虫草属真菌经植物环节"宿主跳跃"的初步研究

从酿酒葡萄(Vitis vinifera L.)和番荔枝(Annona squamosa L.)中分离并鉴定两株植物内生来源的虫草属真菌和一株拟青霉,并就已知昆虫、块菌来源的虫草属真菌ITS分子序列建立了在不同宿主体内的虫草属真菌系统发育树,重现了其物种在协同进化历程中在不同宿主体内发育的现象.发现虫草属真菌在进化过程中除了昆虫与块菌外可能还经由植物的"宿主跳跃"环节.
本实用新型的目的是提出一种浓香型白酒发酵窖池，该种浓香型白酒发酵窖池可以减少起糟时对窖泥的损伤，从而提高窖池酿造功能的稳定性和基酒的质量。本实用新型的具体结构如下：窖池的窖底铺设有硬质地砖，窖池的窖壁固定有硬质墙砖，所述地砖及墙砖均由窖泥烧制而成；地砖均匀设有顶部开口的凹坑；所述墙砖内设有中空腔体，所述腔体的上部设有朝向窖池中部方向的开口；所述凹坑及腔体内均盛装有窖泥；所述地砖在凹坑的旁侧设有与窖底相通的地砖透气孔；所述墙砖在腔体上方设有与窖壁相通的墙砖透气孔，所述墙砖透气孔的底端与腔体的顶部连通，且墙砖透气孔由下至上逐渐向窖壁方向倾斜。
本发明公开了白酒原粮汽爆糊化处理方法，将粮食用热水清洗浸泡，将水排尽自然晾干，使粮粒吸水充足、开口率达到93％～95％，含水量达40％～45％；再将粮食置入80℃～90℃汽爆罐中，通入干蒸汽至汽爆罐内压力达到1.5～3.0MPa，调节蒸汽流量，保持该压力5～10分，打开汽爆罐排料阀，将粮食汽爆喷放到常压接料罐中，待粮食物料全部排出，气爆罐压力降至零，开启接料仓仓门，收集粮食物料。显著优点是：通过汽爆作用，增加原料利用效率，减少糠壳用量，明显提高出酒率；汽爆可降低甚至消除白酒中甲醇含量，提高了白酒安全，由于在制酒工艺中去除了粉碎和蒸煮工序，避免环境污染，减少了人力、能耗、降低了白酒酿造成本。
为了最大程度上获取短乳杆菌49(Lactobacillus brevis 49)的蛋白质信息,分别优化了蛋白质的提取条件与酶解条件.用正交实验法考察细胞破碎方法、蛋白酶种类、酶解时间、酶添加量4个因素对L.brevis 49的胞内蛋白提取方法以及酶解方法的影响,以质谱中检测到的蛋白质数目为参考指标进行优化;同时对培养基氮源进行优化,并分别选用TCA沉淀法、冷丙酮沉淀法、平衡酚-丙酮法和超滤法提取发酵液中的胞外蛋白.结果 表明:L.brevis 49胞内蛋白最佳的提取破壁方法为超声破碎法,最佳水解酶为糜蛋白酶和胰蛋白酶共同作用,最佳的酶与蛋白质量比为1∶50,最佳酶解时间为12h,获得胞内蛋白数目527个.获得L.brevis 49胞外蛋白的最佳培养基为0.6％酵母浸粉做单一氮源的MRS培养基,最佳提取方法为三氯乙酸(TCA)法,可获得44个含信号肽蛋白.该方法有望为啤酒的安全检测提供参考.
为了研究菌株和接种方式对冰葡萄酒非挥发性产物和挥发性香气成分的影响,选用2株自筛非酿酒酵母——仙人掌有孢汉逊酵母(Hanseniaspora opuntiae)和葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum),分别与商业酿酒酵母DV10混合发酵.结果表明:H.uvarum与DV10同时接种混合发酵可以显著降低乙酸产量(降低26.90％);H.opuntiae与DV10同时接种混合发酵促进了酯类和萜烯类物质的合成,总量分别增产88.61％和21.40％,其中乙酸苯乙酯含量提高14.60倍,β-大马士酮增产8.85％.除此之外,感官品评结果显示H.opuntiae 与DV10混合发酵可显著增强花果香和黄油味.综合分析,认为H.opuntiae更适合应用于冰葡萄酒发酵,为冰酒混合发酵的进一步研究提供了数据基础和理论依据.
为提高K luyverom yces marxianus(K.marxianus)发酵菊芋粉生产乙醇过程中的菊粉酶活性,以酿酒酵母rDNA为整合位点,构建菊粉酶基因的整合表达载体pFA6a-rDNA-pgk-inu.经SphⅠ线性化后,采用电击法转化K.marxianus,使表达载体整合到K.marxianus的染色体上.经PCR鉴定的阳性转化子能够分泌菊粉酶且能在无筛选压力下稳定遗传50代.重组菌K/r-2分泌的菊粉酶活力为140 U/mL,比出发菌株提高了80％.以粗菊芋粉生料为底物进行了补料发酵,重组菌株的发酵终点乙醇浓度为76.5 g/L,比出发菌株提高了5 g/L,达到理论转化率的96％.这些研究工作为非粮作物菊芋生产燃料乙醇奠定了基础.