宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄滴灌土壤水分变化特征研究

针对贺兰山东麓酿酒葡萄种植中存在大水沟灌水分利用效率低,滴灌技术应用缓慢等问题,试验设计了3个水分处理(分别以0～60 cm土层灌前土壤田间持水率的60％,70％和80％作为各处理灌水控制下限),通过田间试验,研究了贺兰山东麓地区砂质壤土条件下不同监测深度、监测点的土壤含水率变化特征.结果表明,滴灌葡萄土壤水分受灌水的影响较大,灌水下限不同,土壤水分也存在明显的差异,主要随着灌水下限的增大而增大;3年生幼龄葡萄,距滴头20 cm处葡萄根系密集分布层土壤水分下降很快,葡萄植株的生长对该处土壤水分的需求高于距滴头40 cm的土壤水分;灌水下限70％田间持水率的处理在垂直剖面上土壤水分分布较合理,灌水间隔时间为5d,推荐作为该地区葡萄控制灌溉的下限.
为促进嗜酸乳杆菌L101的生长,本研究以MRS为基础培养基,选取添加6种增殖因子(番茄汁、胡萝卜汁、平菇汁、黄豆芽汁、啤酒和低聚异麦芽糖),单因素试验比较了各因子增殖作用,正交试验研究选取促进活菌数提高的最佳增殖因子组合.试验结果表明:黄豆芽汁在各单因子中增殖效果最佳,当其在MRS培养基中添加浓度为10%(V/V),菌体在38℃下培养14 h时,活菌数可达4.034×109℃FU/ml;经正交试验所得最佳复合增殖因子组合为:黄豆芽汁5%(V/V)、平菇汁1O%(V/V)、番茄汁10%(V/V)和低聚异麦芽糖(10g/L).嗜酸乳杆菌L101在添加了该增殖因子组合的MRS培养基内培养14 h时,活菌数可达5.25×1O10CFU/ml.本研究为进一步提高嗜酸乳杆菌L101活菌数提供了必要的工艺参数.
使用山毛榉木片和多孔陶瓷作为固定酵母的载体,对这两种载体在固定化连续后发酵中的固定化效果以及生产的啤酒的各项指标进行比较和研究.结果表明,与多孔陶瓷相比,山毛榉木片固定化酵母的量、达到饱和时速率分别高出31.2％、45.4％,且牢固程度较优.分别以山毛榉木片与多孔陶瓷作为载体,后酵生产的啤酒中双乙酰含量差异显著(p＜0.05),其余指标差异不显著(p＞0.05).风味物质中,乙醛、甲酸乙酯、乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇、乙酸异戊酯、异戊醇的差异显著(p＜0.05),其余风味物质的差异不显著(p＞0.05).氨基酸含量中,酪氨酸、亮氨酸的含量差异不显著(p＞0.05),其余氨基酸含量差异性显著(P＜0.05).
通过以大生产麦汁成分的含量作为参考,如氨基酸的种类、含量,各种可发酵性糖的种类、含量,以及通过查阅大量文献资料了解酵母培养所需的一些必需组分,以此为基础,研制标准培养基的配料单,并结合与大生产麦汁做发酵性能测试,测试指标包括降糖速度、风味组分、还原双乙酰等指标,最终确定合理的配方;并验证其发酵性能的稳定与重复性;试验结果表明,配制培养基与大生产麦汁的各项发酵性能与指标接近,而且具有较好的重复与稳定性.可以用于酵母筛选,从而确定筛选优良酵母菌种的客观性.
ω3脂肪酸去饱和酶(fatty acid desaturase,FAD)能使藻类细胞产生一系列具有高附加值的ω3脂肪酸.在已克隆到缺刻缘绿藻(Myrmecia incisa Reisigl)的ω3FAD基因基础上,为进一步了解其功能,本研究首先利用反转录PCR(RT-PCR)技术,克隆其开放阅读框(open reading frame,ORF)片段,然后亚克隆到穿梭表达载体pYES2中,以构建重组酵母表达载体pY-ω3FAD;通过电穿孔法将该重组载体转入酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)INVSc1菌株中,经筛选与序列验证得到含有pY-ω3FAD重组质粒的酵母转化株.在5℃,添加底物亚麻酸及半乳糖诱导表达,连续培养72 h,经脂肪酸甲酯的气相色谱分析及气相色谱-质谱联用证明,转目的基因的酵母能将外源添加的亚油酸在15位脱氢生成α-亚麻酸,表明ω3FAD具有△15脂肪酸去饱和作用的功能.在不同温度条件下诱导培养时,气相色谱结果显示,在30℃培养的转基因酵母中没有检测到α-亚麻酸；但在不高于25℃培养的转基因酵母中,发现ω3FAD能将外源添加的底物去饱和为α-亚麻酸,且随着温度的降低,其去饱和能力增强,5℃时的底物转化效率达到29.73％.将转目的基因酵母在5℃温度下诱导培养不同时间,结果显示,随着培养时间的增加,LA(linoleic acid,亚油酸)转化为α-亚麻酸的效率也提高,培养4d时其转化效率达到38.86％.该研究结果提示,缺刻缘绿藻ω3FAD基因编码的酶蛋白为一个低温诱导酶.缺刻缘绿藻ω3FAD基因之所以能在酵母细胞中被低温诱导表达,可能因为后者存在一个低温诱导的脂肪酸去饱和系统.
本发明涉及一种酿酒方法，具体为固态法浓香型白酒的发酵方法，将糟醅逐层放入窖池内时，每层均匀喷洒酵母菌液；封窖皮泥10-20cm，密封发酵；发酵30-35d后，在封窖泥上打孔，将己酸菌黄水复合菌液灌入上层糟中，然后用封窖泥快速密封孔口；发酵至55-60d后，重复打孔、灌己酸菌黄水复合菌液，发酵结束，糟醅出窖，蒸酒，得到浓香型白酒。本发明提供的固态法浓香型白酒的发酵方法，对入窖糟醅进行分层增酵母菌强化发酵过程；然后在发酵中期分段同时渗入己酸菌黄水复合菌液，使功能菌和黄水渗入上层和中层糟醅中参与生化代谢，改善了糟醅中微生物的分布状况，不仅提高了白酒中的风味物质含量，而且风味协调。