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新疆伊犁地区发酵驼乳中酵母菌多样性分析

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-08 阅读:519
从新疆伊犁地区采集到12份发酵驼乳样品,用传统分离培养方法从中分离出35株酵母菌.通过生化鉴定结合形态观察,结果显示:8株为马克斯克鲁维酵母;15株属于单胞酿酒酵母菌;9株林德纳克勒克酵母;2株酿酒酵母;1株白地霉,其中单胞酿酒酵母菌是优势菌属.通过样品酵母菌26S rDNA基因D1区DGGE图谱的优势条带有12条;样品间酵母菌种群结构相似性系数范围21.9%~73.9%;Shannon-Wiener指数在1.92~3.41之间,丰度S值在10~34;在40%水平上样品聚为4类.酵母群落组成主要包括马克斯克鲁维酵母、酿酒酵母、单胞酿酒酵母菌、解脂耶氏酵母和白地霉等.
对酿酒葡萄品种赤霞珠果皮色素提取工艺进行研究,得到色素提取的最佳工艺:葡萄果皮在滤纸上吸干10 min,以100 mL盐酸-乙醇(15:85)混合液为提取剂,浸提时间为30 min,能最大限度的浸提葡萄皮中的色素,充分表现葡萄的着色情况.
[目的]了解外引啤酒大麦品种在河西地区的种植表现.[方法]在甘肃省武威黄羊试验站安排了一组品比试验对外引啤酒大麦品种和当地主栽品种的主要生物学性状、产量及主要品质性状进行比较.[结果]与当地主栽品种甘啤4号相比,有8个品种增产,2个品种减产;品种SCARLETT、Pasadena、KH LEDI的增产幅度达到10%,并且其蛋白质、筛选率都达到了国家优级标准. [结论] SCARLETT、Pasadena、KH LEDI等品种在甘肃河西地区气候及土壤条件下表现优良,适宜推广种植.
[目的]研究从淋浆水中提取SOD酶的工艺条件.[方法]以陕西太白酒厂酿酒后的淋浆水为材料,比较甲苯、异丙醇和乙醇-氯仿3种有机溶剂从淋浆水中提取SOD粗酶液的效果,研究温度和pH对SOD酶活力的影响以及不同异丙醇浓度对SOD提取的影响,采用丙酮2次沉淀对SOD进行分离纯化,并采用H2O2和乙醇-氯仿对样品SOD酶类型进行敏感性鉴定.[结果]试验确定以80%的异丙醇为最佳粗酶液提取条件.丙酮2次沉淀得到纯化的SOD产品,其酶比活为1 026 U/mg,酶回收率达65.2%.该酶经H2O2和乙醇-氯仿敏感性鉴定为Cu·Zn-SOD,对热和酸碱度具有一定稳定性,在50℃以下,酶相对活性保持在91.2% ~ 100%,pH为3.0~10.0时SOD活性保持在74.1% ~93.6%.[结论]该提取工艺过程简便,易操作,是较为理想的从淋浆水中提取SOD的工艺.
为考察酿酒废水-微藻培育耦合体系的最适磷营养条件,对莱茵衣藻、二形栅藻在单一培养和共培养条件下的生长状况进行了观察,并剖析了对酿酒废水中营养盐的吸收去除效率.采用控制变量法对酿酒废水总磷浓度进行调控,研究了不同磷浓度对微藻的干重、比生长速率、蛋白质含量,以及对总氮(total nitrogen,TN)、总磷(total phosphorus,TP)、化学需氧量(chemical oxygen demand,COD)去除量和去除效率的影响.研究结果表明:莱茵衣藻对磷需求总体上大于二形栅藻对磷需求,当初始总磷浓度为16.40 mg/L,初始氮磷比为2.45时,莱茵衣藻最终生物量达到839.50 mg/L,藻蛋白含量达到53.37 mg/L,对TN、TP、COD的去除率分别为93.48%、91.75%、67.90%;二形栅藻生物量最高达到650.00 mg/L,藻蛋白含量达到131.04 mg/L,对TN、TP、COD的去除率分别为95.76%、73.93%、83.43%;而两种藻在共培养条件下,其生长曲线处于单一培养两种微藻下的生长曲线之间,TP、TN的去除率分别为83.66%、95.24%,COD的去除规律与二形栅藻类似.研究发现酿酒废水-微藻培育耦合体系,无论是单一还是共培养体系,酿酒废水总体均能达到地表水环境质量标准(GB3838—2002)的Ⅳ类水总磷要求.
结合计算机技术和生物信息学的方法,采用组合的信号肽分析软件SignalP v3.0、TargetP v1.01、Big-PI predictor和TMHMM v2.0对已公布的6 700个酿酒酵母(Saccaromyces cerevieiae)基因的N-端氨基酸序列进行信号肽分析,同时系统分析了信号肽的类型及结构.结果表明,在6 700个酿酒酵母蛋白中,163个为Sec-信号肽分泌蛋白,经Sec途径分泌.在163个分泌蛋白中,有47个的信号肽没有典型的N-区,仅有H-区和C-区,其余116个分泌蛋白的信号肽包含完整的3个区,即N-区、H-区和C-区.比较了酿酒酵母与白假丝酵母菌(Candida albicans)分泌蛋白信号肽的氨基酸组成顺序,表明酿酒酵母与白假丝酵母菌的信号肽的氨基酸组成和顺序差异很大,两者信号肽长度分布范围、氨基酸种类及其出现频率大体一致.在酿酒酵母分泌蛋白中出现了少数氨基酸组成完全一致的信号肽,为进一步确认具有相同信号肽的分泌蛋白是否具有同源性,分别采用BLAST 2 SEQUENECES 和CLUSTAL W 对具有相同信号肽的分泌蛋白进行了序列比对.结果表明具有相同信号肽的分泌蛋白同源性非常高,氨基酸组成也非常保守.由此可以推断,编码这些分泌蛋白的基因属于旁系同源基因(paralogous).酿酒酵母作为一种模式生物,以其诸多的优点,被认为是表达真核外源蛋白的首选宿主.对酿酒酵母进行基因组水平的分泌蛋白及信号肽结构的分析,可更好地利用该宿主表达分泌型的外源蛋白研究提供参考信息.

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