液态法大曲酒发酵过程中高级醇影响因素的研究

高级醇含量高是制约液态法白酒发展的主要因素之一.为了降低液态法白酒中高级醇含量,本研究在传统液态法白酒发酵工艺的基础上,采用酵母、酶制剂和大曲协同发酵生产液态法白酒.系统地研究了酿酒原料、酵母菌种、酵母接种量、酶制剂(糖化酶、酸性蛋白酶)用量、酵母与大曲用量对液态法大曲酒中高级醇含量的影响.结果表明:酵母菌种、酵母接种量、酸性蛋白酶用量和大曲用量对液态法大曲酒发酵过程中高级醇含量影响较大,而酿酒原料和糖化酶用量对液态法大曲酒高级醇含量的影响相对较小.从酵母菌种看,酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)A-3产高级醇总量最高(512.82 mg/L),酿酒酵母A-2产高级醇总量最低(441.51 mg/L),二者相差71.31 mg/L;随着酵母接种量从2×106 mL-1增加到12×106 mL-1,高级醇总量从376.52 mg/L增加到444.64 mg/L;酸性蛋白酶的用量为4 U/g时,高级醇总量为431.29 mg/L,比对照下降7.80％;大曲用量为原料的40％时,高级醇总量为207.73 mg/L,比对照下降59.98％.在优化后的条件下发酵,高级醇总量对比初始发酵条件降低了52.18％.
华润啤酒有限公司排放的啤酒废水采用内循环水解好氧工艺进行处理,处理后出水达到国家污水综合排放标准(GB8978-1996).内循环水解酸化好氧工艺啤酒废水的运行效果分析表明,本工艺具有占地面积小,设备简单,出水水质好,剩余污泥少等特点.
本文利用电子自旋技术(ESR)考察了啤酒酿造各阶段,包括糖化、煮沸、发酵、过滤中自由基的形成与变化情况.发现煮沸阶段产生自由基最多,发酵阶段自由基含量有所下降,但过滤后又上升.发酵前后啤酒(麦汁)的曲线形态截然不同,说明麦汁所含抗氧化剂(自由基清除剂)种类与发酵后的啤酒不同,前者作用持久,主要在培育后期抑制自由基生成,后者作用迅速,主要在培育初期发挥清除自由基作用.糖化阶段发现的未报道过的新型自由基(暂名FR1)与·OH的形成和数量有密切关系.
研究人类基因4-羟苯丙酮酸二加氧酶(4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase,HPD)的表达对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)产孢过程及酵母孢子壁组装的影响.将HPD导入酿酒酵母中,比较人源化HPD酵母与野生型酵母的表型差异,分析HPD对酵母产孢及孢子壁的影响.与野生型酵母相比,人源化HPD酵母对产孢率无影响,但孢子自身荧光强度下降,乙醚敏感性增加,荧光增白剂(calcofluor white,CFW)染色荧光强度增强,该结果表明孢子壁出现缺陷,其二酪氨酸层组装过程中部分缺失.进一步研究发现,人源化HPD酵母产孢时,Hpd蛋白的催化产物尿黑酸(homogentisate,HGA)在产孢过程中会被氧化从而引起培养基颜色变化,且二酪氨酸复合物会大量泄漏至培养基中,最终导致二酪氨酸层不能正确组装.该研究结果为酿酒酵母二酪氨酸层的形成机制提供了新的认知.
本发明提供一种弱碱性白酒及其生产方法。其中弱碱性白酒外观无色透明或微黄透明，香气幽雅，口味纯净，pH值为7.0~8.5，制酸指数≤3.5，总有机酸根含量≤10mmol/L。生产方法为：以半成品或成品白酒为原料，采用蒸馏的方法部分或全部去除白酒中的酸类物质，从而降低原料酒的酸度，提高原料酒的pH值；然后采用pH值＞7.0的弱碱性饮用水降度，使酒体pH调整到值7.0~8.5，呈现弱碱性。本发明提供了一种新的弱碱性白酒及其生产方法。
乙酸是木质纤维素水解液中含量较多的抑制物,因此提高酿酒酵母菌株对乙酸的耐受性有助于提高纤维素乙醇生产效率.本文中,笔者利用基于CRISPR/Cas9系统的基因组编辑技术过表达了酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)S288c线粒体核糖体蛋白编码基因MRP8,并比较了过表达MRP8的菌株与对照菌株的生长和发酵特性.平板耐性检测发现,MRP8过表达明显提高了菌株的乙酸胁迫耐受性;乙醇发酵结果表明,在4.8 g/L乙酸胁迫条件下,过表达菌株MRP8-3在51 h消耗全部的葡萄糖,发酵时间缩短了25 h,显著优于相同时间的对照菌株.本研究结果为构建高效纤维素乙醇发酵的酿酒酵母菌株提供了新思路.