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产青蒿二烯的人工酵母细胞的构建及发酵优化

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-07 阅读:748
为了异源合成抗疟疾药物青蒿素重要前体青蒿二烯,以酿酒酵母作为底盘细胞,利用基因工程手段构建功能人工酵母细胞。为提高基因拷贝数,并增加重组菌株基因型的稳定性,选择酵母基因组中多拷贝位点 Delta 为整合点,实现酿酒酵母内源基因tHMGR和ERG20的过表达以及外源基因ADS的整合。过表达tHMGR和ERG20基因增加了酵母体内半萜类物质共同前体法尼基焦磷酸FPP的积累量;而导入外源基因ADS,实现了酵母生产青蒿二烯。经过摇瓶发酵优化实验,人工酵母菌株青蒿二烯产量为225.3 mg·L?1;为了进一步提高青蒿二烯产量,经过发酵过程优化和补料策略,人工酵母菌株在5 L发酵罐中青蒿二烯产量达到1.05 g·L?1。
报道了以饲料大麦为原料、脱脂玉米粉为辅料,酶法生产75%高浓度啤酒酿造用大麦糖浆及其应用于啤酒酿造试验的研究结果.研究表明,以不适用于发芽的大麦与脱脂玉米粉为原料,全酶法可生产出与麦汁成分相近的大麦糖浆,具有丰富的α-氨基氮等酵母营养物质.探讨了生产不同发酵度糖浆的工艺条件.并通过对高浓度糖浆的保质期进行实验,证明75%的浓度可以长期保存的实验结论.采用所研制的糖浆代替30%的麦芽汁进行啤酒酿造试验获得了理想的结果.
目的:选择不同成熟度的赤霞珠葡萄做酿酒试验,研究葡萄成熟过程中所酿酒香气质量的变化规律.方法:样品香气成分采用二氯甲烷萃取,GC-MS检测分析,同时进行样品酒的感官分析.品尝员均经过葡萄酒品尝学的感官分析训练.结果:从供试酒样中共分析得到44种挥发性成分,其中21种具有气味活性.在°Brix 17.0~22.0范围,成熟度较高的原料所酿酒芳香酯总量下降,但有活性的芳香酯随成熟度变化不大;有活性的高级醇、萜烯醇和去甲类异戊二烯化合物随原料成熟度增加在酒中含量增加,其中°Brix 20.6所酿酒中上述活性香气成分总量最高;呋喃类等其他微量香气成分的含量变化与原料成熟度没有关系.感官分析结果表明,外观和口感质量随原料成熟度的增加,得分增加,而当原料°Brix 20.6时所酿酒香气质量得分最高.结论:在°Brix 17.0~22.0范围,昌黎赤霞珠葡萄在成熟度°Brix 20.6时所酿酒中活性香气成分最多,香气感官质量最佳.
模式生物在遗传学发展中具有十分重要的作用,在高校本科遗传学教学中必须重视模式生物的应用.介绍了大肠杆菌、酿酒酵母、秀丽隐杆线虫、黑腹果蝇、拟南芥、小鼠等重要的模式生物,并探讨了在遗传学理论教学和实验教学中开展模式生物教学的方式.
本发明公开了用于白酒酿造的搅拌装置,包括机架和搅拌筒,机架上设有电机,搅拌筒安装在电机的输出轴上,机架上滑动连接有升降板,升降板和机架之间连接有用于升降板上、下滑动的驱动机构,升降板上滑动连接有底座,搅拌筒转动连接在底座上,底座和升降板之间连接第一弹簧,电机滑动连接在底座上,底座的一侧设置有固定板,搅拌筒的一侧设有凸块,凸块与固定板配合相抵,升降板上还连接有用于对搅拌筒内通气的输气装置;与现有技术相比,本方案可使搅拌筒进行纵向、轴向平移,并通过输气装置可对搅拌筒内的物料进行吹散,更易打破物料的离心平衡,使得物料搅拌的更加充分,明显增强搅拌效果,提升了搅拌效率。
为了异源合成抗疟疾药物青蒿素重要前体青蒿二烯,以酿酒酵母作为底盘细胞,利用基因工程手段构建功能人工酵母细胞。为提高基因拷贝数,并增加重组菌株基因型的稳定性,选择酵母基因组中多拷贝位点 Delta 为整合点,实现酿酒酵母内源基因tHMGR和ERG20的过表达以及外源基因ADS的整合。过表达tHMGR和ERG20基因增加了酵母体内半萜类物质共同前体法尼基焦磷酸FPP的积累量;而导入外源基因ADS,实现了酵母生产青蒿二烯。经过摇瓶发酵优化实验,人工酵母菌株青蒿二烯产量为225.3 mg·L?1;为了进一步提高青蒿二烯产量,经过发酵过程优化和补料策略,人工酵母菌株在5 L发酵罐中青蒿二烯产量达到1.05 g·L?1。

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