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以GFP为报告基因的酿酒酵母mRNA在哺乳动物细胞中的表达

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-03 阅读:440
目的研究酵母mRNA在哺乳动物细胞中的翻译表达.方法半乳糖诱导GFP基因在酿酒酵母细胞中表达,提取其mRNA,RT-PCR鉴定,并以脂质体为介导,对血管内皮细胞HUVFC以及绿猴肾细胞COS-7进行体外转染.结果被转染HUVEC和COS-7细胞分别出现绿色荧光,报告基因GFPmRNA在动物细胞中被识别、翻译.结论提示酵母mRNA可能作为基因治疗物质应用于口服基因治疗的研究.
以生甘薯淀粉为唯一碳源,从霉腐甘薯中分离纯化出一株产生淀粉糖化酶(RSGA)活力高、复合酶系协同作用强的菌株SP7.经形态学初步鉴定为黑曲霉.SP7经紫外线与氯化锂复合诱变,获得优良突变株SP7-2.SP7-2固体发酵产RSGA活力为3446U/g,生料酿酒酒精度为12.5%.分析初步提纯酶的性质得出:SP7-2所产RSGA对各类大、小生淀粉均有较强的水解能力,水解产物只有葡萄糖,其底物专一性顺序为玉米淀粉>甘薯淀粉>马铃薯淀粉>大米淀粉>木薯淀粉>小麦淀粉.以生甘薯淀粉为底物,最适酶解温度和pH值分别为40℃、4.0,60℃保温1h残余酶活低于5%,pH3.5时酶活力是其最适pH值条件下的90%以上,且pH3.5时室温放置1h仍保留90%以上酶活力,表明该酶有一定的热敏感性和很好的耐酸性,具有较好的工业应用前景.
为了建立健全啤酒花优质脱毒种苗栽培技术体系,提高啤酒花产量并改善其品质,以啤酒花脱毒苗和未脱毒苗为参试材料,设置5个对比试验区,观测并分析了啤酒花的生长性状、产量和品质。结果表明:啤酒花脱毒苗甲酸含量、鲜花产量、干花产量和贮藏指数都较对照分别提高14.52%、11.57%、10.81%和0.69%,具有很好的经济效益和推广价值。
本发明公开了一种鉴定白酒重要风味物质的方法,先用去离子水将待测酒样稀释到最终酒精含量12-14%vol,然后用顶空固相微萃取富集样品中风味化合物,再运用全二维气相色谱-飞行时间质谱联用测定,同步结合嗅觉检测器进行嗅觉闻香鉴定对白酒重要风味物质进行定性分析,然后通过标准曲线内标法对已确认的白酒重要风味物质进行定量分析。本发明建立了一套快速全面剖析白酒的风味化合物中的关键香气、特征香气与重要香气化合物的方法,建立了白酒风味化合物的定性定量方法与感觉结合的技术体系,以及评价体系,进一步提供了剖析了白酒的微量成分的神秘面纱一个有效工具。
以啤酒糟为主要基质,利用黑曲霉固态发酵生产酸性蛋白酶、木聚糖酶和纤维素酶等多种饲料复合酶,研究了黑曲霉固态发酵培养基组成对复合酶酶活的影响,确定最优培养基配方为:啤酒糟75%,麸皮25%,硫酸铵1%,KH2PO4 0.2%, MnSO4 0.1%、ZnSO4 0.2%,料水比1∶2.在适宜的发酵条件下,经30 ℃发酵5 d,烘干后得到的复合酶制剂中,具有多种酶活性(以干基计).其中酸性蛋白酶活力3 800 U/g,木聚糖酶活力12 00 U/g和纤维素酶活力18 U/g.
本发明涉及酱香型白酒发酵的方法,采用黄水温度控制在50-63℃代替窖泥微生物进行发酵。

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