缺刻缘绿藻ω3脂肪酸去饱和酶基因(ω3FAD)在酿酒酵母中的低温诱导表达

ω3脂肪酸去饱和酶(fatty acid desaturase,FAD)能使藻类细胞产生一系列具有高附加值的ω3脂肪酸.在已克隆到缺刻缘绿藻(Myrmecia incisa Reisigl)的ω3FAD基因基础上,为进一步了解其功能,本研究首先利用反转录PCR(RT-PCR)技术,克隆其开放阅读框(open reading frame,ORF)片段,然后亚克隆到穿梭表达载体pYES2中,以构建重组酵母表达载体pY-ω3FAD;通过电穿孔法将该重组载体转入酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)INVSc1菌株中,经筛选与序列验证得到含有pY-ω3FAD重组质粒的酵母转化株.在5℃,添加底物亚麻酸及半乳糖诱导表达,连续培养72 h,经脂肪酸甲酯的气相色谱分析及气相色谱-质谱联用证明,转目的基因的酵母能将外源添加的亚油酸在15位脱氢生成α-亚麻酸,表明ω3FAD具有△15脂肪酸去饱和作用的功能.在不同温度条件下诱导培养时,气相色谱结果显示,在30℃培养的转基因酵母中没有检测到α-亚麻酸；但在不高于25℃培养的转基因酵母中,发现ω3FAD能将外源添加的底物去饱和为α-亚麻酸,且随着温度的降低,其去饱和能力增强,5℃时的底物转化效率达到29.73％.将转目的基因酵母在5℃温度下诱导培养不同时间,结果显示,随着培养时间的增加,LA(linoleic acid,亚油酸)转化为α-亚麻酸的效率也提高,培养4d时其转化效率达到38.86％.该研究结果提示,缺刻缘绿藻ω3FAD基因编码的酶蛋白为一个低温诱导酶.缺刻缘绿藻ω3FAD基因之所以能在酵母细胞中被低温诱导表达,可能因为后者存在一个低温诱导的脂肪酸去饱和系统.
[目的] 研究蔗糖基聚合物对成熟期毛葡萄果实营养成分的影响.[方法] 以葡萄酿酒新品种NW196为供试品种,用浓度为0.25%、0.50%、0.75%、1.00%的蔗糖基聚合物水溶液于果实成熟期喷施毛葡萄植株,并于喷施当日及喷施后每隔4 d分别取果实样品进行可溶性固形物、总糖、Vc及可滴定酸等营养成分的测定.[结果] 蔗糖基聚合物可作为植物生长调节剂对毛葡萄有很好的增甜降酸效果,可明显提高糖酸比,从而达到改善水果品质、增强口感的功效,其中0.50%的蔗糖基聚合物水溶液在毛葡萄成熟期喷施的综合效果最佳,可增加甜度15.09%,在喷施第12天,果实Vc含量比对照株高出30.04%.[结论] 蔗糖基聚合物不但能快速提高毛葡萄中可溶性固形物、总糖和Vc的含量,还能降低可滴定酸.
为对黄酒酵母菌株的遗传学进行研究,对黄酒酵母利用基因敲除技术敲除HO基因,通过Mcclary产孢培养基于25℃条件下培养5～7 d,得到a和α两种不同配型且配型不会发生转变的黄酒酵母单倍体菌株,通过群体杂交,成功获得了全敲除HO基因的二倍体酿酒酵母菌株黄酒酵母11-1-HOΔ,用于黄酒发酵实验.结果表明:通过基因工程手段敲除HO基因对黄酒发酵无显著影响,可用于工业生产中,且黄酒酵母11-1-HOΔ具有代表性,获得的单倍体是进一步研究黄酒酵母遗传基础和代谢机制的重要材料.
江苏某啤酒厂在工艺改造的过程中,采用UASB+SBR工艺进行啤酒废水处理,经工程实际运行表明,处理后的废水达到了国家一级排放标准,同时可以实现工业废弃物的资源化再生利用.
为建立干白葡萄酒中重要乙酸酯的生成动力学模型,以爱格丽葡萄为原料,接种酿酒酵母,按常规工艺酿造干白葡萄酒.发酵过程中监测乙醇和乙酸含量变化,并定时取样进行目标香气物质(异戊醇、苯乙醇、乙酸乙酯、乙酸异戊酯和乙酸苯乙酯)的SPME-GC-MS分析,建立目标香气物质的香气活性值变化曲线,同时从经典化学反应动力学角度构建目标香气物质的生成动力学模型.研究结果表明,乙酸异戊酯在发酵过程中表现出香气活性,乙酸苯乙酯仅在最大检出量时表现香气活性,乙酸乙酯检出量一直低于嗅觉阈值.目标香气物质从开始生成至达到最大生成量的含量变化均符合零级动力学模型(R2 ＞0.95,P＜0.001).模型揭示出,乙酸乙酯的生成与乙醇和乙酸具有同时性,乙酸异戊酯和乙酸苯乙酯的生成分别相对于异戊醇和苯乙醇有延滞效应.结合零级动力学模型特征,为增强葡萄酒的花香和果香特征,可尝试在爱格丽葡萄汁发酵旺盛的香气物质半生成期,调控促进乙酸乙酯和乙酸苯乙酯生成.
啤酒制冷系统用电耗能占企业用电总量的35％左右,系统能否高效低耗安全运行将直接影响到整个制冷系统的电耗情况,其中制冷系统所用到的冷凝器则是系统热交换设备的主要关键所在,本文结合啤酒企业制冷系统在用蒸发式冷凝器的安全技术改造实例进行浅谈,以使同行在啤酒制冷系统蒸发式冷凝器安全技术改造中可以借鉴使用.