生物合成γ-氨基丁酸酿酒酵母谷氨酸脱羧酶基因的克隆与表达

为了提高酵母菌的y-氨基丁酸产量,本研究以十六烷基三甲基溴化铵法(hexadecyl trimethy ammonium bromide,CTAB)提取的酿酒酵母28基因组DNA为模板,扩增得到序列长度为1 758 bp的GAD1基因,经比对与S.cerevisiae S288c的一致性达到98.58％,并设计引物扩增包括GAD1基因上游启动子及调控序列,下游终止子在内的全长基因序列,长度为3 490 bp.将全长基因序列克隆至高拷贝质粒pUG6,构建重组质粒p28.以菌株28作为出发菌株进行转化,经G418抗性筛选得到转化子,进一步经过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)实验验证,质粒提取及酶切验证,确证得到重组子DL28.经重组质粒p28的特性研究得知,重组质粒p28具有良好的遗传稳定性,无抗性传代培养10次重组质粒不丢失.转化后进行酶活力测定,重组子DL28的谷氨酸脱羧酶(glutamic acid decarboxylase,GAD)酶活力比菌株28提高73.8％.通过以上实验结果得出结论,GAD基因高表达菌株DL28具有更高的G418抗性和GAD酶活性.
对啤酒工业化规模发酵过程中酵母分泌蛋白酶A的规律进行了探讨,对酵母代数及酵母贮存条件等因素对酵母分泌蛋白酶A的影响进行了研究,并对蛋白酶A活性不同的成品纯生啤酒的泡持值、泡沫活性蛋白含量及蛋白酶A活性进行了跟踪分析.结果表明:发酵过程中,蛋白酶A的活性呈上升趋势且接种酵母的蛋白酶A活性越高,与其对应的发酵液中蛋白酶A的活性越高,成品酒的泡沫稳定性越差.另外,随着酵母代数及贮存时间的增加,酵母分泌蛋白酶A的量增加.当酵母蛋白酶A活性控制在0.015U/mL以下且成品酒的初始蛋白酶A活性在15×10-5U/mL以下时,储存4个月的成品纯生啤酒的泡沫稳定性较好.
本发明公开了一种白酒酿造专用酒缸，包括上缸体和下缸体，下缸体靠近上缸体的一侧固定连接有环形的固定块，上缸体靠近下缸体的一侧开设有环形的固定槽，固定块插设在固定槽中，固定块的环形内侧壁上固定连接有环形的密封圈，密封圈填充在固定块与固定槽的槽壁之间，固定块的环形外侧壁上对称开设有卡槽，卡槽的槽底固定连接有弹簧，弹簧的另一端固定连接有卡块，卡块远离弹簧的一端为弧形，固定槽的环形槽壁上对应卡块的位置开设有卡孔，卡块远离弹簧的一端延伸至对应的卡孔中，下缸体的下端连通有出酒管。本发明将上缸体和下缸体拆分开，方便的对酒缸进行清洗，而且，保证了白酒发酵的稳定性。
高粱在我国东北、西北及西南地区广泛种植,应用于食用、酿酒、饲料、淀粉、制醋、饴糖等诸多领域,介绍了测定其容重指标时不同辅助筛层的结果探讨.
通过对永昌国家二级农业气象试验站的啤酒大麦品种-干啤5号生长发育与平均气温、积温及日照等气象要素的分析判断,结果表明啤酒大麦生育期平均气温较高的年份,作物全生育期较短,反之亦然,符合植物生长规律;日照时数对啤酒大麦的相关性影响不显著,啤酒大麦成熟期只要≥0℃积温达到1936℃左右即可.通过对啤酒大麦生育期的分析,以便为科学进行农事活动提供决策参考和理论依据[1].
采用6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)柱前衍生,紫外、荧光双检测器串接,通过梯度洗脱,在AccQ.Tag C18氨基酸专用分析柱上同时分离并定量测定了啤酒中包括天冬酰胺和谷氨酰胺在内的21种游离氨基酸.方法操作简单,准确可靠,具有较高的灵敏度.21种氨基酸在0.01～1.25 mmol/L内其浓度与响应值呈线性关系,相关系数(r2)不小于0.995,大部分氨基酸的加标回收率为92.5%～100.1%.分析了6种啤酒样品,受酵母对氨基酸的同化规律的影响,不同酿造工艺制造的啤酒其氨基酸组成差异明显.