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来源于胞曲霉的α-1,2-甘露糖苷酶在酿酒酵母△alg3△och1△mnn1菌株中的定位表达

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-04 阅读:286
利用酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)生产医药糖蛋白,必须对其N-糖基化途径进行人源化改造.在敲除酿酒酵母W303A特异性糖基化基因ALG3、OCH1和MNN1后,表达来源于胞曲霉(Aspergillus saitoi)的α-1,2-甘露糖苷酶(MsdSp)进一步改造酿酒酵母N-糖链.通过在MsdSp的C-端添加内质网滞留信号(HDEL)和构建高尔基体滞留信号Kre2p与MsdSp的嵌合体蛋白实现MsdSp在内质网和高尔基体中的定位表达.结果表明,各突变株中均检测到Man3GlcNAc2和Man4 GlcNAc2型N-糖链,并且在强启动子酵母甘油醛-3-磷酸脱氢酶启动子(GPD)控制下,内质网定位表达MsdSp的菌株KM201中,Man3 GlcNAc2和Man4GlcNAc2型N-糖链含量较多.该研究为酿酒酵母N-聚糖进一步人源化改造提供依据.
本实用新型属白酒物理陈化器具。它是由外径与酒瓶口相配的柱塞、屏蔽环、柱塞套依次紧套在一起,在柱塞中部有一轴向扁圆通孔,该通孔外侧纵向镶嵌两个条形磁体及一个扁圆塞构成,在扁圆通孔中形成具有梯度的磁场。本实用新型塞在酒瓶口,倒酒过程中白酒经扁圆通孔磁化处理。使白酒口感明显变得醇香、甜、绵,达到3-5年自然陈化的效果。本实用新型结构简单、陈化方便迅速,适于家庭使用。
试验研究了制粒过程和保存时间对益生菌活力的影响,将8株益生菌分别制成单一菌制剂,与无抗生素42~49龄肉鸡全价料混合,分别在0.1 Mpa,65℃(A)、0.2 Mpa,70℃(B)、0.3 Mpa,75℃(C)3种条件下制粒.结果表明:随着压力和温度的不断提高,活菌含量不同程度下降,但在A条件下,地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、乳链球菌、啤酒酵母的死亡率较低,分别为2.69%、0.00%、26.2%、8.95%;说明该制粒过程对地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、乳链球菌、啤酒酵母的影响比较小,适合制粒;而干酪乳杆菌(52.1%、88.2%、99.8%)、植物乳杆菌(99.5%、99.5%、99.9%)、粪链球菌(99.9%、100%、100%)、产朊假丝酵母(95.7%、99.6%、100%)在A、B、C条件下的死亡率均比较高.对适合制粒益生菌的保存试验发现,地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、啤酒酵母在90 d的保存期内死亡率分别为2.40%、1.50%、3.50%,而乳链球菌在90 d内保持下降趋势,45 d后活菌含量急剧下降,到90 d时死亡率达到93.7%,说明该菌株对环境的抗逆性较差.
目的:从pHSS6-mTn-3xHA/lacZ质粒文库中筛选出能高水平表达lacZ基因的质粒载体.方法:文库质粒转化大肠杆菌,挑单克隆,提质粒约200个,Notl酶切,分别转化酿酒酵母,通过URA3和lacZ的表达筛选出能发生同源重组,并能高水平表达lacZ的质粒载体.结果:200个质粒分别转化酿酒酵母,通过SC-URA筛选出11株能发生同源重组的重组子,再通过lacZ显色反应,筛选出两株有lacZ基因表达的菌株,其中一株能高水平表达β-gal,另一株有较弱表达.结论:筛选出的质粒载体为其它外源基因在酿酒酵母中稳定高效表达奠定基础.
本研究在采用诱导剂+自溶法的基础上,结合多种提取方法,通过对比和正交试验确定啤酒废酵母中蛋白质的最佳提取工艺及参数,并用胃蛋白酶-胰蛋白酶联合消化法测定提取蛋白质的消化率.实验结果表明使用诱导剂+自溶+酶解法提取较好,最佳工艺条件为:温度50℃、pH值7.0、酶解自溶时间为40h、中性蛋白酶用量25U/g干酵母、β-葡聚糖酶用量15U/g干酵母.在此条件下,粗蛋白质得率达27%.啤酒废酵母提取的粗蛋白质体外消化率为81.06%.
一种养颜白酒及其制备方法,其特征在于由下列重量份的原料制成:玉米粒200-210、高粱110-120、玉米芯颗粒20-25、稻谷皮25-30、酒曲7-7.5、葡萄65-70、银耳6-7、芝麻5-6、葵花籽4-5、扇贝5-6、海参3-4、当归2-3、桃花4-5、茯苓3-4、玉竹5-6、百味参2-3、补血草3-4、木鱼石30-35、营养保健液10-11。本发明的白酒的原料经与木鱼石混合蒸煮,木鱼石中的微量元素渗入其中,提高了营养价值,且本发明添加了葡萄、银耳等,改善了本发明的风味,同时搭配桃花等多种中草药可起到美容养颜的功效。

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