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两株高糖分利用能力的酿酒酵母呼吸突变体选育

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-04 阅读:127
以酿酒酵母乙醇发酵高产工业菌株MF1002为始发菌株,对其营养细胞进紫外线诱变,筛选得到两株性状稳定的呼吸缺陷型突变体MF15c和MF11a.菌体细胞对2,3,5-氯化三苯四氮唑(TT℃)显色测定呼吸强度的结果表明,两突变菌株的相对呼吸强度分别只有始发菌株的57.77%和47.25%.与现有报道的呼吸缺陷突变体不同,两株突变体的细胞生长速率只在培养初期略低于始发菌株,总体生长速率与始发菌株几乎没有差异,在YPD平板上培养也不形成小菌落.比较蔗糖发酵试验表明,两株突变体的乙醇产量较始发菌株只分别略提高6.48%-6.59%(MF15c)和1.66%-1.97%(MF11a),但发酵终止的残总糖含量却显著低于始发菌株,分别减少34.85%和19.70%,发酵效率较始发菌株分别显著提高6.69%和4.71%,表明这两株突变体为新型的呼吸缺陷型突变.鉴于提高乙醇发酵的发酵效率可显著降低生产成本,认为这两株突变菌株具有较高的潜在工业利用价值.
为研究酵母菌混合培养条件下生长状态的变化规律以及相互影响的因素,选取2种酵母菌,酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae,Sc) 131和毕赤酵母菌(Pichia fabianii,P.f) 65,考察了初始糖含量、pH值、乙醇体积分数对两菌种混合培养时生长状态的影响,并通过气相色谱-质谱分析方法考察了2种细胞脂肪酸组成的差异性.结果表明,相对于纯培养,混合培养条件下,Pf对Sc产生明显的抑制作用,在低糖和低pH值环境条件下,Sc受抑制作用加剧,当初始糖含量2%时,PflSc(菌体浓度比)为28,pH 3.5时,PflSc达37;在外源添加乙醇时,随着乙醇体积分数的升高,Pf受抑制程度较Sc严重,Sc生长处于相对优势地位,说明Sc较Pf耐乙醇,当乙醇体积分数为12%时,PflSc为0.5.经细胞脂肪酸组成分析,Sc主要为C16的棕榈酸和棕榈油酸,Pf主要为C18的油酸、亚油酸和亚麻酸,混合培养时细胞脂肪酸组成主要为C18型脂肪酸,Pf细胞代谢产生的亚油酸和亚麻酸的积累释放可能是抑制Sc生长的因素之一.实验结果可为进一步从转录组水平研究混合酵母相互影响的机制,以及发酵质量控制提供理论支持.
采用随机扩增多态性DNA(RAPD)分子标记对6个属的21个酵母菌株的基因组DNA的多态性进行了研究,并采用聚类分析法评价它们之间的亲缘关系.研究表明,RAPD能够检测出酵母种内微小的遗传学差异,以其特征谱带作为酵母菌种鉴定的特征标记.聚类分析结果显示,休哈塔假丝酵母与热带假丝酵母之间亲缘较近,遗传距离为0.114,它们与毕赤树干酵母之间遗传距离为0.493;粟酒裂殖酵母与卡斯伯酒香酵母的亲缘关系较近,遗传距离为0.322;嗜单宁管囊酵母与克鲁斯假丝酵母间的亲缘较近,遗传距离为0.383,它们与酿酒酵母间的遗传距离达到0.443,与产朊丝酵母聚类的遗传距离是0.471.除假丝酵母属外,大多数酵母属、种间的分类结果与经典形态学分类结果相符.
本发明公开了一种白酒的高度存储降度饮用方法,包括将高度酒进行分装包装储存,根据特定的公式设计出带酒精刻度标识的容器,然后将高度酒注入该容器的相对应的酒精刻度,最后将含水液体注入至需要的酒精刻度即可。该方法将生产的高度白酒先进行较小容器分装包装,保持高度存储,在饮用时通过饮酒者简单操作,就能方便、快捷、有效的将高度酒降低到该高度白酒酒精度以下任意酒精度的低度白酒或不同口感的酒类饮料。
本实用新型公开了一种白酒酿造凉床加曲机,属于酿造白酒的生产设备技术领域,包括风箱、传送带、加料箱和加曲箱,传送带位于风箱的上面,传送带前端比后端低,加料箱位于传送带的前端上部,传送带将物料从前端向斜上方向的后端输送,在传送带的后端上部设有加曲箱,加曲箱是上口大、下口小的梯形槽,上口、下口为长方形口,上口与下口的长边相同,上口的宽边比下口的宽边长,加曲箱底部设置一个可转动带有均匀条形凹槽的圆不锈钢轴。本实用新型结构简单,造价低,操作使用方便快捷,有效地提高了生产效率、节约了原料,适合在白酒行业内推广应用。
通过单因素试验和均匀设计试验对酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae CWY132生物转化合成2-苯乙醇的培养基组成及培养条件进行优化研究.优化后培养基组成及培养条件为:葡萄糖30.1 g/L,KH2PO4 5 g/L,L-苯丙氨酸5.8 g/L,MgSO4 0.5 g/L,酵母氟碱0.17 g/L;最佳初始pH 5~6,接种密度1.21×107/mL,最适培养温度28~30℃,200 r/min振荡培养36 h.优化后2-苯乙醇产量达到3.98 g/L,比优化前的1.9 g/L提高了109%.原料L-苯丙氨酸的摩尔转化率从最初的51.4%提高到了92.7%.

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