一种RNA提取试剂盒--TRIZOL的使用方法初探

以酿酒酵母为原料,利用TRIZOL试剂快速提取法,得到的总RNA不完整,只有5s rRNA一条条带,经过对该试剂盒的改进后提取的总RNA呈现28s rRNA,18s rRNA和5s rRNA三条清晰的条带,很少有降解,其A260/A280值可达1.946,A260/A230值为2.070,具有很高的纯度.
采用顺序注射氢化物发生-原子荧光光谱法测定酒中痕量铅.在盐酸载液中加入2.5%(v/v)无水乙醇,可以对测定系统进行较好的清洗,改善了测量的稳定性.对载液酸度,硼氢化钾浓度等实验条件进行了研究,工作曲线在Pb浓度5.0～80μg/L的范围内线性关系良好,相关系数r=O.9992,检出限为0.24μg/k,相对标准偏差为1.8%,加标回收率为96%～103%.适用于白酒、葡萄酒和啤酒样品中痕量铅的测定.
以啤酒酿造生产菌株啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)FB作为出发菌株，用甲基磺酸乙酯(EMS)诱变，经分离筛选得到一株优良的啤酒酵母菌株BEZ112。该菌株的絮凝性、发酵度、酒精度、发酵液的总酯和总高级醇的含量等特性保持了亲株的优良性状。但以12°Bx麦芽汁为培养基用500mL三角瓶在12℃下发酵，该菌株发酵至第4d，发酵液中的双乙酰含量达到峰值(0.291mg/L)，比出发菌株FB发酵4d的峰值降低了30％，发酵至第8d，BEZ112发酵液中的双乙酰含量比出发菌株FB的降低了23％。以12°Bx麦芽汁为培养基用500L罐在12℃下发酵8d，BEZ112发酵液中的双乙酰含量(0.091mg/L)比出发菌株FB的(0.124mg/L)降低了27％。发酵得到的啤酒口感纯正清爽。
研究了脉冲宽度对高压脉冲下细胞膜和细胞器膜跨膜电压的影响及细胞膜能量的变化,以及13 μs,200 ns和2 ns脉冲对酿酒酵母(CICC31180)杀灭作用时脉冲数的影响.结果表明,随着脉冲数增加,13μs,200 ns和2 ns脉冲对啤酒酵母的灭杀效果均增强.在13 μs脉宽,14 kV电压和50个脉冲数下,酵母达到最小存活率-4.3个对数;在200 ns脉宽,40 kV电压和500个脉冲数下,酵母达到存活率-2.6个对数;在2ns脉宽,200 kV电压和500个脉冲数下,酵母达到存活率-2.8个对数.三种脉冲对酵母菌杀灭的存活率对数与脉冲数的关系表现不是线性的,脉冲数增加到一定程度,存活率下降变缓.在同等灭杀效果-2.0个对数下,2 ns脉冲比13 μs脉冲在同轴电极中损耗的能量更少.
本发明涉及一种果母液白酒，它是在酿造白酒过程中，以营养丰富的果母液代替酿造白酒过程所用的天然水，使酿造的白酒具有较高的营养价值，具体酿造工艺基本与普通白酒酿造工艺相同，只是在原料处理时，润料所用的普通水改用含果糖相对较高的果母液，而在成品酒用水调兑所用水也为果母液，但其含糖浓度较低，因此该酒含有人体必需的氨基酸、多种微量金属元素及相关营养成分，酒味佳、柔和、醇净，外观清澈透明等优点。
通过PCR分析发现Kluyveromyces delphensis中存在与酿酒酵母相似的snR72～78 snoRNA基因簇.对该基因簇进行序列测定并与酿酒酵母比较分析,发现基因簇中各个snoRNA编码区具有一定的保守性,但是基因间隔区却有完全不同的序列,这表明RNaseⅢ对snoRNA前体加工的识别信号存在于各snoRNA基因间隔区的高级结构中.进一步对另外4种酵母进行PCR分析,结果表明snR72～78 snoRNA基因簇是一种保守的基因组织,普遍存在于各种酵母中.