利用酵母建立植物抗逆基因快速筛选体系

以旱柳Salix matsudana及东南景天Sedum alfredii为实验材料,利用改进的SMART(switching mechanism at 5'end of RNA transcript)技术分别构建了旱柳盐胁迫和东南景天氯化镉胁迫后的全长cDNA文库,把文库包装到酵母表达载体中,转化酿酒酵母感受态细胞,通过在尿嘧啶缺陷型培养基上添加不同浓度梯度的筛选压来筛选酵母高抗转化子,并对其基因进行鉴定.结果从旱柳盐胁迫全长cDNA文库中得到了2个能耐受1.709 mol·L-1氯化钠的阳性转化子,从东南景天氯化镉胁迫全长cDNA丈库中得到了2个能耐受0.123 mmol·L-1氯化镉的阳性转化子.分别测定对照菌(转空载体重组菌INV/p YES2.1)和转cDNA重组菌在无胁迫、高盐(1 mol·L-1氯化钠)和高氯化镉(150 μmol·L-1)胁迫下的生长曲线.结果表明高耐盐/耐镉相关基因的表达对酵母正常生长没有影响.在含高盐或者高镉的培养基里,2个转基因重组菌的延滞期短于对照菌.这表明高耐盐/耐镉相关基因的表达可以提高酵母细胞的耐盐/耐镉能力.对6号耐盐转化子序列进行生物信息学和表达模式分析,发现该基因为一盐胁迫应答相关基因SMpla6(暂定名).用酿酒酵母建立了一个高效快速筛选植物抗逆基因的体系,研究结果为快速克隆植物抗逆相关基因奠定基础.
FZF1基因在酿酒酵母中对亚硫酸盐转运蛋白编码基因SSU1具有正向调节作用,但在贝酵母中尚无相关报道,本研究拟通过对该基因进行克隆和生物信息学分析为后续研究做出参考.首先对贝酵母FZF1基因进行克隆,并利用在线分析工具ProtParam、ProtScale、TMHMM、PredictProtein、Swiss-Model等软件对其编码蛋白质的基本理化性质进行分析,同时预测了该基因所编码蛋白质的二级结构和三级结构.结果表明:该核苷酸序列含有一个长900 bp的开放阅读框,可编码299个氨基酸;编码的蛋白质为在细胞核中行使调控功能的亲水蛋白,含有18个丝氨酸(S)激酶潜在磷酸化位点、一个Coil区和4个锌指结构域,与酿酒酵母FZF1基因所编码的蛋白质结构和性质极为相似.可初步认为贝酵母FZF1基因与细胞的耐硫性相关;而贝酵母FZF1基因所编码的蛋白质中仅有4个锌指,则可能是贝酵母硫耐受能力比酿酒酵母弱的重要原因.
本发明公开了白酒加工领域内的一种白酒的加工工艺，包括以取新鲜榴莲，将果壳、果肉、果核分离，将果壳、果核粉碎后混合成基料，将果肉冻干后粉碎得榴莲末；取新鲜山竹，分离果壳、果肉，将山竹果壳一半粉碎成末一半制成活性炭粉末后混合得滤材，将山竹果肉粉碎制得果酱；将基料、果酱与高粱混合发酵后经蒸馏得到基酒和酒醅；将榴莲末加水搅拌均匀后用超声震荡处理；将步骤Ｄ中超声处理后的溶液用脱硫剂和滤材过滤得到榴莲液；将榴莲液与酒醅混合发酵后进行蒸馏得到辅酒；将基酒与辅酒按质量比3～4.5:1进行混合制得榴莲风味白酒。采用本方案制得的白酒既具有良好的榴莲风味口感，同时含有的硫化合物量低，饮用后无燥热感，不会伤害身体。
为揭示调理啤酒鲈鱼片气调包装和微冻贮藏过程中的微生物变化规律及其腐败本质,为优化产品工艺和推广产品提供理论依据,采用Illumina MiSeq测序技术解析调理啤酒鲈鱼制品气调包装和-3℃贮藏过程中微生物群落多样性,并比较其与真空包装4℃贮藏鲈鱼片的微生物群落多样性的区别.结果 表明:鲈鱼制品在贮藏过程中的优势微生物为厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes);真空包装的未调味鲈鱼片在4℃贮藏过程中微生物多样性比在-3℃贮藏的气调包装调理啤酒鲈鱼丰富,且在贮藏第4天时,开始出现了索丝菌属(Brochothrix)等常见的腐败微生物,到第10天时,索丝菌属、假单胞菌属(Pseudomonas)丰度迅速增大,出现了希瓦氏菌属(Shewanella),造成鲈鱼片彻底腐败变质;气调包装的调理啤酒鲈鱼片在第20天时才开始出现假单胞菌属和希瓦氏菌属等腐败菌,之后在CO2的抑制作用下,腐败菌丰度逐渐减小,直到货架期终点时,假单胞菌才迅速增长,且出现了嗜冷杆菌属(Psychrobacte),造成了鲈鱼制品的彻底腐败变质.这说明气调包装联合啤酒调理的加工方式及-3℃贮藏可以有效延长产品的货架期.
本发明公开了一种复合香型白酒的酿造生产工艺，本工艺是浓香、清香、芝麻香白酒生产工艺的融合与调整，采用了复粮酿造、泥池老窖、清蒸续渣、通风堆积、大麸结合、分层起糟、分层馏酒等生产工艺，所产复合香型白酒经分类摘酒、分别储存、精心勾兑而成。本发明工艺方法生产的这种复合香型白酒，具有芝麻香型白酒的“芝麻焦香”，兼有浓香型白酒的“绵甜爽净”，又有清香型白酒的“清净典雅”等优点，满足了以市场和消费者为主体的香型融合需求。
在传统发酵工艺难以满足现代工程需要的前提下,人们以穷尽一切办法用以深入酿造工业的进一步发展.超声作为一种重要的物理因子,具有较高的研究价值,广泛的应用也证明此物理因子的可靠性.文章首先介绍了超声波作用及其检测功能的物理机制;并重点介绍了超声技术在酿酒发酵业如超声发酵、超声发酵产物分离、超声生产在线检测、超声催熟等中的应用.最后,结合现有超声理论的研究现况及其在酿酒工业中的生产线应用成果,对超声波及其检测技术在酿酒工业中的应用研究方向提出了指导性的建议.