黄酒酵母优良抗逆菌株的筛选、鉴定及发酵特性研究

从黄酒厂的麦曲、酒药、发酵醪中分离到52株菌株,通过比较这些菌株的耐乙醇和渗透压的能力,筛选出抗逆性强的菌株F-18.通过形态学、生理生化和rDNA ITS序列的系统发育分析,鉴定分离筛选到的菌株F-18为酿酒酵母,其进化关系与另两株分离自台湾与北京地区的酿酒酵母菌最近,表明它们之间可能有共同的地域起源.黄酒发酵试验结果表明:菌株F-18的起酵速度快,对糖的转化利用能力高,黄酒中总酸、高级醇等含量适中.菌株F-18为酿造优质黄酒的酵母菌株,具有进一步开发利用的价值.
文章旨在探索核因子-κB (NF-κB)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)通路是否介导益生性酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)诱导绵羊瘤胃上皮细胞(RECs)β-防御素-1(SBD-1)基因的转录.首先建立绵羊RECs培养体系作为体外试验模型,选用诱导SBD-1转录最高的菌液浓度和诱导培养时间进行信号通路初步研究,采用实时荧光定量逆转录PCR (RT-qPCR)对已建立的诱导SBD-1转录模型中的细胞膜受体——Toll样受体2(TLR2)、信号衔接蛋白——髓样分化因子(MyD88)以及NF-κB和MAPKs通路中的相关因子基因转录变化进行检测;然后选用NF-κB和MAPKs通路中的4种特异性抑制剂(即NF-κB通路特异性抑制剂PDTC、P38通路特异性抑制剂SB202190、ERK 1/2通路特异性抑制剂PD98059、JNK通路特异性抑制剂SP600125)通过单独或相互组合处理细胞后再进行诱导培养,同时采用RT-qPCR的方法检测用抑制剂处理绵羊RECs后SBD-1 mRNA的转录水平.结果表明:酿酒酵母菌刺激RECs后,NF-κB和MAPKs通路中各因子NF-κB、P38、JNK、ERK1/2、细胞膜受体TLR2与信号衔接蛋白MyD88的mRNA水平与未刺激组相比均有所升高,且呈显著性差异(P＜0.01或P＜0.05);通过单独或组合添加抑制剂后再诱导,均发现特异性抑制剂PDTC、SB202190、SP600125、PD98059可极显著抑制酿酒酵母菌对RECs SBD-1的上调作用(P＜0.01),且P38通路特异性抑制剂SB202190的抑制效果最明显.结果提示,酿酒酵母菌诱导绵羊RECs SBD-1的转录可能与TLR2-MyD88-NF-κB/MAPKs通路有关,但以TLR2-MyD88-MAPKs中的TLR2-MyD88 P38通路为主要的信号通路.
研究加工苹果品种的多酚组成及其抗氧化功能,有助于加工原料的选择和功能性食品的开发.测定了4个酿酒品种和4个制汁品种果实的多酚组成,果实多酚提取物清除超氧阴离子自由基、羟基自由基能力和抗脂质过氧化能力.结果表明,供试加工品种总酚含量为644.9～3511.8 mg/kg,原花青素、绿原酸、表儿茶素、儿茶素是果实中的主要多酚物质.各品种多酚提取物都有一定的抗氧化能力,以稀释10倍的浓度清除3种自由基的能力较强.原花青素、儿茶素与加工苹果果实抗氧化能力有较密切的关系.
ω-3脂肪酸脱饱和酶催化ω-6多不饱和脂肪酸(PUFAs)转化为ω-3 PUFAs,对ω-3长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFAs)的合成至关重要.为了实现在常温下发酵生产ω-3 LC-PUFAs(主要是二十碳五烯酸,EPA),根据现有常温下偏好催化20C PUFAs的ω-3脂肪酸脱饱和酶序列,从GenBank数据库筛选出与之高度相似的序列并进行生物信息学分析.为了确定序列的生物活性,进一步在酿酒酵母系统中进行重组表达,通过外源添加不同碳链长度的脂肪酸底物,测定重组酿酒酵母转化子在28℃和12℃下对不同脂肪酸的转化率.结果显示,新筛选序列编码的蛋白oAiFADS17既能催化18C PUFAs,又能催化20C PUFAs,尤其偏好催化二十碳四烯酸(AA)转化为EPA.oAiFADS17蛋白在28℃下对各种底物的转化率均高于12℃下的转化率,其中对AA的转化率达到46.3％.该研究成功测定了oAiFADS17蛋白对不同脂肪酸底物的转化率,得到了一种新的常温偏好催化20CPUFAs的ω-3脂肪酸脱饱和酶,为构建高产EPA的基因工程菌株及EPA的工业化生产奠定了理论基础.
本实用新型涉及一种白酒存储库房，包括外墙体、装设在外墙体上的第一通风窗、组设在外墙体角落的通风角墙、由外墙体围设形成的存储空间及装设在所述通风角墙上的第二通风窗，所述通风角墙与外墙体围设形成通风角室，所述外墙体呈蜿蜒状设置且所述通风角墙呈圆弧形设置，所述白酒存储库房依靠自然通风且通风良好。
建立了用液相荧光色谱法(LC-FLU)测定啤酒中甲醛的新方法.简化了样品前处理过程.前处理条件经过优化为乙酰丙酮加量30%,衍生水浴温度80℃,加热时间10 min.荧光衍生物3,5-二乙酰-1,4-二氢吡啶在激发波长419.4 nm和发射波长505.5 nm处产生特征性荧光,利用LC-FLU可以进行直接检测.同时采用母离子m/z 194和子离子m/z 152,176对甲醛的荧光衍生物进行了LC-MS-MS结构确证.结果表明,本法消除了啤酒中基质的干扰,无需复杂的样品前处理过程,简便、快速,灵敏度高,相对标准偏差小于7%,回收率77.0～107.0%,定量限0.005 mg/L.该方法已应用于啤酒中甲醛含量的测定.