拟南芥MPK3、MPK4、MPK6在酵母hog1Δ中的渗透调节作用

[目的]研究拟南芥MAPK信号转导途径的关键基因MP3、MPK4、MPK6的功能,明确其在渗透调节中的作用.[方法]构建拟南芥MPK3、MPK4、MPK6的酿酒酵母表达载体,遗传转化酿酒酵母渗透调节功能丧失的hog1Δ突变体,筛选得到阳性转化子,并分析其在渗透胁迫下的表型特征.[结果]扩增得到了拟南芥MPK3、MPK4、MPK6的全长cDNA序列,构建了上述3个基因的表达载体,并筛选得到了3个基因的阳性转化子.在1 mol·L-1 KCl、0.3 mol·L-1 LiCl、1 mol·L-1 NaCl、1 mol·L-1 Sorbitol的盐胁迫处理下,阳性转化子生长状态良好,与野生型的表型基本一致,均恢复了hog1Δ对盐胁迫的抗性.在盐胁迫处理下,hog1Δ细胞形态异常且体内甘油含量较野生型低,而转化子的形态和体内甘油含量均恢复到正常的表型.[结论]MPK3、MPK4、MPK6均能够使酿酒酵母渗透调节功能丧失突变体hog1Δ恢复对盐胁迫的抗性,具有渗透调节的功能.
本发明涉及一种小曲糖化大曲发酵白酒工艺，它属于生物酿造技术领域。本发明包括的步骤是原料、泡粮、初蒸、喷烟水、复蒸、出甑摊凉、加小曲、培菌糖化、配槽加大曲、入窑发酵和蒸馏。本发明生产工艺简单，酒质优，香气口感好，产量稳定，提高了效率，降低了产酒成本。
采用酶法酶解啤酒糟(Brewer's spent grain,BSG)制备得到阿魏酰低聚糖(Feruloyl oligosaccharides,FOs),并对其组成及抗氧化性质进行测定.结果 表明,FOs中键合态阿魏酸含量为3.06％ (w/w),总糖含量为65.50％ (w/w),单糖主要为木糖和阿拉伯糖,FOs固体样品经紫外光谱分析和红外光谱分析为糖酯类物质;FOs对羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基均具有良好的清除能力,且还原力都优于阿魏酸和低聚木糖.在8 mg/mL时,对羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别为79.40％、84.40％和59.40％,还原力为1.22.
酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)配对反应是由异三聚体鸟苷酸结合蛋白和有丝分裂原蛋白激酶(mitogen activated protein kinase, MAPK)级联放大反应介导的.虽然由它们介导的信号转导途径已基本探明,但受体水平的下调机制尚不清楚.酵母中交配信息素应答G蛋白的α亚单位,即Gpa1,在信号转导过程中作用备受关注.笔者综述了Gpa1在酿酒酵母配对反应信号转导中作用机制的研究进展.
分别用正硅酸乙酯(TEOS)和Na2SiO3为硅源培养真核啤酒酵母、近似内孢霉酵母和黑根霉菌,进行纳米SiO2的生物沉积实验,对沉积的SiO2采用SEM、TEM、EDX、ED等测试技术进行表征. 结果表明,(1)啤酒酵母沉积颗粒状SiO2纳米粒子;(2)近似内孢霉酵母沉积壳鞘状的SiO2纳米结构;(3)黑根霉菌沉积管状的SiO2纳米结构;(4)真核微生物既能利用TEOS也可以利用Na2SiO3进行矿化. 说明真核微生物矿化与模板组成、表面张力、空间结构及硅营养等因素有关,为利用真核微生物矿化材料提供了有益信息.
为筛选出一株适合菠萝蜜果浆发酵的酿酒酵母,提高菠萝蜜酒的酒精度和品质,以菠萝蜜为发酵原料,通过富集培养和分离纯化,三级筛选得出一株适合菠萝蜜果酒发酵的酵母菌菌株并对其进行形态学、生理生化和分子生物学鉴定.结果表明,筛选出的菌株为酵母属的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae).经过性能测定,该酵母菌的最适发酵温度为28～31℃,最适初始糖度为29°Brix,最适pH为5.5,最适SO2添加量为80 mg/L,当初始酒精度为7％时能抑制该酵母菌的生长,初始酒精度为11％时,接近酵母菌酒精度耐受性的极限.经测试发现,该酵母菌的传代稳定性良好,产酒精度稳定在10°左右.此酵母能在高糖度且较高酒精度的胁迫下发酵菠萝蜜果浆,产生具有菠萝蜜特征香气的酒,可作为改良驯化及菠萝蜜果酒发酵菌种.