沙棘果酒优良酵母菌的筛选及分子生物学鉴定

目的:筛选适合酿造沙棘果酒的优良酿酒酵母,为开发沙棘果酒酵母菌资源提供试验依据.方法:时来自成熟沙棘果皮、果汁自然发酵液以及沙棘果园土壤的酵母菌进行富集培养和划线分离,通过镜检、杜氏管发酵法进行初筛,通过产酒精能力测试、耐性能力测试、发酵力测试、凝聚性比较,进行复筛.通过26S rDNA Dl/D2区序列测定及系统发育分析对所筛选菌株进行分子生物学鉴定.结果:从成熟沙棘果皮、果汁自然发酵液以反沙棘果园土壤中分离出108株酵母菌.经杜氏管发酵,从中初筛出15株发酵性能较好的酵母菌.进一步复筛出1株优良的沙棘果酒酵母Y23.发酵试验结果表明,该酵母菌起酵快,发酵7d即可产酒精10.4%(体积分数).具有沙棘果酒的典型风味.经分子生物学鉴定,筛选酵母菌Y23与酿酒酵母(S.ceretisiae)Y-12632T(AY048154)的遗传距离最近,两者之间的同源性为100%.结论:筛选的酵母菌Y23最适合沙棘果酒的酿造.该菌株被鉴定为酵母属(Saccharomyces)的酿酒酵母(Sacharornyces cerevisiae).
本发明公开了一种香白酒的制备方法，它包含如下步骤：一、酒坛中倒入白酒25千克；二、取成熟仙人球果1.5千克、茵陈草0.5千克、香圆果1.5千克、佛手果1.5千克、木瓜果1.5千克、广柑1.5千克、玉米粒2千克、丝瓜络0.5千克、白果1千克、乌梅1.5千克、绿豆1千克、冰糖5千克，投入白酒中；三、将酒坛密封保存，至少存储三个月；本发明制备工艺简单，制得的白酒具有化瘀祛湿、健胃利胆、清热消暑的功效，对常食油腻饭菜的人，更具有消食保健的作用。
本发明公开了一种白酒酿造工艺，包括泡粮、熟化、吃水、烘干、增香液制备、共发酵、收集产物步骤。本发明采用两种芽孢杆菌共同发酵制备增香液，并将增香液与粮食混合发酵，混合发酵采用的菌种也是由凝结芽孢杆菌和红曲霉1:1混合，因此制备获得的白酒酱香型气味浓郁，口味纯正；此外，本发明所述工艺生产出的白酒中未检测到甲醇和乙酸乙酯。
为了明确影响啤酒大麦籽粒脂氧合酶(LOX-1)活力的参数,以甘啤4号啤酒大麦籽粒为研究对象,采用紫外分光光度法探究底物浓度、提取缓冲液pH、反应体系缓冲液pH提取时间、粗酶加入量:底物加入量等对LOX-1活力的影响.结果表明,LOX-1活力随底物浓度的增加表现为先增加后减小的趋势,当底物浓度达到0.30mmol·L-1时,LOX-l活力显著高于其它处理;随提取缓冲液pH的增加,LOX-1活力表现为双峰变化趋势,且在pH值5.0处,酶活力为9.85U·g-1,显著高于其它处理;粗酶提取时间为30min时,LOX-1活力显著高于其它处理,低于或者高于30min,酶活力均呈现降低趋势;LOX-1活力随反应体系pH的增加,表现为双峰变化趋势,当pH值为6.4时,酶活力最大,且与其它处理间存在显著差异;在其它条件不变,粗酶加入量为50μL的情况下,增加底物加入量,LOX-l活力表现为先增加后减小的趋势,且底物加入量为200.μL时,酶活力显著高于其它处理.最终确定紫外分光光度法的测定参数:粗酶提取时间为30min,底物浓度为0.25mmol·L-1,提取液和反应体系缓冲液分别为pH值5.0醋酸盐缓冲液与pH值6.4磷酸盐缓冲液,粗酶加入酶量:底物加入量为1:4.研究结果为紫外分光光度法在啤酒大麦籽粒LOX-1活力测定中的应用提供了参考.
酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)配对反应是由异三聚体鸟苷酸结合蛋白和有丝分裂原蛋白激酶(mitogen activated protein kinase, MAPK)级联放大反应介导的.虽然由它们介导的信号转导途径已基本探明,但受体水平的下调机制尚不清楚.酵母中交配信息素应答G蛋白的α亚单位,即Gpa1,在信号转导过程中作用备受关注.笔者综述了Gpa1在酿酒酵母配对反应信号转导中作用机制的研究进展.
本发明提供一种白酒相似度三联机分析方法，将白酒样品分别进行高分辨率气相色谱分析、气相色谱/质谱分析、全二维气相色谱/质谱分析；利用气相色谱/质谱分析对白酒组分峰定性，利用高分辨率气相色谱法对白酒组分峰积分结果进行定量分析，再用定量分析结果进行相似度计算，进行不同批次白酒或真假白酒相似度比较判别。本发明所述的白酒相似度三连机分析方法，采用高分辨毛细柱气相色谱分离分析白酒组成，比国标方法分离组分有成倍增长，有更为详细的组成信息。可靠性大大优于传统气相色谱用混合标样定性，能鉴别不同种类白酒独特的成分，用相似度计算方法鉴别真假白酒，结合全二维气相色谱/质谱分析方法，提供了更详细的组分分析。