白蚁内切-β-1,4-葡聚糖酶基因的克隆、表达、纯化及酶学性质的研究

提取了台湾家白蚁总RNA并反转录获得cDNA,PCR扩增出白蚁内切葡聚糖酶的基因,并将目的基因分别克隆到大肠杆菌和酿酒酵母载体中,构建了产内切-β-1,4-葡聚糖酶的基因工程菌.由于大肠杆菌会有少量的泄漏表达,而所用的酿酒酵母表达载体是本实验室构建带有INU信号肽的表达载体,故都可采用刚果红平板染色法筛选具有羧甲基纤维素酶(CMCase)活性的重组转化子.利用金属镍亲和层析对大肠杆菌表达的内切-β-1,4-葡聚糖酶进行纯化,CMC酶活检测显示纯化酶的最适温度和最适pH值分别为42 ℃、6.5;内切-β-1,4-葡聚糖酶的Vmax为0.071 mg/mL·min,Km值为80.2712 mg/mL.
通过单因素和正交试验确定了啤酒花CO2萃余物中总黄酮的最佳提取条件:浸提剂50%乙醇,料液比1:25(g/ml),回流提取温度70℃,提取时间2.5h,在此条件下总黄酮的提取量为68.09mg/g干酒花.抗氧化实验结果显示提取的啤酒花总黄酮对DPPH自由基的清除能力(IC505.73μg/ml)优于抗坏血酸(IC508.79μg/ml)和芦丁(IC50 14.84μg/ml)啤酒花总黄酮的还原力(EC500.158mg/ml),优于芦丁(EC500.252mg/ml),弱于抗坏血酸(EC500.103mg/ml);啤酒花总黄酮对小鼠肝匀浆Fe2++H8O2诱导脂质过氧化产生丙二醛(MDA)的抑制能力(IC500.517mg/ml)优于芦丁(IC500.596mg/ml),表明啤酒花总黄酮具有显著的抗氧化活性.
本发明公开了一种白酒蒸馏冷凝装置及方法，所述蒸馏冷凝装置包括依次连通的第一蒸馏罐，第一冷凝室，第二蒸馏罐，第二冷凝室，出液装置，及第一加热装置，第二加热装置，控制器；所述第一冷凝室及第二冷凝室均包括冷凝板和由冷凝板围成的冷凝腔；所述冷凝板包括上方的上板及下方的下板，所述上板在两个冷凝罐间呈弧形连接，包括设置于后半段的凝集件，所述下板在两个冷凝罐间呈倾斜的直的连接，所述方法包括第一蒸馏罐内的蒸馏温度为55~65℃，第二蒸馏罐内的蒸馏温度为60~70℃。本发明可显著提升白酒生产效率及生产品质。
一种测定白酒中挥发性成分的方法，属于白酒风味分析技术领域。本发明采用搅拌棒吸附萃取技术(SBSE)与气相色谱-质谱联用技术，对白酒中的挥发性成分进行定性和定量分析。本发明建立的方法能够快速检测白酒中的挥发性成分，并能对这些挥发性成分进行定性定量。搅拌棒吸附萃取技术无需有机溶剂，在常温范围内就能完成，避免了分析过程中产生新的化合物，能有效富集挥发性成分；质谱检测技术能快速准确地鉴定出挥发性成分，提高了本方法的准确性。本发明为进一步系统研究白酒中微量成分，对提高白酒品质有重要意义。
利用pH示差法对黑加仑浆果及其果酒花青素的含量进行测定,结果表明花青素的最佳检测条件为:检测波长541 nm,pH 1.0和pH 4.5,平衡时间50 min,样品pH 3.0,此方法精密度和回收率的RSD值分别为1.34％和3.01％,测得果实和果酒中花青素含量分别为2.01 g/L和0.64g/L.通过高效液相色谱和原子吸光光度法对黑加仑果酒的营养成分进行分析,结果表明酒体中共含有17种氨基酸,总量迭1 173.45 mg/L,其中7种必需氨基酸,含量占29.2％;并含有人体所必需的矿质元素,其中K、Ca的含量较高,分别为1 865 mg/L和510.5 mg/L,此外,黑加仑果酒的总酚含量为3.87 g/L.
乙醇浓醪发酵具有高细胞密度、高产物浓度和高生产速率等特点，是乙醇工业的发展目标和方向。采用乙醇浓醪发酵技术，具有节约工艺用水、提高设备利用率、降低能耗等优势，是提高乙醇发酵工业效益的重要途径。研究乙醇浓醪发酵具有十分重要的现实意义。本文综述了乙醇浓醪发酵技术研究进展，介绍了乙醇浓醪发酵定义、优势以及影响乙醇浓醪发酵的因素。指出降低发酵醪液黏度、筛选高耐性酿酒酵母、改变发酵工艺模式、添加适宜酶制剂以及营养物质是实现乙醇浓醪发酵技术的主要途径，其中筛选高耐性的酿酒酵母是实现乙醇浓醪发酵技术的关键。