葡萄LOX基因的克隆及表达分析

绿叶挥发物(green leaf volatiles,GLV)包括C6和C9醛类、醇类和脂类,是酿酒葡萄(Vitis vinifera)和葡萄酒中一类重要的香气成分.脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)是合成GLV的关键酶.本研究从酿酒葡萄赤霞珠果实中克隆VvLOX1 (KF033130)和VvLOX2(KF033131)基因cDNA全长,经生物信息学分析得出,二者分别属于Ⅰ型9-LOX和Ⅱ型13-LOX.这2个基因在葡萄叶片和根中的表达显著高于卷须和茎中的表达.在葡萄果实发育过程中,VvLOX1和VvLOX2基因表达与GLV合成有关,但基因表达高峰比C6和C9物质含量高峰提前2周出现.创伤处理后VvLOX2基因表达量与C6物质含量呈显著正相关,说明该基因在植物抗逆反应中发挥重要作用.本研究结果为探讨LOX基因在葡萄香气形成中的作用机理提供基础资料.
根据NCBI中的木糖还原酶基因序列设计引物,利用高保真聚合酶克隆树干毕赤酵母木糖还原酶基因,加A后克隆到质粒pGM-T中,测序验证.然后将目的基因克隆到舍有强启动子的穿梭表达载体p424GPD中,构建含有XYL1基因的重组质粒p424GPD-XYL1.将p424GPD-XYL1转化到大肠杆菌中,提取总蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析.酶活测定确定木糖还原酶基因XYL1在大肠杆菌中得到活性表达,表明表达载体构建成功.表达载体的成功构建为后续构建重组酿酒酵母利用木糖发酵奠定基础.
本发明提供白酒催熟设备，涉及白酒生产的技术领域，包括设备主体、催熟装置和溶氧装置；所述设备主体中间设置有用于容纳白酒的容腔；且在所述设备主体上下两端设置有与容腔连通的进料口和出料口；本发明提供的白酒催熟设备及酒液催熟方法，可以明显改善白酒的口感和饮后感，使白酒的品质得以提升，通过白酒催熟设备处理的白酒一周左右的时间，达到自然存放白酒一年的效果，大大缩短白酒的生产周期，降低生产成本，且溶氧装置能够增加白酒催熟设备内的溶氧量，同时可将白酒中的易挥发性杂质带出，白酒原液富氧化，配合超声波效应处理白酒，缩短白酒的熟化时间。
对两组评酒员的平均打分进行双样本 t 检验及 kendall 协调系数 W 检验,最终确定第一组评酒员更可信;然后利用基于主成分的聚类分析和评酒员对酒样平均打分,实现酿酒葡萄分类定级;采用基于主成分的多分类 Logistic 回归建立酿酒葡萄与葡萄酒的理化指标之间的数学模型;通过制定葡萄酒分类标准,利用基于主成分的多分类 Logistic 回归建立酿酒葡萄和葡萄酒的理化指标与葡萄酒等级的数学模型.
白酒中不挥发性有机酸可能是白酒呈酸味的重要化合物,为明晰白酒原酒中不挥发性有机酸的组成与含量,采用N,O-双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(N,O-bis(trimethylsilyl) trifluoroacetamide,BSTFA)衍生化结合气相色谱-质谱(GC-MS)研究白酒中不挥发有机酸,共检测到27种有机酸.通过定量这些有机酸在7种香型白酒原酒中的分布,发现羟基酸的种类最多,且总浓度最高.在检测的所有有机酸中乳酸含量最高,在几百mg/L至几个g/L之间,远远高于其他不挥发有机酸.大多数不挥发有机酸在酱香型、芝麻香型白酒中的含量较高,在清香和凤香白酒中的含量较低.
以啤酒酵母菌种(Saccharomyces cerevisie)Y316进行1 000 L罐的酒精生产性中试.玉米粉的质量分数为33.3%,95 ℃下液化1 h,60 ℃糖化1 h,30 ℃保温发酵(60～70) h.发酵醪产酒精13.9%以上,残糖1%以下,淀粉利用率90.5%以上.