航天搭载酵母菌种在保健饮液上的研究应用

系统介绍了航天搭载酵母菌种在保健饮液开发中的应用,以太空搭载的东方红1号酿酒酵母菌株为核心,综合配伍提高神经、免疫、内分泌功能的各种有效成分,研制复合新型保健饮液--"东方红1号"宇航口服液.该饮液具有增强免疫力、调节肠道菌群等重要功能,并按照国家对保健食品的要求进行产品的安全性评价实验、保健功能评价实验.
[目的]系统研究Bacillus subtilis LC-9所产β-l,3-1,4-葡聚糖酶的酶学性质,探讨其在催化应用上的可行性.[方法]采用两步阴离子交换层析法对B.subtilis LC-9发酵液中的β-l,3-1,4-葡聚糖酶进行纯化,用SDS-PAGE检测其纯度,研究纯酶的酶学性质及该酶对β-葡聚糖和地衣多糖的降解特性,并采用TLC法检测其水解液中糖的成分.[结果]从自行筛选的糖苷酶产生菌B.subtilis LC-9的发酵液中经两步纯化,得到电泳纯的β-1,3-1,4-葡聚糖酶,其比活力达3 502 U/mg,表观分子量为28 kDa;酶的最适反应pH和温度分别为6.5和45℃,且在45℃下稳定；该酶催化地衣多糖的Km值和Vmax分别为4.13 mg/ml和1 238μmol/min/mg,催化大麦β-葡聚糖的Km值和Vmax分别为3.84 mg/ml和1 427 μmol/min/mg；该酶降解大麦β-葡聚糖产生寡聚糖,最终产物主要为三糖和四糖,而降解地衣多糖终产物主要为三糖.[结论]从Bacillus subtilis LC-9发酵液中纯化获得了电泳纯的β-1,3-1,4-葡聚糖酶,性质研究表明该酶是专一性的β-1,3-1,4-葡聚糖酶,有望用于啤酒、饲料等领域.
本发明公开了一种白酒储存灌装智能管理方法，储酒罐分配采用控制器智能化分配，且可实时掌握储酒罐内的温度信息，保证白酒存储的质量；灌装采用流量计智能化灌装，灌装结束后，进行灌装统计分析，对白酒酒量进行连续实时监控，实现一体化监控。本发明采用智能自动化控制，大大降低了工作人员的工作量，且提高了白酒加工的效率。
【目的】探索益生性酿酒酵母菌对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1（sheep beta-defensin-1, SBD-1）表达的调节作用，为在分子水平上揭示益生菌对防御素的调控机理提供一定的理论基础及依据。【方法】首先将新鲜的绵羊瘤胃组织用 PBS 和抗生素处理后进行瘤胃上皮细胞原代培养，当原代细胞数量长到细胞培养瓶的85%以上时，将细胞传于12孔板用于细胞刺激试验。同时将活化并纯化后的酿酒酵母菌25℃、180 r/min有氧培养48 h后，进行5次平行平板计数试验，根据平板计数的数据处理方法，得到浓度为5.2×108 CFU·mL-1的酿酒酵母菌液，再通过倍比稀释把所得菌液依次稀释成浓度为5.2×107、5.2×106、5.2×105、5.2×104 CFU·mL-1的菌液，用以上不同浓度（5.2×104—5.2×108 CFU·mL-1）的酿酒酵母菌对体外培养的绵羊瘤胃上皮细胞分别进行不同时间（2、4、8、12、24 h）的刺激，并设置对照组用DMEM/F12培养基代替酿酒酵母菌。然后提取总RNA，逆转录为cDNA后，利用实时荧光定量PCR技术和酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测瘤胃上皮细胞中SBD-1表达差异。最后用SAS 9.2软件对数据进行相关差异性分析。【结果】荧光定量PCR结果表明，在各时间组内SBD-1 mRNA的表达量随着菌液浓度的增加均呈先升高后降低的趋势，当菌液浓度为5.2×107 CFU·mL-1时表达量达到最大，并与对照组和其他浓度组相比差异极显著（P＜0.01）。当菌液浓度一定时，SBD-1 mRNA的表达量先是随着刺激时间的延长而呈上升趋势，刺激时间为12 h时SBD-1 mRNA表达量达到峰值，之后呈下降趋势。因此，当浓度为5.2×107CFU·mL-1的菌液刺激瘤胃上皮细胞12 h后，SBD-1基因的表达量达到最高，且与此浓度下其他时间组的表达量相比差异极显著（P＜0.01）。ELISA检测结果显示，SBD-1蛋白表达趋势与SBD-1 mRNA检测结果基本一致。不同浓度的菌液分别刺激绵羊瘤胃上皮细胞2、4、8、12、24 h后均能提高共培养上清中SBD-1蛋白的表达，且与对照组相比存在极显著差异（P＜0.01）。在菌液浓度为5.2×107CFU·mL-1刺激瘤胃上皮细胞12 h后SBD-1蛋白分泌水平达到最高，与此浓度下各时间组相比差异极显著（P＜0.01）。【结论】酿酒酵母菌能够提高绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1的表达，且菌液浓度为5.2×107 CFU·mL-1刺激瘤胃上皮细胞12 h后，SBD-1的表达量达到最高。
本发明公开了一种白酒中多种生物胺的定性与定量方法，属于白酒分析检测技术领域。本发明利用液液萃取富集白酒中的生物胺，气相定性与液相定量均需要衍生，气相选用的衍生剂为TFAA，液相采用的衍生剂为丹磺酰氯柱前衍生。本发明建立的方法在白酒中首次定性到9种生物胺，定量方法检测限可低至10μg/L左右，线性相关系数大于0.99，回收率为80.19%~104.05%，相对标准偏差在4%以内。说明白酒中的生物胺可以利用该方法检测，可行性好，精密度高。
研究不同滴灌方式对葡萄根系分布的影响,是制定葡萄肥水管理和越冬防寒措施的依据.本研究以传统沟灌为对照,采用覆草滴灌、膜下滴灌、双管滴灌、单管滴灌等不同节水灌溉方式,研究了荒漠灌区不同灌溉方式下酿酒葡萄‘赤霞珠’的根系组成与分布特点.结果表明:在干旱荒漠区‘赤霞珠’葡萄根系的垂直分布范围在0 ～ 70 cm,水平分布范围在0～120 cm.采用双管滴灌的根系数量最大,单个剖面根系数量达138.3条,但根系的垂直分布范围较对照(沟灌)缩小了20 cm;覆草滴灌的根系数量较对照显著提高,根系水平分布范围较对照扩大了9.1％;膜下滴灌的根系数量和水平分布范围与对照差异不显著,但根系垂直分布范围较对照减少了20 cm;单管滴灌显著提高了根系数量,但根系垂直分布和水平分布范围与对照差异不显著.在该生态区酿造葡萄最理想的节水滴灌方式是覆草滴灌.