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花生△12脂肪酸脱氢酶基因AhFAD2B在酿酒酵母中的表达及功能分析

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-06 阅读:590
花生油中亚油酸(LA,C18:2Δ9,12)含量很高,为了研究花生Δ12脂肪酸脱氢酶(Δ12 FAD)的功能,用RT-PCR方法从花生未成熟种子中扩增出AhFAD2B的cDNA,连接到酵母表达载体p416中,并转化酿酒酵母K601,得到工程菌Kp4AFAD2B.气相色谱分析脂肪酸成分,结果表明该基因能在酵母K601中表达,并使菌株产生了两种新的脂肪酸即棕榈二烯酸(C16:2Δ9,12)和亚油酸(C18:2Δ9,12),含量分别占总脂肪酸的2.1%和9.2%,棕榈油酸(C16:1Δ9)和油酸(C18:1Δ9)含量与对照相比相应地下降,证明该基因编码的Δ12脂肪酸脱氢酶除能作用于C18:1Δ9,还具有催化16碳的C16:1Δ9底物在Δ12位脱氢生成C16:2Δ9,12的功能,但在两种底物之间可能更偏爱C18:1Δ9.
单纯性肥胖症主要诱因为机体摄取能量比消耗量要大,导致机体存储过多脂肪,体质量超常,无明显代谢性或内分泌性疾病病因,多关联于营养过剩、遗传因素等.单纯性肥胖症诱因为内外因两种,内因主要为遗传,外因主要为喜食肥甘厚味或嗜啤酒、好逸恶劳及喜食肥肉等.学者提出在内外因素作用下会导致脏腑功能失调,致使病理产物如膏脂、水湿及痰浊等在体内壅积后导致肥胖,辩证治疗为关键所在.近年来针灸治疗单纯性肥胖的研究取得了一定成果,现综述如下.
本发明公开了一种微电脑白酒处理设备,包括:底盘、底盘下安装有方便移动的地脚轮、安装在底盘上的增压泵,微波发生器,活性炭过滤罐,其特征在于:粗滤罐,精滤罐,增压泵输入侧设有酒液进口和清洗液进口,酒液进口上安装有阀门a,清洗液进口上安装有阀门b,增压泵输出侧设有流量调节阀和压力变送器;微波发生器内有白酒流通的盘管,微波发生器上安装有配电箱,配电箱安装有指示灯、急停按钮、人机界面等电控系统。白酒经过一种微电脑白酒处理设备,达到老熟、除杂味、净化的效果,一种微电脑白酒处理设备具有多种功能,简化操作,节省投资,增加效益,滤芯自带超声波清洗装置,过滤一段时间后滤芯可以自动清洗再生,节省更换滤芯的费用。
采用RT-PCR方法克隆到绿色木霉AS3.3711的葡聚糖内切酶Ⅰ(EGⅠ)的cDNA序列,测序后构建到酿酒酵母诱导型表达载体pYES2上,转化酿酒酵母,转化子用2%的β-D-半乳糖进行诱导,用Northern杂交、刚果红染色法和CMC糖化力法分别对目的基因的转录和表达产物的葡聚糖内切酶活性进行检测.结果表明,EGⅠ的cDNA基因开放阅读框长度为1 377 bp,编码459个氨基酸,推测蛋白质分子量为48.1 kD.刚果红染色显示,转化子可产生明显的水解圈;CMC酶活检测显示该基因能在酿酒酵母中表达有生物活性的EGⅠ并分泌到胞外.发酵液中的酶活在培养60 h达到最高0.06U/mL,最适酶解温度为50℃,最适pH值为5.4.
啤酒花是大麻科葎草属多年生攀岩植物,其主要活性成分有以葎草酮类和蛇麻酮类为主的树脂类成分和其衍生物,黄腐酚、异黄腐酚为代表的多酚类化合物以及以萜烯类和萜烯类氧化物为主的挥发性风味成分.除酿造特性之外,近年来对啤酒花的研究已开始关注剑抗肿瘤、防治骨质疏松、抑制白血病细胞的生长和抗氧化等功能.啤酒花也是传统的中药之一,有健胃、安神、化痰止咳、抗菌消炎等功效.本文综述了啤酒花的化学成分和药理作用研究进展,为其进一步的研究开发提供参考.
[目的]探讨啤酒花渣的饲用价值,为其用作动物饲料提供依据.[方法]试验选用300只1日龄AA肉鸡,随机分为6组,在饲粮中分别加入0、4%、8%、12%、16%、20%啤酒花渣,探讨啤酒花渣对肉仔鸡内脏器官发育及肠道微生物的影响.[结果]各试验祖肉仔鸡的肝脏重、肝脏指数、心脏重、心脏指数、脾脏重、脾脏指数、肌胃重、肌胃指数差异均不显著(P>0.05).在饲粮中添加8%和16%啤酒花渣显著降低了肠道乳酸杆菌的数量(P<0.05),而对肠道大肠杆菌数量的影响不显著(P>0.05).[结论]饲粮中添加啤酒花渣对肉仔鸡内脏器官发育及肠道大肠杆菌生长无不良影响,但添加8%和16%啤酒花渣会抑制肠道乳酸杆菌的生长.

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