本土戴尔有孢圆酵母在葡萄酒酿造中的应用潜力

对从甘肃祁连产区筛选获得的3株戴尔有孢圆酵母(Torulaspora delbrueckii)的生理特性及发酵性能进行分析,并选用T.delbrueckii R12与酿酒酵母以不同接种方式和接种比例混合酿造赤霞珠干红葡萄酒.结果表明:3株菌均具有良好的抗逆性,可耐受体积分数12％乙醇、400 mg/L SO2和400 g/L糖;在含200 g/L糖的模拟汁中单独接种,3株菌均能完成发酵,乙醇产量(体积分数)达11％,当糖质量浓度不小于300 g/L时,3株菌能启动发酵但未能代谢全部糖分.优选菌株R12在与酿酒酵母同时及顺序接种的混合发酵中均可保持良好的定植能力,其中顺序接种中R12的增殖量更大;酒样中挥发酸含量随T.delbrueckii接种比例的增加而显著降低.研究表明,本土T.delbrueckii发酵性能优良,具有酿造我国地区特色葡萄酒的广阔应用前景.
本发明提供一种白酒冷凝器，包括壳体、壳体内的冷凝腔体、壳体侧壁下部的冷凝水进口、壳体侧壁上部的冷凝水出口、壳体上端的蒸汽缓冲腔、蒸汽缓冲腔顶部的进气管、壳体下端的酒液容置腔、酒液容置腔底部的出酒管、冷凝腔体内多根平行设置的冷凝管以及连接冷凝管的上管板和下管板。本发明的白酒冷凝器，冷凝管上部及下部为直管，中部为螺旋管，上管板和下管板可拆卸的连接在壳体的上部和下部，酒液容置腔可拆卸的连接在壳体下端。本发明提供的白酒冷凝器，便于清洁、节能环保，且冷凝效果好，有利于酒液内风味物质的保存，提高酒的品质。
从贝达葡萄中提取总RNA,采用RT-PCR方法,克隆到了白藜芦醇合酶(resveratrol synthase,RS)基因的全长cDNA.将其与圆叶葡萄(Vitis rotundifolia)、华东葡萄(Vitis pseudoreticulata)、河南毛葡萄(Vitis ficifolia)、河岸葡萄(Vitis vulpine)、酿酒葡萄(Vitis virufera)、羊蹄甲(Bauhinia)、花生(Arachis hvpogaea)、虎杖(Polygonum cuspiaatum)、大黄(Rheum officinale)进行氨基酸同源性比对,结果表明:分离的RS基因与其他葡萄的RS基因编码的氨基酸同源性达到97％以上,与其他属的RS基因编码的氨基酸同源性达到64％以上.生物信息学分析表明,该蛋白分子量为43kD,等电点pI=6.2,包含392个氨基酸残基.将RS的全长cDNA插入到表达载体pET28a中构建重组表达质粒pET28a-RS,转化大肠杆菌BL21,SDS-PAGE电泳检测结果表明,以30C、0.5mmol·L--1PTG诱导4h时该基因表达效果最好,诱导产物为1个约43kD的蛋白,为进一步纯化和鉴定目的蛋白提供了基础.
为了提高啤酒酵母的利用率,利用啤酒废酵母资源,采用自溶与添加外源酶相结合的方法制备酵母抽提物.以氨基氮得率、总氮得率和固形物得率为主要指标考察了对酵母自溶影响关键的几个因素,包括自溶促进剂、自溶时间、酶解时间,并在此基础上对酵母酶联自溶进行正交试验,结果表明:自溶-酶联技术是制备啤酒酵母抽提物的理想方法,制成品中氨基氮得率、总氮得率和固形物得率分别达到4.30%、8.98%和59.0%.并对其物理性状、溶解性、pH、干湿比、总氨基酸含量等理化参数指标进行评定.
利用外源过氧化氢对酿酒酵母突变株Y518进行氧化胁迫来研究外源性氧化胁迫对Y518合成谷胱甘肽的影响.结果表明:添加过氧化氢会抑制Y518细胞生长,但会促进其合成谷胱甘肽;当过氧化氢的添加时间为24 h,添加量为0.6 mmol/L时,Y518胞内谷胱甘肽含量达到(13.69±0.28) mg/g,比未添加过氧化氢时提高了约14％;在24 h时添加0.6 mmol/L过氧化氢会对Y518产生外源性氧化胁迫,激活转录调节子YAP1和SKN7调控γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶和谷胱甘肽合成酶编码基因GSH Ⅰ和GSHⅡ的表达,提高y-谷氨酰半胱氨酸合成酶和谷胱甘肽合成酶的活力,以促进Y518合成谷胱甘肽.因此,添加外源过氧化氢能够使酿酒酵母突变株Y518产生外源性氧化胁迫,促进Y518进一步合成谷胱甘肽.
以4个酿酒葡萄品种(北醇、 梅鹿辄184、 黑比诺222、 品丽珠)及4种砧木(贝达、SO4、Ln33、LDP294)为试验材料,考察不同低温处理(0、-7、-15、-20、-30、-70℃)对CAT活性、POD活性、PPO活性、SOD活性、MDA含量、 可溶性糖含量及Pro含量等生理指标的影响,并通过隶属函数法、 生理指标的相关性及主成分分析对酿酒葡萄的抗寒性进行综合性评价.结果表明:经隶属函数统计分析,8个酿酒葡萄及砧木品种的综合抗寒性从高到低依次为贝达、Ln33、LDP294、 北醇、SO4、 黑比诺222、 梅鹿辄184、 品丽珠.对7个抗寒性指标的相关性分析显示,在葡萄抗寒性鉴定中,不能单独依赖某个或某两个指标对葡萄抗寒性进行评价;各测定指标主成分分析显示,CAT活性、POD活性、PPO活性及MDA含量具有绝对值较大的特征向量,贡献率达48.66%.