以菊芋为原料利用固定化酶和细胞两步法发酵生产乙醇

对以菊芋为原料,将酿酒酵母细胞与菊粉酶分别固定用两步法发酵生产乙醇的最适发酵条件进行了探讨,实验结果表明:当温度为28 ℃,pH值为5.2,发酵液糖度为20%,反应器连续流动流速为42 mL/min时,发酵速度最快,酒精转化率最高,在发酵28 h时,酒精转化率达96.6%,发酵醪中乙醇含量达10.96%.
目的 体外研究红酒多酚成分对细胞色素P4503A4(CYP3A4)介导的硝苯地平代谢的影响.方法 将红酒多酚、人肝微粒体及探针底物睾酮孵育后,用高效液相色谱法测定代谢产物6β-羟基睾酮的生成量,用来考察红酒多酚对CYP3A4抑制的浓度依赖性.将不同浓度红酒多酚、人肝微粒体与硝苯地平孵育,测定硝苯地平的减少率并计算IC50值.在不同浓度硝苯地平存在下,绘制米氏曲线,得到红酒多酚存在时硝苯地平的代谢清除率CL红酒(Km-红酒/Vmax-红酒),对比空白组,考察红酒多酚对硝苯地平代谢的影响.结果 红酒多酚对CYP3A4存在明显的浓度依赖抑制效应(IC50=18.29％).在以硝苯地平为底物时,IC50为25.04％.红酒多酚对硝苯地平的代谢清除率CL红酒为14μL·min-1·mg-1,显著低于空白组(640 μL·min-1·mg-1).结论 红酒多酚可通过抑制CYP3A4的活性,减少其对硝苯地平的代谢,具有诱导食物-药物不良反应的风险.
为了探讨生物制剂对于浓香型白酒高级醇产生的影响,调控高级醇的产量,采用实验室模拟固态发酵的方法,通过添加生物制剂,测定高级醇的产量,利用正交试验、二次多项式逐步回归和响应面分析法,建立生物制剂添加量同白酒中高级醇生成量的关系.结果表明:添加活性干酵母0.8％、糖化酶1 000 U/g、α-淀粉酶50 U/g时,高级醇总量比空白降低了21.06％.构建的数学模型,可以预测不同干酵母、α淀粉酶、糖化酶的添加量时高级醇产量,从而达到在既满足浓香型白酒应有风味的同时,又能有效地调控高级醇产量,提高浓香型白酒的品质的目的.
为了定向遗传改造黑曲霉菌种,研究了黑曲霉(Aspergillus niger)ATCC1015转化甾体16α,17α–环氧黄体酮活性.转化产物经过薄层层析(TLC)、高效液相色谱(HPLC)以及氢谱、碳谱分析最终确定为11α–羟基–16α,17α–环氧黄体酮.确定了黑曲霉ATCC101511α–羟基化活性受底物16α,17α–环氧黄体酮的诱导.鉴于真菌的甾体羟化酶属于细胞色素P450酶,从黑曲霉ATCC1015的P450(CYP)基因数据库中筛选出57个具有编码甾体羟化酶潜力的CYP基因;利用实时荧光定量PCR确定了2个受甾体底物高度诱导的候选目标甾体羟化酶基因AnA100和AnA154.分别构建了AnA100基因和AnA154基因的重组酿酒酵母菌株pYES2-AnA100和pYES2-AnA154,甾体转化结果显示重组酵母菌pYES2-An100能够转化16α,17α–环氧黄体酮生成11α–羟基–16α,17α–环氧黄体酮.
利用共沉淀法合成了磁性Fe3 O4纳米粒子,进一步表面功能化,合成Fe3 O4@Au磁性纳米粒子提高粒子表面的亲和性。在高亲和力的金壳表面自组装L-半胱氨酸-GA3,将其滴涂在磁控玻碳电极表面,电聚合L-半胱氨酸制得对GA3具有特异性识别能力的MIP/Fe3 O4@Au修饰电极。对Fe3 O4@Au磁性纳米粒子的表面形态及粒度分布进行了透射电镜分析,对GA3, MIP及nMIP的结构及成分进行了红外光谱对比分析。利用电化学方法对测试体系的工作条件进行了优化。研究表明,当电聚合圈数为30圈,以乙酸-甲醇(1：8, V/V)作为洗脱液、洗脱时间为5 min、重吸附时间为7 min时,传感器具有较高的稳定性,且对GA3具有较好的识别效果。结果表明,探针离子K3[Fe(CN)6]/K4[Fe(CN)6]的氧化峰电流值与GA3浓度在1.0×10-11~1.0×10-8 mol/L范围内呈线性关系,检出限为2.6×10-12 mol/L。此传感器已应用于啤酒中GA3的检测。
较详细地介绍了国内外α-乙酰乳酸脱羧酶(ALDC)的分子生物学研究,细菌ALDC基因在酵母菌中的克隆和表达,以及ALDC酶制剂加速啤酒成熟的应用.