重组质粒pYES-GFP mRNA在动物细胞中表达的研究

目的 提取重组酿酒酵母 mRNA,并对动物细胞进行转染,为进一步探索证明重组酿酒酵母 mRNA可以作为基因治疗物质提供依据.方法 利用酶法制备重组酿酒酵母的原生质体后提取其总RNA.对提取的总RNA纯化后利用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增,鉴定GFP基因的正确无误后,脂质体转染绿猴肾细胞COS-7.在光显微镜下观察绿色荧光的发生.结果 成功制备重组酿酒酵母原生质体,克隆鉴定基因片段正确.转染细胞后有绿色荧光出现,能够表达目标基因.结论 成功制备了重组酿酒酵母原生质体,提取的mRNA能够在动物细胞中表达.证实重组酿酒酵母 mRNA可以作为基因治疗物质,能达到基因治疗的目的 .
法国蓝是奥地利主栽酿酒葡萄品种,1998年我们从山东省引进.在辽宁省各地试栽表现为:果穗歧肩圆锥形,平均穗重279.5 g,果粒近圆形,平均粒重2.5 g,蓝紫色或蓝黑色;果肉黄绿色,肉质致密,汁液多,有淡青草香味,风味酸甜;可溶性固形物含量、总糖含量、单宁含量分别为18.30%、17.20%、0.08%,可滴定酸含量0.71%;在辽宁熊岳,果实9月中旬成熟;酿制的干红葡萄酒深宝石红色,香气浓郁,入口饱满,是酿造干红、甜红葡萄酒优良品种.
以鲜奶为主要原料,通过发酵试验和感官评定,筛选出发酵风味好的菌株,探究奶啤饮料的工艺配方并进行奶啤稳定性研究.结果表明:利用啤酒酵母发酵,奶啤风味最好;当酵母接种量为4%,蔗糖添加量为8%,发酵温度为30℃,发酵时间为15 h时生产的奶啤饮料风味最佳,而当CMC添加量为0.5%,黄原胶添加量为0.2%时,稳定性较好.
用计算代谢通量的方法研究酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)在高盐胁迫条件下的生理代谢. 结果表明, 在盐胁迫条件下, 胞外海藻糖、甘油、乙醇和乳酸的质量浓度分别较常规培养条件下提高了24.44%,60.89%,23.32%和26.76%, 而柠檬酸、 琥珀酸和苹果酸的质量浓度分别较常规培养条件下降低了82.11%,50.37%和53.33%. 代谢通量分析表明, 在盐胁迫培养条件下糖酵解途径各支路的代谢产物通量均有所增加, 而TCA循环中各代谢产物的通量均有所减少.
以酿酒干酵母为原料,在适量甲醇和氢氧化钾溶液中,95℃水浴皂化回流2.5h,用有机溶剂乙醚萃取麦角甾醇,减压浓缩富集.4～-7 ℃缓慢降温结晶,获得麦角甾醇粗品,产率为1.11%.将麦角甾醇粗品溶解于乙醚溶剂中,重结晶得到纯度较高的麦角甾醇晶体,平均产率为0.69%,提取率可达62.58%.采用电子扫描显微镜对恒温结晶和降温结晶得到的晶体进行晶貌观察,利用红外光谱法进行麦角甾醇的结构表征.
本实用新型公开了一种新型白酒输送结构，其特征是：将所述过滤机设置为横卧式结构；且所述过滤机中出酒管道的液位低于所述酒罐中出酒管道的液位，在过滤机的前端顶部设置有排气阀。本实用新型能杜绝因使用电气设备而存在的安全隐患，节约成本，提高工作效率。