一种高效快速鉴定酵母转化子的酵母菌落PCR方法

酵母是一种重要的基因工程宿主菌,但是由于其细胞壁结构复杂牢固,普通的菌落PCR方法的成功率较低.为解决此问题,提供一种快速、简单、高效的酵母菌落PCR方法.该方法先利用溶壁酶溶解酵母细胞壁,然后利用热涨裂解细胞并进行PCR反应.此方法将酵母细胞裂解和PCR在同一个PCR管中完成.试验结果显示此方法能成功扩增目的基因且成功率高.将此方法应用于外源性内切葡聚糖酶(endoglucanase,EG)的酿酒酵母转化子筛选,经与基因组PCR比较,菌落PCR与基因组PCR结果一致.结果证明此方法具有良好的稳定性,适用于酿酒酵母转化子的快速筛选.
本试验采用人工模拟阴雨天气的方法研究二种干燥方法即晴天收获晒干和阴雨天收获35℃烘干对啤酒大麦品种浙农大6号和浙农大7号种子发芽力影响.试验结果表明:2个品种均表现为35℃烘干下种子发芽率较低,分别为65.3%和65.7%,并且与晴天收获晒干呈显著性差异;与低发芽率相对应的35℃烘干种子霉烂率较高,2个品种分别为29.3%和26.7%;种子活力指数浙农大6号品种也表现为35℃烘干较低为54.66;而浙农大7号品种二种干燥方法对活力指数影响不明显;与种子活力相对应的2个品种二种干燥方法的电导率差异均不明显,而α-淀粉酶活性2个品种均以35℃烘干为较低.
将酿酒酵母转录激活因子Msn4基因置于组成型强启动子PGK下,构建重组整合表达质粒YPKR-Msn4,rDNA介导整合到受体菌酵母工业菌株Y49的染色体中,筛选得到酿酒酵母菌YM-27.该菌过量表达酿酒酵母转录激活因子Msn4基因,乙醇耐受性有较大提高.构建的酿酒酵母工程菌运用在木薯乙醇工业生产中,可克服浓醪发酵中后期酵母菌受高浓度乙醇抑制而发酵活力不足的问题,可应用于乙醇浓醪发酵,为进一步构建具有高潜能的优良菌株奠定基础.
为筛选适合火龙果酒酿造的酵母菌株,从多种浆果表面分离获得200株酵母菌株,在杜氏小管发酵的基础上,进一步在火龙果汁中发酵筛选出发酵性能好并具有较好香气的菌株.结合风味物质分析及感官品评获得1株起酵速度快且果酒香气浓郁、具有火龙果典型特征香气的菌株194.通过18S rDNA序列比对,鉴定其为酿酒酵母,可用于食品发酵.
本发明公开了一种浓香型白酒及其勾兑方法，该白酒由以下成分的原度酒勾兑而成：单粮浓香优级酒55～65%，五粮浓香优级酒33%～38%，浓香双轮底酒0.5%～1.5%，五粮浓香一级酒0.5%～1.5%，酱香原酒2%～4%，五粮调味酒0.5%～1.5%，%为体积百分百。通过该勾兑方法获得的白酒克服了不同地区白酒消费的思维定势，能让广大消费者都接受，具有香气口感幽雅舒适、饮后不上头、醒酒快、有益健康等功效。
针对目前我国各个啤酒生产企业普遍使用的啤酒瓶验瓶机所存在的主要问题,研究和借鉴国内外同类设备解决由于瓶口歪、瓶子本身发生倾斜等原因造成误剔除的技术基础上,提出以五维位置光电传感器为基础,利用电子技术和计算机软件技术来补偿这一角度误差,消除此类情况下对检测结果的影响,实现降低误剔除率的方法.