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黄曲霉寡聚-1,6-葡萄糖苷酶基因的克隆及其在工业酿酒酵母CICC1346中的表达

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-05 阅读:234
通过重叠延伸PCR(gene splicing by overlap extension,SOE-PCR)扩增黄曲霉寡聚-1,6-葡萄糖苷酶基因和酿酒酵母α-信号肽序列,定向重组到整合型表达载体pδRCMB中,并在CICC1346中实现分泌表达;然后通过同源建模、利用分子模拟软件Discovery Studio 4.1分析其蛋白结构,以对硝基苯-α-D-葡萄糖吡喃苷(pNPG)为底物,建立并确定酶活反应条件,并进行纯化、酶学性质分析;将密码子优化后序列在CICC1346中实现分泌表达,利用淀粉进行共发酵实验.结果显示:重组酶突变后相对野生型蛋白结构无影响.SDS-PAGE分析重组重组酶大小约为70 kDa;优化后最高酶活达到0.69 U/mL,重组酶最适pH为6.5,在pH4.5.0 ~ 7.0维持90%以上的酶活;最适温度为40℃,在30 ~ 40℃维持接近100%的酶活;受Cu2+和MR2+严格抑制;寡聚-1,6-葡萄糖苷酶与α-淀粉酶及糖化酶协同利用淀粉产乙醇,提高淀粉水解效率.这是首次报道黄曲霉的寡聚-1,6-葡萄糖苷酶基因在酿酒酵母整合型分泌表达.
提供一种白酒灌装回收装置,包括灌装机上的灌装箱,其特征在于:所述灌装箱的一端设置一液环泵及过滤箱,液环泵及过滤箱由管道与灌装机相连。在灌装机上增加了液环泵及过滤箱,两者可将灌装箱内流下的白酒,通过管道由液环泵抽入到过滤箱内过滤后,然后抽回到灌装机上重新灌装。整个操作过程方便快捷,无需人工操作。
[目的]探讨啤酒废酵母中蛋白质的最佳提取方法及工艺条件.[方法]采用超声波法、冻融法、盐热法、碱热法4种提取方法.[结果]超声波法、冻融法、盐热法、碱热法在最佳工艺条件组合时,蛋白质提取率分别为3.47%、4.15%、5.66%、22.81%.啤酒废酵母蛋白质的提取以碱热法最佳,其最佳条件组合为:菌液比3: 10,氢氧化钠浓度1%,提取时间1 h,提取温度60 ℃.[结论]该研究为啤酒废酵母工业化大量提取提供了理论和试验依据.
研究宁夏贺兰山东麓产区霞多丽、贵人香干白葡萄酒地域特性的主要香气特点,运用固相微萃取技术提取霞多丽、贵人香干白葡萄酒的香气组分,用内标法对检测峰予以定量分析,并结合气相色谱-质谱、计算机检索技术对分离香气化合物进行分析测定,共检测出49种香气物质.结果表明,干白葡萄酒香气成分主要有酯、醇、酸、酚、萜烯5类化合物,其中酯类、醇类、酸类分别为18种、16种、4种;两品种酒样(霞多丽与贵人香)干白葡萄酒香气成分含量显著不同,有关香气成分含量多少与其贡献度大小并不成正比,与气味活度值(Odor Activi-ty Value,OAV)大小关系较为密切;贵人香新酒主要香味成分与霞多丽相当,霞多丽酒样具有一定的青苹果、草莓果香,贵人香则有较明显的花香、水果的味道,经过陈酿的贵人香酒样表现出香蕉、椰子等热带水果及奶酪等乳制品的味道;经气相色谱-质谱联用仪(Gas Chromatograph-Mass Spectrometer,GC-MS)检测,在定量出酒样中的49种香气成分中,高含量化合物中酯类香气贡献率明显高于醇类和酸类,微量成分中酚类和萜烯类贡献率高,微量香气成分中,虽然一些物质含量较低,但具有较高贡献率;经聚类分析得出,新酒香气成分含量表现出年份影响较品种差异明显,但经过陈酿酒样,则品种差异占主要优势.
本发明公开了一种成分稳定的鹿茸黄酮白酒,由下列重量份的原料制成:食品级醋酸钠2?3、高粱200?210、小米65?75、茉莉花瓣14?16、无花果6?8、海螵蛸5?6、醋糟9?11、鹿茸30?33、硫酸铵1?2、黑皮油松松针38?42、50%乙醇溶液适量、水适量;本发明白酒通过食品级醋酸钠等有机酸盐的添加,能促进白酒体系中溶胶的形成,海螵蛸、醋糟等发酵料的使用能抑制白酒酸值升高并减缓香味成分含量的散失,从而提高了白酒中各成分的稳定性,增加了白酒质量和口感。
本实用新型涉及白酒灌装领域领域,尤其涉及一种白酒灌装机构,包括架体、升降器、升降台和灌装器,灌装器安装在升降台上,升降器连接于升降台与架体之间并用于控制升降台的升降动作;所述灌装器包括罐体、活塞、弹簧、轴管、灌装管和硅胶套,罐体内具有活塞腔,轴管竖向布置在活塞的中部,在硅胶套设置在罐体下部并呈锥状以对应密封至酒瓶口处;酒瓶灌装白酒时,硅胶套密封于酒瓶口处,酒瓶内和活塞腔内的气压同步增加并使活塞上移直至活塞触动位置传感器。提供一种能够根据气压及活塞位置变化判断白酒灌装液位的装置,能够更加准确有效的保证白酒的灌装的精度,使酒瓶内所灌入的白酒量恒定。

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