有机溶剂二次沉淀法提取纯化酵母菌超氧化物歧化酶的研究

酿酒酵母BUV094经发酵培养后,离心收集菌体,将菌体用甲苯法破壁得到粗酶液,粗酶液经调节PH除杂蛋白,丙酮二次沉淀三步纯化工艺,得到纯化的SOD,其比活为1015U/mg,收率为65.2%.PAGE电泳后的活性染色显示,酵母超氧化物歧化酶具四条同功酶.该样品经KCN,H2O2,氯仿-乙醇抑制试验,酶类型为Cu/ZnSOD.
白酒中特殊香气的获取分析方法，属于白酒风味物质分析技术领域。本发明解决的技术问题是现有方法体系前处理方法针对性不强，耗时、耗力、成本高。本发明取适量待测白酒和酒杯，经专业尝评人员确定香气类型后，依次逐个浸润酒杯边壁，直至白酒全部浸润于酒杯边壁，然后控制挥发时间至杯中所残留的香气为上述香气类型，立即在残留香气的酒杯中加入有机溶剂进行逐个洗脱并合并所有洗脱液，最后利用气质联用仪对洗脱液进行定量检测。本发明适用于不同香型的白酒特殊呈香化合物的获取、鉴定、确认，方法便捷、易于排除背景香气干扰、针对性强，为白酒中特殊香气物质的获取与分析提供了一种很好的途径。
本发明提供了一种白酒熟化设备及熟化方法，涉及白酒加工技术领域，解决现有技术中白酒熟化设备生产成本较高，对白酒熟化过程不精确的技术问题。该设备包括压力罐、进酒系统、曝氧系统、超声波系统、温控系统、出酒系统和控制系统，曝氧系统与控制系统连接，以控制曝氧系统开启向压力罐曝气；超声波系统与控制系统连接，以控制超声波系统开启对压力罐内酒液进行超声波处理；温控系统与控制系统连接，用于在曝气和超声波处理中待压力罐内的温度达到温控系统的启动温度值时控制温控系统开启进行冷却处理；并在压力罐内温度达到温控系统的关闭温度值时控制温控系统关闭。通过本发明的熟化设备熟化的白酒损耗少口感更好，大大缩短了储存时间。xa0xa0
啤酒发酵是一个时变大滞后的过程,本文旨在对发酵过程进行分析,提出了基于PID控制的预估控制方法,得到了较好的控制效果.
[目的]Pbs2是MAPK信号途径HOG-MAPK通路的重要成员之一,在植物病原菌渗透压调节方面发挥着重要作用.橡胶树白粉病菌(Oidium heveae)是专性寄生菌,论文借助橡胶树炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides),研究橡胶树白粉病菌OhPbs2的功能.[方法]采用同源克隆方法,分别以橡胶树白粉病菌基因组DNA和cDNA为模板,PCR扩增OhPbs2;利用生物信息学分析该基因的结构域,对该基因和其他真菌的7个同源蛋白序列进行系统进化分析,并利用MEGA6中最大简约法构建系统进化树来进一步分析鉴定该基因;利用同源重组和原生质体转化技术,将OhPbs2转化到缺失Pbs2的橡胶树炭疽菌突变体ΔCgPbs2中;在PDA+1.5 mol·L-1山梨醇的平板上筛选转化子,同时提取转化子的基因组作为模板,用橡胶树白粉病菌OhPbs2的引物对进行PCR鉴定,选择正确的转化子ΔCgPbs2+OhPbs2进行后续表型测定;在不同培养条件下,比较ΔCgPbs2、ΔCgPbs2+OhPbs2和野生型菌株生长状态,并在橡胶树叶片接菌检测3个菌株致病力.[结果]OhPbs2基因序列全长1927 bp,cDNA序列全长1860 bp,含有一个内含子,编码一个619个氨基酸的蛋白;生物信息学分析表明该蛋白具有与CgPbs2相同的S_TKc功能域,构建系统进化树发现橡胶树白粉病菌Pbs2蛋白与烟曲霉(Aspergillus fumigatus)Pbs2蛋白亲缘关系最近,相似度为55%,与橡胶树炭疽病菌的相似度为49%,与粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)、稻瘟菌(Magnaporthe oryzae)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、禾谷镰孢(Fusarium graminearum)的Pbs2蛋白具有较近的亲缘关系,相似度分别为54%、53%、53%、50%;ΔCgPbs2+OhPbs2菌株能在PDA+1.5 mol·L-1山梨醇培养基上长出白色菌落,ΔCgPbs2菌株不能生长,并且测序结果显示OhPbs2已成功转入ΔCgPbs2;ΔCgPbs2+OhPbs2在MM培养基上菌落呈白色,气生菌丝较短,不同于wild type菌株.在含有不同浓度NaCl、山梨醇、SDS、H2O2及咯菌腈的MM培养基上,ΔCgPbs2、ΔCgPbs2+OhPbs2和wild type菌株随着浓度增加,菌落生长速度逐渐降低,OhPbs2不仅能恢复橡胶树炭疽菌菌株耐渗透压尤其耐受山梨醇的能力以及对咯菌腈的敏感性,甚至具有增强的能力,OhPbs2互补改变了橡胶树炭疽病菌颜色,抑制了气生菌丝生长;CgPbs2可能参与了橡胶树炭疽病菌致病性,但OhPbs2互补没有恢复其致病性.[结论]OhPbs2可能参与调控病菌的营养生长、氧化应激反应、渗透压响应及细胞壁形成等,并能增强橡胶树炭疽病菌相应功能,但与CgPbs2调控病菌致病力的机制可能存在不同.
本实用新型公开了一种白酒自动选择收集系统，包括酒槽和酒液收集管路系统；酒槽由主体酒槽、头酒槽和尾酒槽组成；酒液收集管路系统包括用于酒液收集的主体管及连接主体管的主体酒收集管、头酒收集管和尾酒收集管；主体酒槽上配装有酒槽循环管，酒槽循环管上装有水泵B；主体管旁侧设有管道回路A，酒槽循环管旁侧设有管道回路B；所述管道回路A、B相互独立运行，或者管道回路A、B的其中一部分管路共用一条检测支路，检测支路上装有水泵A和酒精浓度检测仪；本实用新型达到了依次对尾酒、头酒和主体酒进行自动判别和收集的目的，检测精准，择酒效率高，确保了白酒的生产质量，将操作人员从繁重和重复性的手工劳动中解放出来。