剂的要求.
以浒苔、石莼、豆粕、扇贝边、葡萄糖、贝壳粉、维生素和矿物质预混料为原料配制刺参(Apostichopus japonicus)饲料,利用酿酒酵母菌菌液和碱性蛋白酶制剂对刺参饲料进行4种不同的处理,得到5组实验用饲料,分别为对照组、发酵组、酶解组、复合组和鲜浒苔组.将上述饲料饲喂初始体重为(1.92-0.02)g的幼刺参42 d,每种饲料设3个重复,每个重复30头幼刺参.结果显示,不同的浒苔型饲料对幼刺参的存活率(SR)、增重率(WGR)、特定生长率(SGR)和饲料系数(FC)有显著影响(P<0.05),而对其脏壁比(R)无显著性影响(P>0.05).复合组和鲜浒苔组SR要显著高于酶解组(P<0.05),而与其他2组均无显著性差异(P>0.05).鲜浒苔组WGR远高于其他各组(P<0.05),而复合组和发酵组WGR显著高于酶解组(P<0.05),与对照组差异不显著(P>0.05).幼刺参的SGR规律与WGR一致.鲜浒苔组FC显著低于对照组、发酵组和酶解组(P<0.05),与复合组差异不显著(P>0.05).随着摄食饲料时间的推移,对照组、发酵组、复合组和鲜浒苔组淀粉酶(AMS)活力先升高再下降后趋于稳定,而酶解组一直呈现下降趋势.酶解组纤维素酶(Cellulase)活力呈现一直下降的趋势,而其他组呈现波动变化,且均高于初始活力值.随着摄食饲料时间的推移,除酶解组外,其余各组胰蛋白酶(TRY)活力前后时间点变化差异不大,且每个采样点幼刺参TRY活力大小顺序始终是对照组>复合组>鲜浒苔组>发酵组>酶解组.不同浒苔型饲料饲喂的幼刺参体腔液中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)和超氧化物歧化酶(SOD)活力均有显著性差异(P<0.05).鲜浒苔组ACP活力最大,且与复合组无显著性差异(P>0.05),而显著高于其他3组(P<0.05).鲜浒苔组和复合组AKP活力显著高于酶解组和对照组(P<0.05),与发酵组无显著性差异(P>0.05).复合组SOD活力最大,且显著高于发酵组和酶解组(P<0.05),而与对照组和鲜浒苔组均无显著性差异(P>0.05).由此得出,幼刺参在摄食先酶解后发酵的饲料后能够得到良好的生长效果,并可改善自身肠道消化,维持正常免疫.这为解决刺参饲料原料短缺以及浒苔高值化利用提供了依据和方法.
酿造型高梁杂交种辽杂40号(085A/311)是辽宁省农业科学院高粱研究所于2007年以自选不育系085A为母本,自选恢复系311为父本杂交组配而成的杂交种.2012年通过辽宁省农作物品种审定委员会审定.辽杂40号具有淀粉含量高、单宁含量适中、产量高、综合抗性好、适应性广等优良特性,是优质的酿酒用高梁杂交种.

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