海洋球石藻病毒甾醇去饱和酶基因的克隆与表达

以海洋球石藻(Emiliania huxleyi)病毒EhV-99B1基因组为模板,用一对病毒甾醇去饱和酶(sterol desaturase,SD)基因的特异性引物进行PCR扩增,获得EhV-SD基因,将扩增产物克隆至pMD19-T载体后进行测序,并对该基因编码的蛋白质序列进行生物信息学分析.将测序正确的目的基因亚克隆入酿酒酵母表达载体pYES2/CT中,转化酿酒酵母缺陷型菌株YMR015C,并用D-半乳糖诱导表达,提取重组酵母和野生型酵母细胞总脂并进行薄层色谱(thin layer chromatography,TLC)分析.结果显示:EhV-SD基因全长为987 bp,编码328个氨基酸,该蛋白质的理论等电点为8.31,预测的蛋白质分子质量为37.83 ku,为疏水性、 不稳定蛋白质,存在6个跨膜结构域,不存在信号肽;其二级结构中,α-螺旋含量最多.氨基酸序列比对结果显示,EhV-SD基因与宿主球石藻及金色藻属(Chrysochromulina sp.CCMP 291)亲缘关系较近.TLC结果表明,EhV-SD基因的表达导致酵母细胞极性较强的脂类明显减少,而极性较弱的脂质成分显著增加,表明EhV-SD具有一定的催化活性.
木糖还原酶催化木糖为木糖醇的反应,是木糖代谢的第一步.将木糖还原酶的基因XYL1引入酿酒酵母中,构建得到高效表达XYL1基因的重组酿酒酵母茵株HYEX2,该重组菌株的木糖还原酶比活力为7.47 U/mg.研究表明,该菌株获得转化木糖产生木糖醇的能力,当辅助碳源葡萄糖的浓度为2%,并在发酵30 h左右添加木糖,木糖醇的转化率可达到0.94 g/g.
为筛选出适合天津地区种植的酿酒葡萄品种,生产出具有市场竞争力的葡萄酒产品,以晚熟、抗病、丰产、土壤适应性、酒质作为选择酿酒葡萄品种的主要依据,对天津地区引进的33个主要酿酒葡萄品种进行了栽培特性和酿酒品质方面的综合观测研究.结果表明,红葡萄酒用品种(赤霞珠、品丽珠、蛇龙珠、梅鹿辄、宝石解百纳、佳利酿)、白葡萄酒酒用品种(贵人香、玫瑰香、泽香)和白兰地酒用品种(白玉霓)等10个品种为晚熟或极晚熟品种,在抗病性、抗寒性、土壤适应性、丰产性、酒质等方面综合指标较好,适宜在天津地区种植.
本发明提供白酒净化设备及酒液除杂方法，涉及白酒生产技术的技术领域，包括设备主体、搅拌系统、净化系统和过滤系统；所述净化系统包括变压电源组和电解电极；所述电解电极位于所述设备主体的容腔内；所述搅拌系统包括搅拌电机和搅拌桨，所述搅拌桨位于所述设备主体内，所述搅拌电机与所述变压电源组相连。本发明提供的白酒净化设备及酒液除杂方法能够对设备主体内的白酒的杂质进行除杂，且搅拌系统使白酒中的挥发性高的杂质挥发排出设备主体，在白酒中的不易挥发高沸点油脂类杂质，在碱性环境中，产生造化反应，形成非可溶性固定后产生絮凝和析出，经过过滤系统后除去，这样达到净化白酒中杂质的目的。
对单芽茎段离体快繁获得的中国野生葡萄燕山-1 (Vitis yeshanensis‘ Yanshan-1’)×河岸-3 (V.riparia‘Hean-3’)杂种F1代的31个株系、河岸-3和酿酒葡萄品种‘赤霞珠’(V.viniera‘ Cabernet Sauvignon’)的组培苗进行耐盐性筛选,以筛选出优良的耐盐株系作为砧木育种的材料.取离体快繁技术获得的试管苗中部生长较为一致的单芽茎段加入含有不同浓度NaCl的生根培养基中,培养40 d内观察盐害症状,计算盐害指数,用相对耐盐指数对供试材料的耐盐性进行初步分级.通过筛选将供试的燕山-1×河岸-3杂种F1代的31个株系分为5个类型:11个株系为高耐盐葡萄、5个株系为耐盐葡萄、7个株系为中耐盐葡萄、5个株系为盐敏感葡萄、3个为盐高敏葡萄.此外,河岸-3为高耐盐葡萄、‘赤霞珠’为盐敏感葡萄;燕山-1×河岸-3杂种F1代的31个株系中有8个株系的耐盐表现优于父本河岸-3,出现超亲遗传现象.通过初步筛选,鉴定出11个高耐盐的杂种F1代株系,可以作为优良的砧木材料.
提取加拿大一枝黄花（Solidago canadensis L.）花序中的黄酮类物质，并研究其抑菌及保鲜作用.利用有机溶剂乙醇提取加拿大一枝黄花花序中的黄酮类物质；采用抑菌圈法进行抑菌性研究；采用测定好果率的方法研究其保鲜作用.当提取的加拿大一枝黄花花序中的黄酮类化合物的浓度为0.056 mg/mL时，即显示对杆菌的抑制作用，其对真菌的抑制作用较弱，对各菌种的抑制效果为：大肠杆菌（Escherichia coli）>枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）>酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae），对黑曲霉（Aspergillus niger）没有抑制作用.喷洒浓度为0.028 mg/mL的黄酮提取液的樱桃番茄实验组较对照组能有效降低霉变率，保鲜作用显著提高.加拿大一枝黄花花序中的黄酮类化合物具有一定的的抑菌及保鲜作用.该研究为加拿大一枝黄花的综合利用提供参考.