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酿酒酵母中Tca17经Rab蛋白Ypt31参与囊泡运输和细胞自噬的研究

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-07 阅读:103
为了探讨蛋白质转运颗粒(TRAPP)复合体相关蛋白Tca17通过何种Rab蛋白参与囊泡运输和细胞自噬过程,用绿色荧光蛋白(GFP)标记野生型和TCA 17敲除突变体中囊泡运输标志蛋白Snc1后,检测菌株生长和GFP-Snc1运输缺陷情况,并检测不同Rab蛋白对突变体的生长和GFP-Snc1运输缺陷的抑制情况.相应地,用GFP标记野生型和TCA17敲除突变体中细胞自噬标志蛋白Atg8后,检测菌株生长和在营养缺乏条件下GFP-Atg8的运输和降解缺陷情况,并检测不同Rab蛋白对突变体的生长和GFP-Atg8的运输及降解缺陷的抑制情况.结果表明:敲除TCA 17导致菌株高温敏感,Snc1运输受阻以及Atg8运输和降解异常,过量表达Rab蛋白Ypt31能够抑制TCA17敲除突变体的囊泡运输和细胞自噬缺陷表型,而Rab蛋白Ypt1不具有类似功能,这说明Tca17通过Rab蛋白Ypt31参与囊泡运输和细胞自噬过程.
酵母乙醇提取物是利用啤酒干酵母经培养发酵后提取的富含多种活性物质的混合物.初步实验研究发现,该物质对大肠杆菌蛋白表达有明显促进作用.为了进一步研究其对蛋白表达的作用,以E.coliBL21(DE3)/pGEX-4t-1-ggt为主要研究菌,以2 g.L-1乳糖作为诱导剂,研究酵母乙醇提取物对γ-GGT蛋白表达的作用.研究发现,分批添加终浓度10 g·L-1的酵母提纯提取物到2 g·L-1的乳糖为诱导剂的培养基中可以显著提高γ-GGT蛋白的表达及宿主菌的生长,蛋白表达量比1 mmol·L-1 IPTG诱导效果高10%~50%,菌体密度提高1.75~3倍左右.对于其他的重组蛋白及表达宿主有相似的作用.酵母乙醇提取物与乳糖组成的复合制剂可以有效替代有毒性的IPTG作为诱导剂的使用,为大规模诱导蛋白表达奠定了基础.
为解决葡萄酒专用乳酸菌依赖国外进口,导致葡萄酒品质同质化严重的问题,以甘肃河西走廊产区处于自然苹果酸-乳酸发酵(苹乳发酵)的葡萄酒为来源,筛选具有本土特色的优势乳酸菌.通过改良MRS培养基分离乳酸菌,经生理生化、16S rDNA基因同源性分析等鉴定,并对筛选菌株进行酿酒特性分析.获得3株具有启动苹乳发酵的小片球菌(Pediococcus parvulus,P.parvulus)且均具有较强的降酸能力,较商品乳酸菌差异不显著,其中菌株C30在低温(15℃)、高乙醇体积分数(14%)和高SO2质量浓度(50 mg/L)条件下的生物量显著高于商品乳酸菌.菌株C30可作为启动苹乳发酵的优势菌株,对提升河西走廊产区葡萄酒品质具有一定的应用潜力,在一定程度上推动葡萄酒品质同质化问题的解决.
一种白酒加注自动控制装置,包括主轴、阀门、支臂、锁紧环、压环螺母和浮阀机构,支臂均匀设置在主轴的外圆中部,锁紧环设置在支臂的上部的主轴外圆上,压环螺母设置在锁紧环上部主轴外圆上,阀门设置在主轴的上端,阀门的上端与进酒管连接,浮阀机构设置在主轴的下端;本实用新型提出的技术方案,达到了良好的效果:白酒加注自动控制装置通过主轴外圆上的支臂实现与酒罐上端内孔的固定连接,主轴下部的浮阀机构可以自动关闭加注的白酒,避免了白酒加满后的溢出,极大的降低了工作人员的劳动强度,一人就可以同时给多个酒罐加注白酒,明显提高了工作效率,给企业增加了收益。
一种测定白酒中挥发性成分的方法,属于白酒风味分析技术领域。本发明采用搅拌棒吸附萃取技术(SBSE)与气相色谱-质谱联用技术,对白酒中的挥发性成分进行定性和定量分析。本发明建立的方法能够快速检测白酒中的挥发性成分,并能对这些挥发性成分进行定性定量。搅拌棒吸附萃取技术无需有机溶剂,在常温范围内就能完成,避免了分析过程中产生新的化合物,能有效富集挥发性成分;质谱检测技术能快速准确地鉴定出挥发性成分,提高了本方法的准确性。本发明为进一步系统研究白酒中微量成分,对提高白酒品质有重要意义。
本发明公开了一种白酒酿制方法,涉及酿酒技术领域,包括以下步骤:A.制备高温大曲;B.制备中温大曲;C.将所述高温大曲和所述中温大曲以1.5~2.5:7.5~8.5的比例混合,得到拌曲药;D.将所述拌曲药添加进入制白酒粮食中,发酵制得。与现有技术相比,本发明制备出来的白酒味道浓香且柔和度高。

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