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绿色木霉AS3.3711的葡聚糖内切酶Ⅴ基因的克隆与表达

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-09 阅读:557
采用RT-PCR方法克隆到绿色木霉(Trichoderma viride)AS3.3711的葡聚糖内切酶Ⅴ(EGⅤ)的cDNA 基因.测序后构建到酿酒酵母诱导型表达载体pYES2 上,转化酿酒酵母,同时研究了超声波处理对酵母完整细胞转化的影响.转化子用2%的β-D-半乳糖进行诱导,用Northern 杂交和CMC糖化力法分别对目的基因的转录和表达产物的葡聚糖内切酶活性进行检测.结果表明, EGⅤ的cDNA 基因开放阅读框长度为741bp,编码247个氨基酸,推测的蛋白质分子量为24.99kDa.超声波处理60s的酿酒酵母的转化率最高,在相同条件下是未处理组的2倍.酶活检测显示该基因能在酿酒酵母中表达并分泌到胞外.发酵液中的酶活在培养60小时达到最高0.046U/ml.最适酶解温度为60℃,最适pH值为5.4.
对乳酸链球菌和酿酒酵母菌进行混合培养发酵,通过讨论溶氧、温度、pH值、接种量、接种比例和培养基对其发酵结束时活菌数的影响,确定两种菌在前期28℃摇床150 r/min培养24 h,后期37℃静置24 h,初始pH为7.5,接种量为0.5%,接种比例乳酸菌∶酵母菌为1%∶0.5%,培养基为YEPD时,两者的活菌数水平达到最高值,乳酸菌达5.0×10 CFU/mL,酵母菌达1.0×108 CFU/mL。8
《无机及分析化学》是酿酒专业类学生必修的一门专业平台课程,承担着培养学生掌握化学基本理论、化学实验操作技能,并为学生进一步学习后续专业知识奠定基础和提升专业能力等任务.目前存在教学内容繁多、教学方法传统、课程考核体系单一、理论与实践联系不够紧密等问题.以酿酒专业人才培养方案和要求为目标,通过优化教学内容、丰富教学方法、改革课程考核模式、加强实践实验环节等教改措施的实施,取得了良好的教学效果,促进了酿酒专业类无机及分析化学课程教学体系建设和教学质量的提高.
介绍间隙式活性污泥法(SBR工艺)处理啤酒生产废水.当废水COD(Cr)值在800~2500mg/L时,经SBR工艺生化处理后的出水达到GB8978-1996<污水综合排放标准>的要求.该工艺具有工作性能稳定、操作简便、节省投资等良好效果.
龙紫宝是桓仁地区2011年从河北科技示范学院引进试栽的红色酿酒葡萄品种,经过5年观察表明,该品种表现生长良好,抗寒性强,果实品质优良,可溶性固形物含量23%,总酸含量6.54g/L,相比当地山葡萄品种具有酸度低、香气浓郁的特点,定植第3年666.7m2产量达961kg.可作为桓仁地区酿造高品质干红葡萄酒的品种.
本发明涉及一种多粮小曲清香型白酒酿造方法,属于白酒酿造技术领域。该酿造方法包括配料、浸泡、初蒸、焖水、复蒸、摊粮、下曲和入箱、糖化、蒸馏以及陈酿九大步骤,本发明多粮小曲清香型白酒是在传统多粮清香型白酒的酿造方法上,主要增添二次培菌糖化和特殊的陈酿法。它改变了传统酿造白酒的口感,使原来燥辣、偏苦的味道变得香气清新淡雅,口感绵甜醇厚,回味悠长怡畅,清香纯正柔和。本发明中二次培菌糖化充分提炼了粮食里的精华,提高了白酒的产量和品质,节省了资源,大大提高了经济效益,易于推广应用。

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